总糖的测定方法-第1篇.docx

    总糖的测定方法    总糖的测定方法（斐林氏溶液快速测定法）一、原理：酶制剂生产中需要测定发酵液中糖质原料的消耗情况，以便掌握发酵过程葡糖糖、果糖、麦芽糖等为醛基、酮基或半缩醛基的糖都具有还原性，能使二价铜还原为一价铜，发酵液中的糊精、淀粉经过酸水解也能成为还原糖可根据其还原性，用一定量的斐林氏溶液将葡萄糖完全氧化，过量的斐林氏溶液与碘化钾作用而析出碘，然后用硫代硫酸钠来滴定，查表求的发酵液中的糖含量二、试剂：1、3N的盐酸溶液：浓硫酸一份加蒸馏水3份2、6N的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠240.06克，溶解定容至1000毫升3、斐林氏溶液：A液：硫酸铜（五水硫酸铜）24克定容400毫升B液：酒石酸钾钠75克、氢氧化钠50克定容400毫升C液：碘化钾60克，定容200毫升A液、B液、C液混合为1000毫升溶液注意：配制时应按顺序配制，分别充分溶解，然后混合（A+B+C)摇匀备用4、4N的硫酸溶液：准确吸取化学纯浓硫酸111毫升于1000毫升的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度5、0.05N的硫代硫酸钠溶液：精确称取化学纯的硫代硫酸钠12.41克与碳酸钠0.1克，用新沸初冷蒸馏水溶解定容1000毫升。

此溶液配置好后需隔一周才能使用，每月需标定一次）6、1%的酚酞指示剂：称取酚酞1克，溶于95%的乙醇中，定容至100毫升三、操作方法：样品：吸取0.5毫升样品（发酵滤液），放入100毫升的三角瓶中（做两只可对照），加入3N的盐酸10毫升加热3分钟，冷却后滴入酚酞指示剂2滴，用6N的氢氧化钠溶液调至红色，再加入斐林氏溶液10毫升，煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶油色为终点（在接近终点时加1%的指示剂，使之呈紫色）空白：在100毫升的三角瓶中加蒸馏水10毫升，然后加入斐林氏溶液10毫升煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶白色四、计算：空白消耗0.05N的硫代硫酸钠的毫升数减样品消耗的0.05N的硫代硫酸钠的毫升数，然后查表表：0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.90 0.03 0.06 0.10 0.13 0.16 0.19 0.22 0.26 0.291 0.32 0.33 0.38 0.42 0.45 0.48 0.51 0.54 0.58 0.612 0.64 0.67 0.71 0.72 0.77 0.81 0.84 0.87 0.9 0.933 0.97 1.00 1.04 1.07 1.10 1.14 1.17 1.20 1.23 1.264 1.30 1.34 1.37 1.40 1.44 1.47 1.50 1.54 1.57 1.415 1.64 1.68 1.71 1.75 1.78 1.82 1.85 1.89 1.92 1.966 1.99 2.03 2.06 2.10 2.13 2.17 2.20 2.24 2.27 2.317 2.34 2.38 2.41 2.43 2.48 2.51 2.56 2.59 2.63 2.668 2.70 2.74 2.77 2.81 2.86 2.89 2.92 2.96 3.00 3.039 3.07 3.11 3.15 3.18 3.22 3.26 3.30 3.34 3.37 3.4110 3.44 3.48 3.52 3.55 3.59 3.63 3.67 3.71 3.74 3.7811 3.82 3.86 3.90 3.94 3.98 4.02 4.03 4.09 4.13 4.1712 4.21 4.25 4.29 4.33 4.37 4.41 4.45 4.49 4.53 4.5713 4.61 4.65 4.69 4.73 4.77 4.82 4.86 4.90 4.94 4.9814 5.04 5.06 5.10 5.14 5.18 5.25 5.27 5.31 5.35 5.40  -全文完-。