乳酸钠缓冲液.docx

以上介绍的方法用于测定中性蛋白酶(pH7.2)若要测定酸性蛋白酶或碱性蛋白酶，则把配制酪蛋白溶液和稀释酶液用的pH缓冲液换成相应pH缓冲液即可现把几种常用pH 缓冲液配方提供如下:1.5.1 pH7.5 磷酸盐缓冲液 (0.02mol/L)称取磷酸氢二钠(Na2HPO4・12H2O)6.02g和磷酸二氢钠(NaH2PO4・2H2O)0.5g以蒸 馏水溶解定容至 1000mL1.5.2 pH 2.5乳酸-乳酸钠缓冲液 (0.05mol)A液：称取80%〜90%乳酸10.6g，加蒸馏水稀释定容至1000mLB液：称取70%乳酸钠16g,加水稀释定容至1000mL取A液16mL与B液1mL混合稀释一倍即成1.5.3 pH 3.0乳酸-乳酸钠缓冲液 (0.05mol)A液：称取80%〜90%乳酸10.6g，以水定容至1000mLB液：称取70%乳酸钠16g,蒸馏水溶解定容至1000mL取A液8mL与B液1mL,混合稀释一倍即成1.5.4 pH 10硼砂-氢氧化钠缓冲液A液：称取硼砂19.08g,用蒸馏水溶解定容至1000mL (0.05mol)B 液:称取氢氧化钠8g,用蒸馏水溶解定容至1000mL (0.2N)。

取A液250mL,B液215mL混合,用蒸馏水稀释定容至1000mL即成1.5.5 pH 11.0硼砂-氢氧化钠缓冲液A液：称取硼砂19.08g,用蒸馏水定容至1000mLB液：称取氢氧化钠4g,用蒸馏水定容至1000mL取A液与B液等量混合1.5.6 2%酪蛋白溶液配成酸性时,须先加数滴浓乳酸,使之湿润以加速其溶解请问50mmol/L的乳酸钠缓冲液(PH4.5)和125mmol/L的酒石酸钠缓冲液(PH3.0)如何配制？？ 从瓶子上查1mol/L的试剂要加多少水，按比例加，然后分别稀释20倍，8倍就行了调 PH 比较麻烦，配 50mmol/L 的乳酸钠 用乳酸调到 PH4.5125mmol/L的酒石酸钠缓冲液(PH3.0)用酒石酸/氢氧化钠调到3.0调 PH 的原则是不引入其他离子有这个公式的无机化学上有缓冲溶液 buffer solution缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液PH缓冲系统对维持生物的正常pH值，正常生 理环境起重要作用多数细胞仅能在很窄的 pH 范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程 中出现的 pH 变化在生物体中有三种主要的 pH 缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。

每种缓冲 体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度研究工作的溶液体系 pH 值的变化往 往直接影响到我们工作的成效如果提取酶实验体系的 pH 值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全 失活所以我们要学会配制缓冲溶液由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、 巴比妥酸、Tiris (三羟甲基氨基甲烷)等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有 时影响实验结果的因素并不是缓冲液的 pH 值，而是缓冲液中的某种离子如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐 和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来 而且它在 pH7.5 以上时缓冲能力很小三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用其主要缺点时温度效应 这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris 一缓冲液，在4°C时是8.4,在37°C时是7.4，因此，4°C配制 的缓冲液拿到37C测量时，其氢离子浓度就增加了 10倍。

而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差缓冲液的 pH 值由哪些因素决定？设缓冲系统的弱酸的电离常数为K (平衡常数)，平衡时弱酸的浓度为［酸］,弱酸盐的浓度为［盐］,则由弱酸 的电离平衡式可得下式：根据此式可得出下列几点结论：(1) 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关弱酸一定，但酸和盐的比例不同时， 可以得到不同的pH值当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同2) 酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的 pH 值不便3) 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效 缓冲范围为 PK±1pH从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度)时，可按公 式计算出［盐］和［酸］的量这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我 们总结出 pH 值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表只要 我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量例如配制500nmpH5.8浓 度为0.1M磷酸缓冲液经查表知 pH5.8 浓度为 0.2M Na2HPO48.0 毫升，而 0.2M Na2HPO492.0 毫升。

依此可推论出配制 100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入 50ml 容量瓶，加蒸馏水至刻 度，摇匀，便得所需的缓冲液各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH。