大鼠脑干急性缺血形态学探究.doc

大鼠脑干急性缺血形态学探究摘要目的：观察急性脑干缺血模型大鼠脑干的形态结构 改变方法：建立大鼠急性脑干缺血模型后，不同时间取病 变脑干进行光镜及透射电镜观察结果：光镜下缺血4小时 可见部分神经元胞质淡染，呈轻度水肿改变；电镜下缺血1 小时可见神经元核周质内线粒体轻度肿胀，髓鞘板层局部分 离现象，轴突内出现局灶空化，4小时可见个别神经元细胞 凋亡，毛细血管内皮细胞向腔内形成较多微突起结论：超 微结构改变随脑干缺血时间增加而越明显，特别是线粒体改 变更突出，说明能量代谢障碍对脑干缺血时超微结构的改变 起到了至关重要的作用关键词脑干缺血超微结构脑干急性缺血损伤对生命危胁颇大，因此，通过动物模 型研究脑干缺血，对临床患者的治疗具有重大的指导意义 我们采用大鼠可逆性脑干缺血模型，对缺血后各时段的形态 学改变进行了光镜和透射电镜观察材料与方法动物及分组：选用健康成年Wistar大鼠（白求恩医科 大学动物实验中心提供）30只，雌雄不限，体重230〜280g 随机分为五组，即模型组1、2、3、4和对照组，每组6只 大鼠模型各组分别为椎动脉夹闭0.5小时、1小时、2.5小时和4小时方法：各组动物采用20%乌拉坦(6-7ml/kg)腹腔内注射，麻醉后仰卧位固定于手术台上,手术暴露左侧椎动脉。

然后，模型各组用银夹夹闭该椎动脉，对照组则不用银夹夹 闭椎动脉模型各组分别在设定时限内快速断头处死，并迅 速取病变脑干，固定于10%福尔马林液中，用于常规HE切片, 光镜观察；另取病变脑干切制成1mm❷3,立即固定于2.5% 戊二醛液中，常规电镜技术制作包埋，LKV-V型超薄切片机 切片，JEM-1200EX透射电镜观察结果光镜检查结果：与正常对照组相比，模型组0.5小时、 1小时和2.5小时未见明显的组织结构改变；4小时仅见部 分神经元胞质淡染，呈轻度水肿改变电镜检查结果：与正常对照组相比，模型组0.5小时未 见明显的超微结构改变模型组1小时可见神经元核周质内 线粒体轻度肿胀，嗜变短变少，髓鞘板层结构清晰，但出现 局部分离现象，轴突内出现局灶空化模型组2. 5小时神经 元核膜局部轻度凹陷；核周质内粗面内质网轻度扩张，线粒 体较少且晦短少，甚至缺失，轴突空化和髓鞘分离现象较1 小时多见；毛细血管内皮细胞核染色质浓聚趋边，胞质内线 粒体肿胀，呈空泡状，基膜较完整模型组4小时可见个别 神经元核基质致密状，染色质浓缩，核周质基质致密，呈细 胞凋亡表现；其他改变较2. 5小时明显；毛细血管内皮细胞 核形不规则，染色质浓密趋边，核仁明显，胞质向腔内形成 较多微突起，基膜连续。

讨论脑干组织缺血缺氧导致组织能量代谢障碍，致使细胞内 外离子紊乱，特别是细胞内钙离子超载，触发了神经元细胞 内的一系列有害反应；细胞结构破坏，使细胞膜、核膜连续 性被破坏，微丝、微管解聚，其中以线粒体和神经元突触膜 的破坏最明显核染色质浓缩、聚集、周边化，核周质内线 粒体肿胀，靖排列不规则，神经毡中髓鞘发生分层状改变， 星形胶质细胞肿胀压迫导致毛细血管变形本实验研究采用的大鼠脑干缺血模型是一种创伤小、易 再通、可控性强的模型实验中观察到，脑干缺血4小时光 镜下可见部分神经元胞质淡染，呈轻度水肿改变；电镜下缺 血1小时可见神经元核周质内线粒体轻度肿胀，皤变短变少, 髓鞘板层结构清晰，但出现局部分离现象，轴突内出现局灶 空化缺血2. 5小时神经元核膜局部轻度凹陷；核周质内粗 面内质网轻度扩张，线粒体较少且晦短少，甚至缺失，轴突 空化和髓鞘分离现象较1小时多见；开始出现毛细血管内皮 细胞核染色质浓聚趋边，胞质内线粒体肿胀，呈空泡状缺 血4小时可见个别神经元核基质致密状，染色质浓缩，核周 质基质致密，呈细胞凋亡表现；毛细血管改变加重，内皮细 胞核形不规则，染色质浓密趋边，胞质向腔内形成较多微突 起。

随脑干缺血时间增加，超微结构改变越明显，特别是线 粒体改变更突出，说明能量代谢障碍对超微结构的改变起到 了至关重要的作用。