菌落总数的快速测定方法概要.doc

菌落总数的快速测定方法1适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定 也可用于与食品接触的容器、 操作台和其他设备表面的卫生检测2方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（ TTC）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果3操作方法3.1样品处理：无菌称取样品25g （或25mL）放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质 杯内，经充分振摇（均质）做成 1:10的稀释液用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL，注 入含有9mL灭菌生理盐水的试管内， 用1mL灭菌吸管反复吸吹制成 1:100的稀释液以此类推，做出1:1000等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管3.2接种：一般食品选2〜3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉 水等）可直接用原液检测将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸 取样品原液或稀释液 1mL,均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置 5 min使培养基凝固，最后用手轻轻地压一下每个稀释度接种两片3.3培 养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。

培养温度为 36C± 1C,培养15〜24h4结果判断与计数：4.1细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（ 10个〜100个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克 （或毫升）样品中所含的细菌菌落总数 菌落数在100以内时， 按实有数报告大于100时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字， 以四舍五入方法计算，并以10的指数来表示4.2计数原则与报告方式通常选择菌落在10个〜100个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表 中例次1 ）国家标准菌落总数报告方式术语为 cfu/g或mL, cfu的含义为菌落形成单位若有两个稀释度的菌落数在 10个〜100个之内，两者的比值小于 2，则取其平均数，若大于2，则采用稀释度小者报告（见下表中例次 2和例次3）若三个稀释度的菌落数都有在 10个〜100个之内时，应选择二个低数值的平均数 （见下表中例次4）若三个稀释度的菌落数均小于 10个或大于100个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的最小值， 或采用均大于数量标准的最大值 （见下表中例次5和例次6）稀释度10-110-210-3例次两稀释 度之比选定计数稀释度扌艮告方式 （个/g或个 /mL）1158765一10-237.6 X 10220868121.810-2、10-39.4 X 10326582506.110-28.2 X 104985015一10-1、10-23.0 X 105851一10-18.0 X 106295174106一10-31.1 X 10菌落数多时的情况5表面取样方法： 加1mL灭菌生理盐水在测试片上，静置至少 1h使培养基凝固；提起上层 膜，使中央滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压； 然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。

6注意事项：使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理北京智云达科技有限公司。