精子活率密度畸形率.ppt

精子活率、密度、畸形率和精子活率、密度、畸形率和精液精液PH值的测定值的测定实验目的通过实验，了解精子的运动方式；识别正常精子和异常精子的形态初步学会和掌握精液密度、精子的活率、畸形率和精液酸碱度（PH）的测定方法熟悉肉眼检查精液品质的方法实验材料家畜精液、载玻片、凹灶玻片、盖玻片、球棒、医用中性石腊油、75%酒精棉球、酒精灯、伊红染液、纱布、棉花、火柴、PH比色器、PH试纸、烧杯、显微镜、保温箱方法步骤方法步骤一、精液的肉眼检查一、精液的肉眼检查（一）射精量（一）射精量( (ml) ) 概念: 射精量是指每次射精的体积 测定: 以连续3次以上正常采集到的精液的平均值代表 测定方法:将采得的精液倒入有刻度的试管或杯中，测其容量 各种家畜的平均射精量为： 奶牛：奶牛：5-10；肉牛：；肉牛：4-8；； 绵羊：绵羊：0.8-1.2 ；猪：；猪：150-500；山羊：；山羊：0.5-1.5；马：；马：30-100 射精量不正常的原因现 象原 因过 少采精过频、性机能衰退、睾丸炎、发育不良过 多副性腺发炎、假阴道漏水、尿潴留、采精操作不熟练（二）观察精液的颜色并嗅闻气味（二）观察精液的颜色并嗅闻气味 观察精液的色泽并嗅闻气味。

一般为一般为乳白色或灰白色乳白色或灰白色正常牛羊精液呈乳正常牛羊精液呈乳白色或乳黄色，猪、马的精液呈淡乳白色或浅白色或乳黄色，猪、马的精液呈淡乳白色或浅灰白色灰白色 正常正常精液具有一种特有的腥臭味，该气味由前精液具有一种特有的腥臭味，该气味由前列腺列腺产生是由一种称为精氨的化学物质经过是由一种称为精氨的化学物质经过氧化以后散发出来的，很像栗子花的味道精氧化以后散发出来的，很像栗子花的味道精氨是前列腺分泌物所含的多种成分之一氨是前列腺分泌物所含的多种成分之一 腥味：有脓液腥味：有脓液 臊味：有尿液或包皮液臊味：有尿液或包皮液不正常精液颜色原因分析正常精液特征依从浓到稀：乳黄-乳白-白色-灰白淡红（鲜红）生殖道下段出血或龟头出血淡红（暗红）副性腺或生殖道出血绿副性腺或尿生殖道化脓褐混有尿液(三三)云雾状云雾状 是指新鲜精液在是指新鲜精液在33-35℃ 33-35℃ 温度下，精子成群温度下，精子成群运动所产生的上下翻卷的现象运动所产生的上下翻卷的现象 云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子云雾状的明显程度代表高浓度的精液中精子活力的高低。

活力的高低云雾状分级标准云雾状分级标准n+++ +++ 翻明显而且较快翻明显而且较快n++ ++ 翻明显但较慢翻明显但较慢n+ + 仔细看才能看到精液的移动仔细看才能看到精液的移动n- - 无精液移动无精液移动二、二、精子活率测定精子活率测定精子活率精子活率：：在显微镜下观察，在一个视野内在显微镜下观察，在一个视野内向直线前进运动的精子占全部精子总数的向直线前进运动的精子占全部精子总数的百分率 一般在一般在37-38°C温度下进行评定，牛、羊精温度下进行评定，牛、羊精液尚需用生理盐水作稀释后才能评定液尚需用生理盐水作稀释后才能评定 活力一般用活力一般用0-1.0的的10级评分，一般新鲜采级评分，一般新鲜采精液活率应该为精液活率应该为0.7~0.8左右测定精子活率的方法很多，有活精子计算法，死活精子染色法和目测法目测法因使用的材料和工具不同，又可分为平板压片法、悬滴检查法和油盖检查法三种1、平板压片法 （1）取高温消过毒的载玻片、盖玻片、玻棒若干备用2）滴一滴精液（如太浓，可先用生理盐水稀释）于消毒过的载玻片上，盖上消毒过的干净盖玻片。

