《黄酮类化合物》课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,,单击此处编辑母版文本样式,,第二级,,第三级,,第四级,,第五级,,,*,第九章 黄酮类化合物,（flavonoids）,,前言,黄酮类化合物是广泛分布在自然界的一大类化合物，,多数具有颜色,，在植物体内一部分与糖结合成苷类化合物（存在于植物的花、叶、果实等组织），一部分游离存在（存在于木质部,坚硬组织),对植物的生长发育、开花结果以及抵御异物侵入等方面起着重要作用学习内容,,（一）,黄酮类化合物基本结构与分类,(掌握),,（二）,黄酮类化合物的理化性质,(掌握),,（三）,黄酮类化合物的提取分离,(掌握),,（四）,黄酮类化合物的鉴定与结构测定,（熟悉）,,（五）,黄酮类化合物的生理活性,（了解）,,1、基本结构,基本母核为2-苯基色原酮类化合物三个环,,编号,,取代基：OH、OCH,3,、OCH,2,O等取代位置,A,C,B,1,2,4,5,8,1’,6’,,2、分类,黄酮（醇）类,,二氢黄酮（醇）类,,异黄酮类、二氢异黄酮类,,查耳酮类,,花色素类、黄烷类,,橙酮（噢哢）类双黄酮类,区分要点,：双键、B环连接位置、C环的完整性与环上的取代等分类,,黄酮（醇）类,,结构特点：完全的母核结构。

黄酮醇与黄酮的区别：,3-OH,的,有无木犀草素,槲皮素,分类,,二氢黄酮（醇）类,,结构特点：,C,2,-C,3,之间无双键,二氢黄酮醇与二氢黄酮的区别：,3-OH,的,有无甘草苷,杜鹃素,分类,,异黄酮类、二氢异黄酮类,,结构特点：,B环连接在C,3,位,异黄酮和二氢异黄酮的区别：C,2,-C,3,之间,双键,的有无大豆素,紫檀素,分类,,查耳酮类,,结构特点：,C环开环,注意编号不同1’,2’,4’,1,3,5,α,β,红花苷,分类,,花青素类：C环为苯环结构，,1位氧带正电荷,儿茶素,飞燕草素,黄烷类,C,4,无羰基，,C,2,-C,3,无双键,分类,,橙酮（噢哢）类：,C环为五元环硫磺菊素,双黄酮类：两分子黄酮组成银杏素,分类,,理化性质,,一、,性状,,1、存在状态 2、旋光性 3、颜色,,二、,溶解性,（熟悉）,,1、苷元 2、苷,,三、,酸碱性,（掌握）,,四、,显色反应,（重点掌握）,,一、性状,,1、苷元为结晶性固体，苷类为无定性粉末2、苷元,除二氢黄酮（醇）类、黄烷（醇）有旋光性外,，其它,无旋光性,；苷类化合物多为左旋性3、颜色：具明显显色，多数,黄色或橙色,，,,与交叉共轭体系有关,。

理化性质,,二、溶解性,,1、,苷元一般难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂,2、,平面型结构的水溶性小于非平面型结构,3、,OH越多，水溶性越强,4、,苷类化合物的糖数越多，水溶性越强,5、3-O-glc苷的水溶性> 7-O-glc苷理化性质,,三、酸碱性,,1、,酸性,：,7，4’-二-OH> 7或4’-OH>一般酚羟基>5-OH,原因？）,,2、,碱性,：,1-O原子有碱性,理化性质,浓HCl,Cl,-,..,,四、显色反应,,(一)、,还原反应,,(二)、,金属盐类试剂的络合反应,,(三)、,硼酸显色反应,（了解),,(四),、,碱性试剂显色反应,（熟悉）,理化性质,显色反应,,(一）,、还原反应,HCl—Mg粉（Zn)反应,,1、,操作,：样品溶于甲醇或乙醇中，加入少许镁粉（锌粉）振摇，滴加浓HCl几滴，观察颜色（必要时可加热）2、,结果,：,黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）--橙红色~紫红色,查尔酮、橙酮不显色3、,干扰组分的排除,：花青素、部分查尔酮理化性质,显色反应,,（一）、还原反应,,NaBH,4,反应,（专属性较高的还原剂）,,1、,操作,：样品溶于乙醇中，加入2% NaBH,4,乙醇液，稍后加入浓HCl或浓H,2,SO,4,数滴，观察颜色。

