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dna纯化醋酸钠原理.docx

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dna 纯化醋酸钠原理首先，向酶切体系添加 1/10 体积浓度为 3M 的 NaAc，混匀后，整个体系的Na+浓度就是0.3M （生理盐水的Na+ 浓度大约为0.15M）这么多的Na+均匀地分散到DNA表面, 屏蔽掉DNA链上PO4-的负电荷，有利于DNA链的压缩否则的话，PO4-彼此排斥，DNA就不容易聚集接着，向整个体系添加 2 倍体积的无水乙醇乙醇和水的互溶性很好，加进去后，乙醇就把 DNA 表面的水膜夺走换句话说，水和乙醇混去了，原本溶解在水中的 DNA 只好被挤了出来第一步加入的Na+平衡了 PO4-的电荷，被挤出来的DNA就轻易堆积在一起了经过离心（12,000 rpm X 5 min），被挤出来的 DNA 就全部被甩到了离心管底部把上清倒掉，剩下DNA然而，这时的DNA不纯，还混有酶切体系留下来的盐分，以及变性了的酶酶变性了，量也不多，不用清除向离心管中加入足够量的 70%乙醇这时候，既有足够的乙醇保证 DNA 不溶于水，又有足够的水把盐份从 DNA 沉淀里溶解出来你可以选择短暂离心，或者静置 1 分钟，来溶解盐分然后，去干净上清，这样剩下的 DNA 就不含多余的盐分等杂质，从而不会影响后续实验。

把沉淀烘干，最后用适量的水（或者TE溶液，tris保持弱碱性；EDTA螯合金属离子，抑制依赖于金属离子的DNAse；这样的DNA溶液质量更高）溶就可以了。

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