乳酸的测定.docx

乳酸的测定——EDTA滴定乳酸钙法1 实验原理1.1乙二胺四乙酸（简称EDTA，常用H4Y表示）难溶于水，通常使用其二钠盐配制 标准溶液标定EDTA溶液常用的基准物有Zn、ZnO、CaCO3、Bi、Cu、MgSO4・7H2O、 Hg、 Ni、 Pb 等通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物，这样滴定条件较一 致EDTA溶液若用于测定石灰石或白云石中CaO、MgO的含量，则宜用CaCO3为基准 物首先可加HC1溶液与之作用，其反应如下：CaCO3+2HCl=CaCl2+H2O+CO2 f 然后把溶液转移到容量瓶中并稀释，制成钙标准溶液吸取一定量钙标准溶 液，调节酸度至PH212，用钙指示剂作指示剂以EDTA滴定至溶液从酒红色变为纯蓝 色，即为终点，其变色原理如下：钙指示剂（常以H2Ind表示）在溶液中按下式电离:H Ind=2H++HInd2-3在pH212溶液中，HInd2-与Ca2+离子形成比较稳定的络离子，反应如下：HInd2-+Ca2+—CaInd-+H+纯蓝色 酒红色所以在钙标准溶液中加入钙指示剂，溶液呈酒红色，当用EDTA溶液滴定时，由 于EDTA与Ca2+离子形成比CaInd-络离子更稳定的络离子CaY2-，因此在滴定终点附 近，CaInd-络离子不断转化为较稳定的CaY2-络离子，而钙指示剂则被游离了出来，其 反应可表示如下：CaInd-+H2Y2——CaY2-+ HInd2-+H2O酒红色无色 纯蓝色由于CaY2离子无色，所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。

用此法测定钙，若Mg2+离子共存（在调节溶液酸度为pH212时，Mg2+离子将形 成Mg（OH）2沉淀），此共存的少量Mg2+离子不仅不干扰钙的测定，而且会使终点比 Ca2+离子单独存在时更敏锐当Ca2+、Mg2+离子共存时，终点由酒红色变到纯蓝色， 当Ca2+离子单独存在时则由酒红色变紫蓝色，所以测定单独存在的Ca2+离子时，常常 加入少量Mg2+离子溶液滴定至终点后蓝色很快又返回至紫红色又称终点回头此现象是由钙镁盐类的悬 浮性颗粒所致，影响测定存在这样情况，可加盐酸酸化，便可除去碱度，后用 NaOH 溶液中和2 器皿和试剂酸式滴定管；乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na208.2H20 ），CaCO3，镁溶液（溶解 1g MgSO4・7H2O于水中，稀释至200mL），NaOH溶液（20%溶液），盐酸溶液（1+1） 钙指示剂（固体指示剂）3 实验步骤3.1 0.05mol・L-iEDTA溶液的配制：准确称取乙二胺四乙酸二钠18.612g,溶解于500-600mL水中，稀释至1L,如混 浊，应过滤，转移至1000mL细口瓶中，摇匀3.2以CaCO3为基准物标定EDTA溶液3.2.1 0.05mol・L-1钙标准溶液的配制：置CaCO3基准物于称量瓶中，在110 C干燥2小时，冷却后，准确称取1.25-1.30g碳酸钙于150mL烧杯中，盖上表面皿，加水润湿，再从杯嘴边逐滴加入数毫升HCl 溶液（1+1）淋洗入杯中，直至CaCO3完全反应，待冷却后转移至250mL容量瓶中，洗净表面皿物质至容量瓶，稀释至刻度，摇匀。

计算准确浓度 C03.2.2用钙标准溶液标定EDTA溶液：用移液管移取25.00mL标准钙溶液于250mL锥形瓶中，加入约25 mL水，2mL镁 溶液，5mL20%NaOH溶液,2mLHC 1溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂， 摇匀后，用EDTA溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点测定三次，取平均 值3.3用EDTA溶液滴定乳酸钙：取发酵液2ml,滴到盛有50mL蒸馏水的250mL锥形瓶中，加2mL镁溶液， 5mL20%NaOH溶液,2mLHC1溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂，摇匀后， 用 EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点测定平行样，取平均值4 计算C1=C0*25/V1q ——EDTA标准溶液浓度（mol/L）C——CaCO基准溶液浓度（mol/L） 03V1 ——25mLCaCO3基准液消耗EDTA溶液体积（mL）W1=C1*（V2/1000）*218.2/（2/1000）=C1*V2*308.3/2W]——乳酸钙（CH3CHOHCOO2Ca^5H2O）含量（g/L）C ——EDTA标准溶液浓度（mol/L）1V ——发酵液消耗EDTA溶液体积（mL）2 308.3——乳酸钙（（CH3CHOHCOO） 2Ca・5H2O）摩尔质量（g/mol）W2=2*C1*(V2/1000)*90/(2/1000)=2*C1*V2*90/2=90*C1*V2W——乳酸含量（g/L）q ——EDTA标准溶液浓度（mol/L）V2 ——发酵液消耗EDTA溶液体积（mL）90 ——乳酸（CH3CHOHCOOH）摩尔质量（g/mol）*一分子乳酸钙由两分子乳酸和一分子Ca2+结合而成。