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有关水飞蓟提取物的含量测定=“news_bd”> 　　水飞蓟中黄酮类物质是自菊科植物水飞蓟种子中提取的药用有效成分，是一类以二氢黄酮醇与苯丙素类衍生物缩合而成的具有C-9 取代基的黄酮木质素类化合物其中主要成分有水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁、水飞蓟亭四种同分异构体其中水飞蓟宾含量最高，保肝活性最强，是水飞蓟中黄酮类物质含量测定的标准物质本文采用Diamonsi(TM) C18(4.6mm×250mm， 5μm)色谱柱，以甲醇：水：冰醋酸=42： 58：0.5 为流动相;在288nm 检测波长下，采用HPLC 测定水飞蓟提取物中主要成分水飞蓟宾的含量，取得了较理想效果 　　1 实验仪器与材料 　　PL203 电子天平(上海江仪仪器有限公司);KQ-100E 型超声波处理器(济南华舜仪器有限公司);Waters 2695 高效液相色谱仪(美国沃特世waters 有限公司);水飞蓟宾对照品(中国生物药品检验所);水飞蓟黄酮类物质提取物(东宁县龙翔中药饮片有限公司);其他试剂均为色谱纯 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　本实验采用Diamonsi(TM) C18(4.6mm×250mm， 5μm)色谱柱;流动相为甲醇：水：冰醋酸=42： 58： 0.5;检测波长为288nm;每次进样量20μL;流速： 0.8mL/min;理论板数按水飞蓟宾峰计算应不低于4000。

取对照品溶液及供试品溶液在该色谱条件下分别各进样20?L，记录色谱由图可知，水飞蓟宾与其它组分分离良好 　　2.2.1 对照品溶液的制备 　　精密称取水飞蓟宾对照品50mg(精确至0.01mg)，置于500mL容量瓶中，加甲醇制成每1mL 含500μg 的溶液，即得 　　2.2.2 供试品溶液的制备 　　精确称取水飞蓟黄酮类物质提取物50mg (精确至0.01mg)，置50mL 容量瓶中，用甲醇溶解，超声处理30min冷却后，加甲醇稀释至刻度，摇匀并滤过精确量取5mL，置50mL 容量瓶中，加入流动相稀释至刻度，摇匀备用 　　2.3 线性关系考察 　　精确量取水飞蓟宾对照品溶液1.0， 2.0，4.0，8.0， 10.0， 12.0， 14.0， 16.0mL，分别置50mL 容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀各精密量取20μL，分别注入高效液相色谱仪，以水飞蓟宾峰面积为纵坐标，以水飞蓟宾浓度(mg/mL)为横坐标进行线性回归处理结果说明，水飞蓟宾在2.12~64.36μg 范围内与其峰面积呈良好线性关系回归方程是y=41676X+178737，R2=0.9984 　　2.4 精密度试验 　　取水飞蓟宾浓度约为20μg/mL 的对照品溶液，重复进样6 次，测定峰面积，RSD=0.84%，结果说明该法精密度良好。

　　2.5 重现性试验 　　取样品，按供试品溶液制备方法制成6 份，照水飞蓟宾方法测定含量，RSD=1.33%，结果说明该法重现性良好 　　2.6 稳定性试验 　　取浓度约为50μg/mL 的水飞蓟宾对照品液适量，每隔2h 进行测定一次，共进行6 次，测定峰面积，RSD=0.21%，结果说明本品12小时内稳定性良好 　　2.7 加样回收率试验 　　精密称取已知含量的样品(水飞蓟提取物：含水飞蓟宾34.16%，批号为131026)适量(约相当于水飞蓟宾2.5mg)共6 份，精密加入对照品水飞蓟宾2.5mg，置250mL 量瓶中，按供试品溶液的制备方法制备，按上述色谱条件测定计算水飞蓟黄酮类提取物中水飞蓟宾的含量及回收率平均回收率为101.0%，RSD=1.5%，结果表明该法具有良好回收率 　　3 结束 　　语该实验中通过线性关系考察制定回归方程，得出水飞蓟中水飞蓟宾含量测定的计算方法，并进行了精密度、稳定性、重现性和加样回收率试验精密度试验中6 次重复测定按对照品溶液峰面积计算RSD=0.15%，结果说明，精密度良好;6 次稳定性试验按对照品溶液峰面积计算，RSD=0.15%，结果说明， 12 小时内稳定性良好;6 次重现性试验，RSD=1.33%，结果说明，重现性良好。

最终结果表明该方法简便，准确、重现性好，可用于水飞蓟提取物中水飞蓟宾的含量测定方法。