酵母双杂交培养基汇总.docx

酵母双杂交培养基 10×DO（-His，-Leu，-Trp，-Ura）溶液： 不含-His，-Leu，-Trp，-Ura等成分的10×Dropout溶液： 氨基酸10×浓度（mg/L）称重(g)（1 L）称重(g)（500 mL）L-Isoleucine 异亮氨酸300 0.3 0.15 L-Valine 缬氨酸1500 1.5 0.75 L-Arginine HCl 精氨酸200 0.2 0.1 L-Lysine HCl 赖氨酸300 0.3 0.15 L-Methionine 蛋氨酸200 0.2 0.1 L-Phenylalanine 苯丙氨酸500 0.5 0.25 L-Threonine 色氨酸2000 2.0 1.0 L-Tyrosine 酪氨酸300 0.3 0.15 加ddH2O定容后4℃保存 100×氨基酸储备液： 每100ml溶液中分别含有下列成分，配制后保存于4℃氨基酸储备液100 mL中含量 100×His L-histidine HCl monohydrade 200 mg 100×Trp L-Trytohan 200 mg 100×Leu L-eucine 1 g 100×Uracil 200 mg 100×Adenine 400 mg SD 培养基： Yeast Nitrogen Base 0.17 g (without amino acid and Ammonium Sulfate) Ammonium sulfate 0.5 g 葡萄糖 2 g 10×DO(-His –Leu –Trp –Ura)10 ml 加ddH2O定容至100ml。

如果配固体培养基加入2％的琼脂粉 SD相应的缺失培养基：加上除了缺失的氨基酸之外的其他的氨基酸储备液，100 ml S D+1 ml 100×氨基酸储备液 例如：SD/-Leu：SD+100×His 、100×Trp、100×Uracil、100×Adenine各1 ml 酵母双杂交所用试剂和培养基 试验中所需试剂包括50% PEG、1 M LiAc (10×)、10×TE Buffer、YPD Plus Liquid Medium、YPDA、SD-Leu 、SD-Trp 、X-a-Gal 、Aureobasidin A（AbA）、DMSO、NaCl、DMF等，培养基类型包括YPD、YPDA、2×YPDA、SD培养基、SD相应的缺失培养基等具体配制如下： 10×TE(100 mL)：Tris 1.21g，EDTA Na2 0.37g，用盐酸调pH=7.5，ddH2O定容 10×LiAc（100 mL）：LiAc·2H2O 10.20g，冰醋酸调pH 7.5，ddH2O定容 50% PEG（100 mL）：PEG3350 50g，ddH2O定容。

1.1×TE/LiAc（10 mL）：1.1 mL 1M LiAc，1.1 mL 10×TE Buffer，8.8 mL无菌H2O 1×PEG/ LiAc（10 mL）：8 mL 50% PEG3350，1 mL 10×TE Buffer，1 mL 1M LiAc 10×DO（-His，-Leu，-Trp，-Ura）溶液：L-Isoleucine 300mg，L-Valine 1500mg，L-Arginine HCl 200mg，L-Lysine HCl 300mg，L-Methionine 200mg，L-Phenylalanine 500mg，L-Threonine 2000mg，L-Tyrosine 300mg，加ddH2O定容至1000 mL, 高压灭菌20 min，4℃保存 100×氨基酸储备液（每100 mL溶液中分别含有下列成分）：100×His L-histidine HCl monohydrade 200mg，100×Trp L-Trytohan 200mg，100×Leu Leucine 1g，100×Uracil 200mg，100×Adenine 400mg。

YPD培养基：蛋白胨20g，酵母提取物10g，葡萄糖20g，琼脂粉20g (固体平板用)，加1 L dd H2O，高压灭菌20min YPDA：YPD+1 mL 100×Adenine（腺嘌呤） 2×YPDA：YPDA 培养基成分加倍。