【最新】盐酸小檗碱的提取0.0.doc

盐酸小檗碱的提取、精制及检识小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比 较广泛的、 有明 显生理活性的化学成分主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中小檗碱具有 显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠 胃炎、呼吸道感染等症黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch.），三角叶黄连（C.deltoidea C.Y. Cheng et Hsiao）或云连（C .teetoides C.Y.Cheng）的根茎， 含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3) 、甲基黄 连碱(4) 、药根碱(5) 等生物碱，其中以小檗碱含量最高 ，可达10%左右，小檗碱以 盐酸盐的形式存在于黄连中目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料三颗针来源于小 檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱 N+OH£­R1OOR432R5 R1 R2 R3 R4 R5 CH3 CH3 HCH3 C3 3 3 H C3 H CH3 CH3 H3 212345 22 CH22小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱， 自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水， 在100℃ 干燥 时即失去结晶水 ，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。

Mp.145℃至160℃即分解 NH3 OCH33OHO NHH3COC3СéÞ°·小檗碱有三种互变异构体：其中以季铵碱式结构状态最稳定，可以离子化呈强碱性， 用 过量的氢氧化钾处理小檗碱盐类时，可转变为醇式叔胺碱和醛式仲铵碱， 季 铵碱式小檗碱可离子化 ，故有一定亲水性，因此，游离小檗碱能缓缓溶于水， 在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙 醇中溶解度为1：100 ，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂 醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性， 难 溶于水， 易溶于有机溶剂 小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸 盐外， 一般在水中的溶解度均 较小小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：名称 水 乙醇小檗碱 1：20 1:100盐酸小檗碱(B.Cl) 1:500 几乎不溶酸性硫酸小檗碱(B.HSO 4) 1:100 微溶中性硫酸小檗碱(B 2.SO4) 1:30 可溶中性磷酸小檗碱(B 3.PO4) 1:15 可溶小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小 檗碱， 就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱一、实验目的1. 掌握从黄连中提取、精制盐 酸小檗碱的方法；2. 学习小檗碱的化学性质与检识方法。

二、实验原理利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性 质， 先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度 ，制得盐酸小檗碱三、实验内容（一）盐酸小檗碱的提取称取黄连粗粉 100g，加 0.2%硫酸热浸三次， 温度控制在 65℃~70℃，第一次加 0.5%硫酸 300ml时，热浸一小时，第二、三次分别加 0.2%硫酸 200ml，热浸半小 时， 趁热过滤，合并三次提取液，加入浓盐酸调至 pH 2~3，再加 入提取液量 8%(W/V)的固体氯化钠，搅拌使之充分溶解；冷却即析出大量黄色沉淀，放置过夜， 常压过滤，即得盐酸小檗碱粗品，于 80℃以下干燥， 称重二）盐酸小檗碱的精制取盐酸小檗碱粗品加于20倍量的沸水中，加热数分钟， 搅伴使其溶解 然后加入石灰乳调至 pH8～9，趁热过滤，滤液于 65℃左右加浓盐酸调至 pH2，放置冷却 ，即析出大量黄色沉淀，过滤，沉淀用蒸馏水洗至 pH2，抽干，于 80℃以下干燥， 即得精制盐酸小檗碱，称重，计算产率三）盐酸小檗碱的检识1. 取自制精制盐酸小檗碱 50mg，加水 5ml，缓缓加热溶解后，加 5%氢氧化钠溶液 2滴显橙红色，放冷，加丙酮 4滴，即发生浑浊， 放置后， 生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱，然后取上清液，加丙酮 1滴，如仍发生浑浊，再加适量丙酮使沉淀完全 ；过滤， 取滤液 2ml，加 10%稀硝酸 1ml，摇匀，再加 0.1m1/L硝酸银试液 2滴，即有白色沉淀产生。

2. 取自制精制盐酸小檗碱约 2mg，置白瓷蒸发皿中，加 浓硫酸 lml溶解，加 5%没食子酸乙醇溶液 5滴，置水浴上加热，即显翠绿色3. 取自制精制盐酸小檗碱约 5mg，加水 1m1使溶解后，加锌粉少许，再分数次加入浓硫酸数滴，每隔 10分钟加一次，观察其黄色是否消退5. 盐酸小檗碱的薄层层析（氧化铝薄层层析法）吸附剂：中性氧化铝（Ⅱ级，过 160目筛）， 干法铺板（软板）样　 品：① 自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液②盐酸小 檗碱 标准品乙醇溶液展开剂：① 氯仿 －乙醇(9:1)②甲醇－ 丙酮 －乙酸 (4:5:1)显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视， 再喷雾改良碘化铋钾试剂，观察斑点颜色， 并与标准品对照四、实验注意事项1、用硫酸浸泡时，硫酸的浓度以 0.2％为宜，此时生成的硫酸小檗碱在水中溶解度较大，若加入过量，小檗碱就形成酸式硫酸盐，水中溶解度就降低 (1：100)，影响小檗碱的提取量2、在 pH～8.5 时小檗胺沉淀较完全，但不易凝聚，故 80℃保温，使凝聚而沉降4、小檗碱精制时调 pH 至 2，是 为了使小檗胺等叔胺型生物碱留在溶液中除去，以便得到较纯的小檗碱，操作时若溶液己冷却析出 结晶，就 应加热成澄明溶液再用 盐酸调 pH2。

五、现象及结果六、思考与作业（1）季铵型生物碱提取常用的溶剂有哪些？分离方法有哪些？（2）生物碱沉淀反应条件如何？如何能够得到正确的结论？（3）生物碱薄层色谱鉴别中采用硅胶作吸附剂时，如何避免拖尾现象？。