2、,结果,：,二氢黄酮类呈紫色或紫红色,理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,锆盐—枸橼酸显色反应,（ZrOCl,2,),,1、,操作,：样品甲醇溶液加入2%ZrOCl,2,的甲醇溶液，观察颜色；然后再加入2%的,枸橼酸，再观察颜色,2、,结果,：黄酮类化合物分子中有,游离的3或5-OH,时生成黄色络合物，但,5-OH黄酮的络合物遇枸橼酸后颜色会褪去,3、,应用,：,鉴别3-OH或5-OH黄酮,理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,醋酸镁,（MgAc,2,),反应,,1、,操作,：在滤纸上滴加样品液，喷以醋酸镁的甲醇液，加热干燥，观察结果2、,结果,：,二氢黄酮（醇）类显蓝色荧光,黄酮（醇）和异黄酮显黄色~橙色~褐色理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,AlCl,3,显色反应,,1、,操作,：样品的乙醇液滴于滤纸上喷1%的AlCl,3,乙醇液显色，在紫外灯下观察荧光颜色2、,结果,：除4’-OH黄酮醇或7、4’-二OH黄酮醇显天蓝色荧光外，其它显黄色荧光3、,应用,：定性定量分析理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,铅盐反应：,,1、,醋酸,铅只能与分子中具有邻二酚羟基或,兼有3-OH或5-OH结构的化合物作用,。

2、碱式醋酸铅的沉淀范围广3、生成黄色~红色沉淀理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,氯化锶,（SrCl,2,)反应,,1、,操作,：样品甲醇液中加入3滴0.01mol/L的SrCl,2,甲醇液，再加入氨气饱和的甲醇溶液后观察有无沉淀出现2、,结果,：具有,邻二酚羟基,的黄酮类化合物生成,绿色~棕色乃至黑色沉淀,理化性质,显色反应,,（二）、金属盐类试剂的络合反应,FeCl,3,反应：,,多数黄酮化合物分子结构中有酚羟基，遇,FeCl,3,可产生正反应，但一般,含有H键缔合的酚羟基才呈现显著的颜色,理化性质,显色反应,,（三）硼酸显色反应,,5-OH黄酮或2’-OH查尔酮为正反应,在草酸存在下显黄色并带有绿色荧光；但在枸橼酸丙酮存在下只显黄色而无荧光理化性质,显色反应,,（四）、碱性试剂显色反应,,碱性试剂：氨气、,Na,2,CO,3,等1、,OH,-,H,+,无色,橙黄色,理化性质,显色反应,,（四）、碱性试剂显色反应,,2、黄酮醇在碱性条件下先呈黄色，通入空气后变为棕色3、黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基取代或3、4’-二羟基取代时在碱液中不安定，由黄色变成深红色乃至绿棕色。

理化性质,显色反应,,黄酮类化合物的提取,,原则：,,1、苷和极性较大的苷元一般用极性较大的溶剂提取，如甲醇-水（1：1）或甲醇；一些多糖苷可以用沸水提取2、苷元一般用极性较小的溶剂提取，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等3、,提取苷时注意破酶,提取与分离,,黄酮类化合物的提取,,方案1：,溶剂提取法,提取与分离,药材粗品,醇提浸膏,EtOH提取、浓缩,乙醚液,Et,2,O提取,不溶物,BuOH液,不溶物,n-BuOH提取,？,？,？,,黄酮类化合物的提取,,方案2：,碱溶酸沉淀法,,1、原理：黄酮类化合物多数有酚羟基，显酸性，可溶于碱水中，再加酸后又可沉淀析出2、常用碱：石灰水、Na,2,CO,3,、稀NaOH、碱性稀醇等提取与分离,,黄酮类化合物的分离方法,,一、柱色谱,,1、硅胶色谱法：,,主要用于分离非平面型黄酮及高度甲基化的黄酮（醇）的分离2、,聚酰胺柱层析法,：,,3、,GFC法,,二、,pH梯度萃取法,提取与分离,,聚酰胺柱层析法,Rf的比较,,1、,,,,,2、,提取与分离,小 大,大 小,,Rf的比较,3、,,,,,4、,提取与分离,小 大,大 小,,Rf的比较,5、用含水流动相洗脱时：三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元,,用有机溶剂洗脱时：苷元>苷,提取与分离,,GFC法,分离苷元时主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越小。

