(完整版)电泳缓冲液TAE,TBE的区别.docx

电泳缓冲液 TAE,TBE缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的 pH 电泳时正极与负极都会发生电解反应， 正极发生的是氧化反应（ 4OH--4e->2H2O+O2) ，负极发生的是还原反应（ 4H++4e->2H2) ，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，是溶液两极的pH 保持基本不变电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于 DNA 分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有 0.01-0.04mol/L 的 Na+ 离子， Na+ 离子的浓度太低时电泳速度变慢；太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化电泳缓冲液还有一个组分是 EDTA ，加入浓度为 1-2mmol/L ，目的是螯合 Mg2+ 等离子，防止电泳时激活 DNA 酶，此外还可防止 Mg2+ 离子与核酸生成沉淀TAE 是使用最广泛的缓冲系统其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量（ TBE 中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量） ，且双链线状 DNA 在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约 10% ，电泳大于 13kb 的片段时用 TAE 缓冲液将取得更好的分离效果， 此外，回收 DNA 片段时也易用 TAE 缓冲系统进行电泳。

TAE 的缺点是缓冲容量小， 长时间电泳 （如过夜）不可选用，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换TBE 的特点是缓冲能力强，长时间电泳时可选用 TBE ，并且当用于电泳小于 1kb 的片段时分离效果更好 TBE 用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用， 并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使 DNA 片段的回收率降低，所以不宜在回收电泳中使用TPE 的缓冲能力也较强，但由于磷酸盐易在乙醇沉淀过程中析出，所以也不宜在回收 DNA片段的电泳中使用50 ×Tris- 乙酸（ TAE ）缓冲液终浓度配制1L 溶液成分各成分的用量2mol/LTris 碱242g1mol/L冰乙酸57.1 mlEDTA（pH ＝8.0 ）18.622g（200ml的 0.5 mol/LEDTA （pH8.0 ））水 补足 1L。