HPLC法测定复肾宁胶囊中丹皮酚的含量药学论文.doc

HPLC法测定复肾宁胶囊中丹皮酚的含量_药学论文 作者：陈亚利，陈亚芬，刘景霞，王国华【摘要】 目的：建立复肾宁胶囊中丹皮酚含量测定的方法方法：采用HPLC法测定，色谱柱：Kromasil 5μC18；流动相：甲醇-水(65：35)；测定波长：274nm结果：含量测定丹皮酚线性范围0.03864-0.5796μg，r=1.0000，平均回收率为99.6%,RSD=0.95%结论：本法灵敏、快速、准确,可用于测定复肾宁中丹皮酚的含量 【关键词】 复肾宁胶囊 丹皮酚 高效液相色谱法 含量测定　 　1 仪器与试药　　高效液相色谱仪:LC2010高效液相色谱仪(日本岛津)；丹皮酚对照品(供含量测定用，批号:07089704)购于 中国 药品生物制品检定所；复肾宁胶囊样品为吉林省精鑫药业集团有限公司生产；各味药材购置于吉林省药材公司；流动相甲醇为色谱醇，其它试剂为分析纯　 　2 含量测定 　　2.1 色谱条件［1］ 色谱柱：采用Kromasil 5μC18；流动相：甲醇-水(65：35)；流速：0.7ml/min；色谱峰基线分离检测波长：对丹皮酚的对照品溶液进行紫外光谱扫描，其最大吸收为274nm，并 参考 中国药典中丹皮酚测定波长，故选择其测定波长为274nm。

理论板数按丹皮酚峰 计算 应不低于3000　　2.2 供试品提取纯化条件的选择 ①将样品用甲醇超声；②将样品用水蒸气蒸馏对方法①、②进行比较，经计算二者含量结果相近，但方法①更简单，故选择方法①制备供试品溶液　　2.3 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，加入甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得　　2.4 供试品溶液制备 取本品20粒，取其内容物，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得　　2.5 阴性对照试验 取缺牡丹皮的阴性样品同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液精密吸取5μl注入液相色谱仪进行测定，色谱图中在与丹皮酚对照品相应的保留时间处无吸收峰，表明阴性对照无干扰　　2.6 线性关系考察 精密称取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.03864mg的溶液，精密吸取1.0、3.0、5.0、10.0、15.0μl注入液相色谱仪，测定，以对照品进样量(μg)为横坐标，以峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线， 计算 回归方程y=-23690.52x+7470396.87(r=1.0000) 。

表明丹皮酚进样量在0.03864-0.5796μg范围内，进样量与峰面积呈良好的线性关系 　　2.7 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液5μl，重复进样5次，测定峰面积，结果RSD为0.48%　　2.8 稳定性试验 分别取同一放置0、2、5、8、10h的供试品溶液进行测定，供试品丹皮酚的峰面积的RSD为1.28％，说明牡丹皮在10h内稳定　　2.9 重现性试验 对同一批号的复肾宁胶囊样品按上述的含量测定方法进行5次平行提取测定，计算含量，结果平均含量为0.79mg/粒，RSD=0.82%　　2.10 回收率试验 精密称取已知含量的复肾宁胶囊(含量为3.1567mg/g)5份，每份为0.40g，精密称定，分别置5个锥形瓶中，照含量测定方法测定，加入含丹皮酚0.01824mg/ml的甲醇液50ml作为提取溶媒，计算回收率，结果A=99.6%，RSD=0.95%　　2.11 样品测定结果 3批样品丹皮酚含量均值为0.77、0.081、0.80mg／粒　　 3 讨论　　牡丹皮为方中君药，丹皮酚为其主要成分之一复肾宁胶囊原质量标准中无“含量测定”项，经查阅，未见处方中丹皮酚含量的相关报道［２］，为更加有效准确地控制本药的内在质量，经方法学研究验证，采用高效液相色谱法对处方中牡丹皮中的丹皮酚进行含量测定，操作简便、结果准确、重现性好，具有专属性，能够有效地控制产品质量。

参考 文献 】 　　［1］国家药典委员会编.中华人民共和国药典［M］.北京:化学 工业 出版社,2005.　　［2］王宝琴.中成药质量标准与标准物质研究［M］.北京: 中国 医药科技出版社,1994.。