实验四 减数分裂制片技术及显微观察.doc

实验US减数分裂制片技术及显微观察一、实验目的学习植物花粉母细胞制片技术，观察减数分裂过程中不同时期的 染色体形态，了解性细胞形成过程中染色体的动态变化，明确遗传的 细胞学基础二、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊 有丝分裂，它包括连续两次的细胞分裂，第一次分裂是减数的，第二 次是等数的第一次分裂的前期较长，染色体变化较复杂，可细分为5个时期，即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期在减数分裂的整个过程中，同源染色体之间要发生联会、交换和分离，非同源 染色体之间要发生自由组合通过染色体规律性变化，最终产生的四 个子细胞内染色体数目只有母细胞的一半，以后每一个子细胞进一步 发育为雌配子和雄配子雌雄配子通过受精作用又结合成为合子，发 育成为新的个体，染色体数目恢复为全数（2n）o染色体是遗传物质 的载体，因此染色体在减数分裂的行为对遗传物质的分配和重组产生 重大影响形成不同染色体组合的雌雄配子，经受精后，产生大量的 遗传变异个体有利于生物的适应和进化，为人工选择提供丰富的材 料由于植物花药取材容易，操作方便，一般作为减数分裂制片材料,在发育的适宜时期取样、固定、压片等程序，便可在显微镜下观察到 减数分裂时染色体的行为变化。

三、实验材料水稻(Oryza sativa 2n=24) 银杏(Ginkgo biboba 2n=24) 豌 豆(Pisum sativum 2n=14)多媒体显微演示系统、显微镜、电子天平、载玻片、盖玻片、银子、刀片、滤纸、标签纸、铅笔五、药品和试剂苏木精、铁钾矶、丙酸、水合三氯乙醛、冰醋酸、无水酒精、酸一铁矶苏木精染色液，卡诺氏固定液（同实验一） 六、实验步骤（-）取材水稻：幼穗当剑叶的叶枕距为0左右（早稻-7~0厘米，晚稻-3~0 厘米），幼穗和颖花为终长的1/2时，处于减数分裂期于早上8：00-10： 00采集水稻幼穗进行固定（卡诺氏固定液）1小时，保存在 70%酒精中银杏花蕾：3月下旬当银杏进入减数分裂时，采集整个花枝将整 朵花蕾置于卡诺氏固定液固定1小时，然后转入70%乙醇保存豌豆：从现蕾开始，选取1mm左右大小的花蕾或小段花序进行定然后保存在70 %酒精中制片取1〜3枚花药放在洁净的载玻片上，吸去多余的保存液，用刀片 或两支解剖针将花药横向切断，滴一小滴丙酸一铁矶苏木精染色液于 花药上，用蹑子挤压花药，使花粉母细胞从花药中逸出，再用蹑子把 药壁等残渣银走用低倍镜预先观察是否取到处于减数分裂期的细 胞。

取到适合要求细胞时，用一盖玻片的一边靠在载玻片，待染色液 布满整个边缘时，左手用银子顶着盖玻，右手用解剖针托着盖玻片轻 轻放下，染色液不能布满盖玻片时，则在盖玻片边缘补充少许染色液然后在酒精灯上手持载玻片来回移动烤片，以片子不烫手为宜烤片 使细胞质颜色变浅，染色体着色深烤片后在盖玻片上加一滤纸，用 拇指按压盖玻片或用铅笔的橡皮头轻敲盖玻片注意不要使盖玻片移 动三）显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的花粉母细胞，然后依次转换到高倍 镜观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征七、实验作业1. 制作具减数分裂图象的细胞学片子1一2张2. 绘制细胞学片子的分裂相，并作染色体行为特征的描述。