糖尿病的生物化学检测：测定血液中的葡萄糖含量测定.ppt

四.糖尿病的生物化学检测：（一）测定血液中的葡萄糖含量 测定血糖的方法很多，按其测定原理可分为三类：1.无机化学法： 所用试剂均为无机化学试剂氧化亚铜法（又称Folin-Wu法）原理 葡萄糖 + 还原碱性铜盐（Cu） CuO + 磷钼酸 钼蓝 铁氰化钾法 操作简便试剂易得，费用低 特异性差 谷胱甘肽 葡萄糖醛酸 尿酸 VitC 已淘汰偏高偏高2.有机化学方法： 利用糖的羰基与有机试剂反应测糖 Hultmen使用邻甲苯胺试剂（Otoluidine，O-T）测定血糖原理 血清 + 冰醋酸 + 邻甲苯胺 （葡糖糖） 5羟甲基2呋喃甲醛 + 邻甲苯胺 蓝色的醛亚胺（Schiff碱） 3.生物化学法： 主要是酶法葡萄糖氧化酶法（Glucose Oxidase，GOD）原理 葡萄糖氧化酶葡萄糖 葡萄糖酸 + 过氧化氢H2O2 + 4-氨基安替比林+ 酚 O2 +有色化合物 其颜色深浅同血糖浓度呈正比 过氧化物酶过氧化物酶mol/L） VitC 5mg/Lmol/L） 谷胱苷肽 100mg/L本法第一步是特异反应，第二步特异性差，误差往往发生在反应的第二步负偏差负偏差葡萄糖 + ATP G6P + ADP G6P + NADP 6-磷酸葡萄糖酸+ NADPH NADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比，在波长340nm监测吸光度升高速率，计算血清中葡萄糖浓度。

己糖激酶己糖激酶G6PDG6PD己糖激酶法己糖激酶法原理原理 己糖激酶法的特点 参考方法 试剂盒贵 轻度溶血 脂血、黄疸、 VitC NaF、肝素、EDTA、草酸盐 但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP，有干扰葡萄糖脱氢酶法无干扰无干扰（二） 测定尿中葡萄糖 临床初判断作为过筛g 尿糖试验 （）1.班氏试剂：CuSO4 Glu Cu砖红色A：干酶试剂、折光仪比色（三）口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test , OGTT） 一种葡萄糖负荷试验，了解机体对葡萄糖的调节作用 空腹血糖浓度67mmol/L，+OGTT OGTT 试验前准备： a 试验前三天，每日食物中糖150g b 影响试验药物停用3d c 试验前病人1016h未进食 d 坐位取血5min后饮250ml含75g无水葡 萄糖水，以后每隔30min取血一次，共 四次，历时2h 30 60 90 120 150 30 60 90 120 150 （minmin）5 51010mmol/Lmmol/L正常人正常人糖耐量受损糖耐量受损糖尿病糖尿病肾糖阈肾糖阈（1）空腹静脉血浆葡萄糖6mmol/L（2）口服葡萄糖后3060min达高峰，峰 值不超过10mmol/L（3）2小时回复到空腹水平。

糖尿病患者由于胰岛素相对和绝对缺乏，对糖负荷的耐受能力降低 mmol/L 峰值超过10mmol/L并出现糖尿 延迟（2小时后）回复到空腹水平 判断指标是服葡萄糖后2小时的血浆葡萄糖值增高mmol/L（2）口服葡萄糖后30、60、90min的血浆 葡萄糖11mmol/L（3）2h值在811mmol/L 称为亚临床或无症状的糖尿病 1/3恢复正常 1/3仍为糖耐量受损 1/3明确糖尿病4、影响糖耐量试验的因素 年龄 饮食 劳动 应激 药物 胃肠道功能 标本采集 葡萄糖测定的方法但糖耐量试验可反映近期体内糖代谢的情况。