愈伤组织的培养.ppt

组织培养成苗组织培养成苗 指把外植体放在培养室（有光照、温度条件）里，成再生植株的过程外植体：1、带芽外植体 2、由分化组织构成的外植体 1.1.初代培养初代培养◆◆2.2.继代培养继代培养◆◆3.3.生根培养生根培养◆◆培培养养步步骤骤培养步骤第一种类型：芽再生型微型扦插增值法；丛生芽增值顶芽顶芽腋芽腋芽丛生芽的发育1 桑树茎尖萌发桑树茎尖萌发 杨树顶芽萌发成丛生芽杨树顶芽萌发成丛生芽 月季茎段侧芽萌发（引自谭文澄、戴策刚，1991）丛生芽微繁示意图（引自刘进平，2005）解除顶端优势的抑制作用接种培养：接种培养：MS+BA0.25+NAA0.25MS+BA0.25+NAA0.25　　　　　　　　　　White+IAA0.1White+IAA0.12222～～25℃25℃，，1616～～18h,3000lx18h,3000lx2 2～～3 3个月分化出芽丛个月分化出芽丛草莓脱毒苗组培草莓脱毒苗组培微茎尖培养微茎尖培养（（1 1）初代培养）初代培养芽丛芽丛芽丛小块芽丛小块继代培养基（继代培养基（MS+BA0.5+NAA0.3)MS+BA0.5+NAA0.3)芽长芽长1-2㎝㎝单株单株2 2继继代代培培养养 3.3.生根培养生根培养1/2MS+NAA11/2MS+NAA1（（IBA1IBA1）） 第二种类型：器官发生型不定芽的发育不定芽的发育不不定定芽芽的的发发育育外植体：叶片、子房、花药、胚珠、叶柄外植体：叶片、子房、花药、胚珠、叶柄再分化再分化1、如何脱分化？、如何脱分化？2、再分化的类型？、再分化的类型？叶再生植株发生叶再生植株发生1、制备外植体：、制备外植体： 幼嫩叶片幼嫩叶片---水洗水洗---消毒消毒--- 无菌水洗。

无菌水洗叶片的切割方式 极性：叶片极性：叶片腹面向上腹面向上放置利于芽的分化放置利于芽的分化2、影响培养因素：、影响培养因素：1））6-BA和和KT利于利于芽芽的形成；的形成；2,4-D利于利于愈伤组织愈伤组织形成2）损伤：常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽损伤：常从叶柄、叶脉的切口处形成愈伤组织和芽1 1、离体叶、离体叶 愈伤组织愈伤组织 不定芽不定芽2 2、离体叶芽、离体叶芽 愈伤组织愈伤组织 胚状体胚状体 不定芽不定芽3 3、离体叶、离体叶 小鳞茎或球状体小鳞茎或球状体 愈伤组织愈伤组织 百合鳞叶培养百合鳞叶培养驱蚊草叶片驱蚊草叶片培养培养番茄子叶培养番茄子叶培养烟草叶片培养烟草叶片培养石龙芮下胚轴培养石龙芮下胚轴培养产生胚状体过程产生胚状体过程第三种类型：胚状体发生型胚状体发生型体体细细胞胞胚胚状状体体的的发发育育1　　外外 植植 体体愈伤组织愈伤组织小孢子小孢子游离单细胞游离单细胞器　官器　官　胚胚 状状 体体　试试 管管 苗苗继代培养初代培养种子种子第四种类型：原球茎型原球茎型 缩短的、呈珠粒状的、由胚性细胞组成的、类似嫩茎的器官。

原原球球茎茎的的发发育育茎尖茎尖腋芽腋芽•生根培养将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程•月季组织培养•诱导MS+BA0.5•增值 MS+BA1+NAA0.2•生根 1/2MS+NAA0.5。