（3）将制好的片子放在显微镜载物台上，先用低倍镜观察，后用高倍镜（400～600倍）观察（如气温低，须将显微镜置于保温箱内升温到37℃后，再进行镜检）2、悬滴检查法 （1）滴一小滴精液于消毒好的盖玻片中央 （2）在凹灶处周围涂上少量水，然后将凹处对准盖玻片上的精液，并覆盖于盖玻片上，使其贴在一起 （3）将玻片倒转过来，使精液滴悬挂于盖玻片下，便可放在显微镜下观察3、油盖检查法 （1）滴一滴精液于消毒过的载玻片上 （2）在精液上面滴一滴医用中性石腊油即可放在显微镜下观察4、活率的评定 （1）在显微镜下观察精子的运动方式，并区别直线前进式运动、旋转式运动和摆动式运动的精子活动的情况 （2）根据视野中呈直线前进式运动的精子所占比例进行测定如全部精子均呈直线前进式运动，看不到非直线前进式运动的精子，可评为“1.0”分；如果视野中只有80％的精子呈直线前进式运动，其余20% 呈非直线前进式运动，则评为“0.8”分，其余依此类推测定时要求多看几个视野，然后进行综合评定在一个视野中，如果呈前进式运动的精子占多数，则重点估测非前进式运动的精子所占比例，反之则估测前进式运动的精子所占比例。

三、精子三、精子密度密度检查检查 测定精液密度的方法有估测法，红细胞计数法和光电比色法其中估测法通常结合精子活率进行检查，一般用测定活率的平板压片法进行 取一小滴精液于清洁的载玻片上，加上盖玻片，使精液分散成均匀一薄层，但不得有气泡，也不能使精液外流或溢于盖玻片上，置显微镜下放大400～600倍观察，按下列等级评定其密度（如图2-1）图2-1 稀 中 密1、稀：精子分散存在，精子间的空隙超过一个精子长度，这种精液一般每毫升所含精子在2亿以下2、中：精子之间的空隙明显，精子彼此之间距离约有一个精子的长度有些精子的活动情况可以清楚地看到这种精液的密度评为“中”， 一般每毫升所含精子数约在2～10亿之间3、密：在整个视野中精子密度很大，彼此间空隙很小，看不清各个精子运动的活动情况，这一级属于“密”，一般每毫升含精子数约在10亿以上畜种牛羊羊猪猪马鸡密度 亿/ml8-1220-302-31.5-330-50各种家畜精液的精子密度各种家畜精液的精子密度各种家畜精液的精子密度各种家畜精液的精子密度四、精液四、精液PHPH的的测定测定1、比色试纸法 （1）取一滴精液于清洗干净的凹玻片上，然后用一小张精密试纸（6.5～8.0）放于精液滴上。

（2）让精液渗湿试纸后即在精密试纸比色图上比色，并记录结果 五五、、精子畸形率的检查精子畸形率的检查精子畸形率：是指畸形精子占视野中总精子数的百分率 精子畸形分为四类： 头部畸形：头部巨大、瘦小、细长、缺损、双头、皱缩等颈部畸形：颈部膨胀大、纤细、曲折、双颈等中段畸形：膨大、纤细、带有原生质滴等主段畸形：弯曲、曲折、回旋、双尾等 精子畸形率猪不超过18%，羊不超过14%，马不超过12%如果畸形率超过20%，则视为精液品质不良，不能用做输精1、滴一小滴精液于消毒过的载玻片一端 2、用另一块边缘光滑的玻片（最好为凹灶玻片）的一端斜抵于精液前成35℃角，使凹灶玻片底面与精液接触，并向两旁散开后，即向载玻片的另一端轻快推去，使精液均匀地涂于载玻片上 3、让抹片风干后，先在显微镜下观察所抹片子如何，如理想，则可染色；否则，洗去重做4、在风干的抹片上滴上2 ～3滴5%伊红染液，并用玻棒稍为推开染色3～5min，然后轻轻用水洗去多余的染料，候干镜检 也可以用下列方法固定染色1）用0.5%的龙胆紫酒精染色3min，水洗，待干后即可镜检（也可用由普通红蓝墨水代替）。

2）置95%酒精中（或5%福尔马林溶液）固定5～6min，取出以水冲洗后，凉干或烘干，用蓝、红墨水等染色3～5min，再用水冲洗，干燥后置于显微镜下检查5、镜检：在任意若干个视野中计算200个精子中有多少个畸形精子（注意区别正常精子和头、颈、中段部以及尾部畸形的精子）并记载于表中见图2-3） 6、计算精子的畸形率：精子畸形率 = 畸形精子数 /（正常精子数＋畸形精子数）×100%左图为正常精子（左下为原生质小滴），右图为各种畸形精子作业作业1、列表记载本次实验所得的精液密度、精子的活率及精液PH数值2、将精子畸形率的检查结果详细记入下列表格中在检查精子活率时，为了获得比较准确的结果，你认为应注意哪些事项？项目项目正常精正常精子子畸形精子畸形精子总观察总观察数数畸畸形形率率（（%））头部颈部中段尾部总计观察数总计。