分离苷时主要是分子筛作用，分子越大，Rf越大,提取与分离,,pH梯度萃取法,提取与分离,黄酮类化合物,5%Na,2,CO,3,5%NaHCO,3,4%NaOH,0.2%NaOH,溶于有机溶剂中,有机液,有机层,碱水层？,碱水层？,有机层,碱水层？,有机层,碱水层？,有机层,,提取分离实例：芸香苷的提取,提取与分离,1、芸香苷的结构式,2、提取思路,3、方案确定,,A、溶剂法,,B、碱水提取法,溶解性：水溶性强,,酸碱性：有酸性,,溶剂法,槐米粗粉,沸水,煎煮30分钟,，两次趁热,滤过,药渣,水提液,放冷，,过滤,滤液,沉淀,重结晶，,过滤,芸香苷,注意？,方法？,方法？,注意？,提取与分离,,碱水提取法,槐米粗粉,6倍量,硼砂,水液，,石灰乳调PH8~9,，煎煮2次药渣,水提液,HCl调PH3~4,，搅拌，析晶，过滤滤液,沉淀,重结晶，过滤芸香苷,目的？,目的？PH可否调到1~2,提取与分离,,提取分离实例：黄芩苷的提取,提取与分离,1、黄芩苷的结构式：,2、提取思路,3、方案确定：碱水提取法,4、流程图书写,,鉴定,,PC:,,可采用,双向展开法,：第一向展开采用某种醇性溶剂，第二向展开用水或极性较大的溶剂展开。

TLC：,,1、硅胶TLC,,2、聚酰胺TLC,鉴定与结构测定,,结构测定—紫外光谱的应用,,一般程序：,,1、测定样品甲醇中的UV光谱；,,2、测定加入诊断试剂后的UV光谱；,,3、如样品为苷类化合物，则先进行水解再测定光谱鉴定与结构测定,,黄酮类化合物在甲醇液中的UV光谱特征,苯甲酰系统,,产生峰带Ⅱ,,（,220~280nm）,桂皮酰系统,,产生峰带,Ⅰ,,（300~400nm）,A,B,,黄酮（醇）的UV特征,峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~280nm峰Ⅰ受A环、B环影响，氧化程度越高，吸收带越长移峰Ⅱ主要受A环影响，B环可影响其峰形200,300,400(nm),示意图,,查尔酮的UV特征,峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270nm峰Ⅰ有时开裂,为Ⅰ,a,（340~390nm）、 Ⅰ,b,（300~320nm）峰Ⅰ受整个母核氧化的影响，尤其2’-OH影响最大200,400(nm),示意图,,异黄酮、二氢黄酮（醇）的UV特征,峰Ⅱ为主峰，峰Ⅰ常成为其肩峰,异黄酮峰Ⅱ245~270nm；,,二氢黄酮峰Ⅱ270~295nm200,300（nm),示意图,,加入诊断试剂后引起的吸收峰位移在结构鉴定中的应用,1、,甲醇钠,,A、有,3-OH,，无,4’-OH,时，带Ⅰ红移50~60nm，强度降低。

B、无3-OH，有4’-OH时，带Ⅰ红移40~60nm，强度不降低C、3-OH、4’-OH同时存在时，带Ⅰ随处理时间的延长而衰退2、,醋酸钠,用于7-OH的鉴别,有7-OH时带Ⅱ红移5~20nm，若同时有6、8-氧代，则位移幅度减小醋酸钠熔融后若带Ⅰ红移40~60nm，强度不降，说明有4’-OH5、6、7-三OH；5、7、8-三OH；,,3、3’、4’-三OH存在时吸收峰衰减3、醋酸钠/硼酸,用于鉴别邻二酚羟基B环,有邻二酚羟基带,Ⅰ红移12~30nm，,,A环有,邻二酚羟基带,Ⅱ红移5~10nm4、,AlCl,3,/AlCl,3,+HCl,用于,鉴别3-OH、5-OH、,邻二酚羟基的存在,1),样品+AlCl,3,/HCl光谱=样品+CH,3,OH,,表明无3-OH或5-OH，或3-OH、5-OH被取代,,（2）,样品+AlCl,3,/HCl光谱≠样品+CH,3,OH,,带Ⅰ红移35~55nm，有5-OH，无3-OH；,,带Ⅰ红移60nm，有3-OH，无5-OH；,,带Ⅰ红移50~60nm，同时有3-OH和5-OH3）,样品+AlCl,3,/HCl光谱=样品+ AlCl,3,,表明A、B环均无邻二酚羟基。

4）,样品+AlCl,3,/HCl光谱≠样品+ AlCl,3,,带Ⅰ,蓝移,30~40nm，B环有邻二酚羟基；,,带Ⅰ蓝移20nm，B环有邻三酚羟基；,,带Ⅰ蓝移50~65nm，A、B环均有邻二酚羟基结构测定,—,1,H-HMR的,应用,一、,A环质子信号比B环质子信号在高场，即,A环质子的化学位移值