大孔树脂分离丹参酚酸B筛选探究.doc
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大孔树脂分离丹参酚酸B筛选探究【关键词】丹酚酸B；,,高效液相色谱法；，，大孔树脂 论文代写摘要：目的筛选分离丹酚酸B的最佳大孔树脂方 法以高效液相色谱(HPLC)测得丹酚酸B含量为指标，对 10种不同型号的树脂分别进行吸附与解吸性能考察结果大 孔树脂的吸附与解吸性能有较大差异，HPD450, D101, X5, HPD800, D4020, HPD700对丹酚酸B均有较强的吸附与可洗 脱性，D101为最佳吸附树脂结论大孔树脂分离丹酚酸B 方法是可行的关键词：丹酚酸B；高效液相色谱法；大孔树脂丹酚酸(salvianolic acids )是中药丹参Salvia miliiorrhiza Bge.中的主要活性成分，具有抗动脉粥样硬 化、保护心肌细胞、防心脑缺血损伤、抗血小板凝聚、抗肝 纤维化、改善记忆、抗肿瘤等作用［1, 2］丹参药材中水 溶性成分提取，多以丹参素或原儿茶醛为指标［3, 4］,但 两者在药材中的含量均较低，只有丹酚酸B为丹酚酸中最主 要的有效成分［5］目前对丹酚酸分离多采用醋酸乙酯萃 取法，但该种方法溶剂消耗大，并存在溶剂残留大孔树脂 吸附是目前用于许多有效成分分离的良好方法，成本低、效 率高，但至今尚无筛选大孔树脂分离丹酚酸B的报道。
本人 就大孔树脂对丹参酚酸B的吸附与解吸性能进行综合考察， 以期找到一种分离丹参酚酸B的最佳大孔树脂1材料与仪器1. 1材料与试药丹参药材，湖北产，601减压干燥后，粉碎过40目 筛大孔树脂:HPD450 （弱极性）、HPD600 （极性）、HPD700 （非极性）、HPD800 （中极性）（河北沧州宝恩化工有限公司）、 D101 （非极性）（天津海光化工有限公司）、D4020 （非极性）、 AB8 （弱极性）、X5 （非极性）、S-8 （极性）、NKA9 （极性）（南 开大学化工厂）乙睛为色谱纯；甲醇、甲酸为分析醇； 丹酚酸B对照品（中国 药检所，批号20031108）o1. 2 仪器 分离色谱柱（20 mmX500 mm）； Agilent 1100 高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱Kromasil C18（250 mmX4. 6 mm） /5 u m02方法2. 1丹参提取液的制备丹参药材粉，加10倍量70% 乙醇50C浸提1 h,过滤后滤渣再加8倍量70%乙醇50C浸 提30 min,合并滤液，减压浓缩至原体积的1/3,用10%HCl 调pH至3.0,静置，离心去沉淀(4 000 r・；minl)o 保留上清液，并测定其中的丹酚酸B含量。
毕业论文2.2大孔树脂吸附各种大孔树脂经乙醇、5%盐酸和 5%氢氧化钠顺序浸泡3〜5 h后，以水洗至pH中性量取丹 参提取液100 ml各10份，分别加入HPD450,HPD600,HPD700, HPD800, D101, D4020, AB8, X5, S8, NKA9 树脂 10 g,静 态吸附24h过滤，滤液测定丹酚酸B含量，计算 吸附率 论文代写2.3树脂解吸吸附后的树脂,分别用水、30%, 50%, 70%乙醇各100 ml淋洗，收集淋洗液，测定丹酚酸B含量， 计算各溶液解吸率解吸率为解吸量占吸附量的百分率2.4丹酚酸B的含量测定采用高效液相色谱法流动相：乙睛：甲醇：水：甲 酸(20 ： 55 ： 24 ： 1),柱温30C,进样量10 nl,流速1 ml・；minl,运行时间20 min,检测波长276 nmo丹 酚酸B的保留时间为15.3 min,分离度大于2. 0,理论塔 板数不低于5 000o.4. 1标准曲线制备精密称定丹酚酸B对照品23 mg,水溶解并定容50 ml 分别吸取对照液 0, 0. 31, 0. 62, 1.25, 2. 5, 5, 10ml,加 水定容至 10 ml,分别得到 0, 0.014 4, 0. 028 8, 0. 057 5, 0. 115, 0.230, 0. 460 mg・；mll 对照液梯度，进样高 效液相色谱仪。
以峰面积X为横坐标，浓度Y为纵坐标，绘 制标准曲线Y二0.000 106X+0. 005 464, "0.999 9表明 丹酚酸B在0~0・460 mg&# 12539；mil范围内具有良好的线性 关系2. 4.2样品测定吸取样液2 ml,加水溶解并定容至100 mlo过滤，滤液过0・45 y m微孔滤膜，进样高效液相色谱仪，按标准曲线制作 方法 测定峰面积,计算样液的丹酚酸B含量3结果3. 1各种树脂对丹酚酸B的吸附性能比较经测定， 丹参提取液的丹酚酸浓度为24. 056 mg・；mll,各种 树脂对其均有吸附，吸附率均在70%以上在所试树脂中， 除AB8和NKA9外，其它均表现良好的吸附性，吸附率大于 90%o结果见表lo吸附能力排序为:D101>； S-8>；HPD700>； HPD450>； HPD800>； X5>； D4020>；HPD600>； AB8>； NKA9O表1不同树脂对丹酚酸B的吸 附与解吸率（略）3.2各种树脂的解吸性能S8和NKA9树脂在低醇洗脱液下即解吸大部分，而其它树脂较少解吸，只有提高乙醇浓 度50%以上才有较多的解吸。
总解吸率排序为：HPD450>； D101>； X5>；HPD800>；D4020>； HPD700>；HPD600>； AB8>； NKA-9 >；S8o 各种树脂对于解吸所 需醇浓度有较大差异，如D101和HPD450在50%以上才有较 大解吸，而D4020在50%醇浓度以下即有较大解吸综合解 吸与吸附能力，除HPD600, AB8, NKA9, S8外，其它均可 作为丹酚酸B的分离用树脂，D101为最佳吸附与解吸树脂 毕业论文4讨论4. 1大孔树脂法作为分离丹酚酸B的方法是方便可行 的，通过吸附可将提取液中的酚酸B富集，通过不同浓度醇 洗脱，可得到不同纯度的丹酚酸B产品由于树脂可再生， 因而可反复使用，故而是分离丹酚酸B的良好方法4.2本实验对丹酚酸B的吸附和解吸进行了静态考 察，通过吸附解吸，筛选出适合的树脂但为了结合生产, 采用大孔树脂柱，提取液的吸附和解吸处在流动状态下，其 参数有所变化，因此下步实验中需进一步考察大孔树脂对丹 酚酸B的动态吸附状况论文代写参考文献：论文代写[1] 林佳，徐丽珍，李琰，等.不同产地丹参中 丹参酮IIA的含量比较[J].中国中药学杂志，2002, 27(2):153.[2] 吴世蓉.不同产地丹参其主要化学成分的分离 与测定[J] •基层中药杂志，2002, 16(3):24.毕业论文[3] 黄诒林，张均田.丹参中三种水溶性成分的体外抗氧化作用[J].药学学报，1992, 27(2)： 96.毕业论文[4] 王文祥，周巧霞，蒋木岗，等.比色法测定丹 参及提取物水溶性总酚的改进[J] •中草药，2001, 32(8): 711.[5] 张启伟，张颖，李计萍，等.高效液相色 谱法测定丹参中丹酚酸B[J1中国中药杂志，2001,26(12)： 848.毕业论文。
