[医疗保健]病毒的接种 - 新乡医学院.ppt

精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改 病毒的培养方法掌握 病毒的鸡胚绒毛尿囊膜接种法及小鼠脑内接种方法概述,病毒结构简单，缺乏完整的酶系统，不能在无生命的人工培养基中生长，必须在活的组织细胞中才能增殖动物接种法鸡胚培养法组织细胞培养法,,,常用的分离、培养、鉴定病毒的方法,动物接种,动物接种（Animal inoculation）是最早应用的病毒培养法，在病毒学研究中主要有三方面用途：分离鉴定病毒、通过传代增殖或减弱病毒毒力、制备免疫血清在分离病毒时由于动物自身可能带有病毒，而且许多病毒没有敏感动物，因而目前多被组织培养所代替 常用的动物有小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、家兔、羊和猴等接种的途径有鼻内、皮内、脑内、腹腔内和静脉注射等小鼠脑内接种,1、以无菌0.25ml注射器抽取流行性乙型脑炎病毒悬液0.1ml，去除注射器内的气泡2、取出小鼠，左手将小鼠固定（固定时用大拇指和食指握住小鼠的头部，左手手掌轻轻按住小鼠的体部）3、右手用棉签蘸以碘酒，消毒小鼠的右侧颞部皮毛（不碰到眼）4、右手拿注射器在小鼠颞部（眼与耳根联线的中点略偏耳朵的方向）注入，进入颅腔即可（一般进针2－3mm），不要插得太深，注射量为0.02－0.03ml。

5、注射完毕，将用过的注射器放入煮沸消毒器内，煮沸消毒实验动物置于防蚊设备的室内饲养，逐日观察动物发病情况鸡胚接种,接种途径可根据病毒种类选择适宜接种部位，如分离流感病毒常用羊水囊和尿囊同时接种法，而痘病毒常采用绒毛尿囊膜接种法,尿囊腔接种法卵黄囊接种法绒毛尿囊膜接种法羊膜囊接种法,,,,气　室,,鸡　胚,,卵黄囊,,尿囊腔,,羊膜腔,,绒毛尿囊膜,,卵　白,,卵膜,判断鸡胚是否存活,⑴ 在检卵灯下观察能否看到清晰的血管；⑵ 胚胎是否移动；⑶ 若胚龄过长，则需观察其胎盘部分，胎盘部分变苍白说明胚胎死亡，正常时胎盘发暗，蛋白部分透亮绒毛尿囊膜接种法,定位：将胎盘部分及自然气室部分用铅笔画出，在胎盘与蛋白交界处（无血管区）画一直径约1cm的等边三角形卵窗,,,,,气　室,,鸡　胚,,卵黄囊,,尿囊腔,,羊膜腔,,绒毛尿囊膜,,卵　白,,卵膜,取卵壳：消毒后取下所画三角形区域的卵壳，注意卵膜不要碰破，于卵膜中央刺一小口（不要伤及绒毛尿囊膜），造人工气室：在自然气室部分用大注射器针头钻一孔，用橡皮头自气室端小孔将气室中空气吸出，使绒毛尿囊膜下陷形成一“人工气室”,接种：去除卵膜，于绒毛尿囊膜上滴上病毒0.1~0.2ml。

封口：用胶布封口，胶布事先用碘酒消毒，并通过火焰烧去余碘培养：放入温箱培育4天，然后收获病毒真菌菌落的观察（示教）,真菌培养营养要求不高，在一般培养基上能生长常用沙保弱（Sabouraud）培养基（含4%葡萄糖、10%蛋白胨、琼脂），真菌的最适酸碱度是pH4.0~6.0，最适生长温度浅部真菌22~28℃，深部真菌37℃ 真菌菌落类型,酵母型菌落（yeast colony） 菌落光滑、湿润无菌丝隐球菌菌落类酵母型菌落（yeast-like colony） 外观和酵母型菌落相似，显微镜下可看到假菌丝白色念株菌菌落丝状型菌落（filamentous colony）菌落系由多细胞菌丝体所组成大多数丝状真菌或霉菌的菌落,新型隐球菌：菌落属酵母型菌落，圆形、较大、白色、边缘整齐，表面湿润光滑，与一般细菌菌落相似白色念珠菌：菌落属类酵母样菌落，圆形、较大、白色、菌落底层有假菌丝长入培养基内絮状表皮癣菌：菌落属丝状菌落，在沙保琼脂斜面培养基上菌落开始为白色，颗粒状，以后变为绒毛样甚至粉末状，有许多辐射状沟，呈草绿色，且培养基常有皱裂石膏样小孢子菌：菌落属丝状菌落，在沙保培养基上菌落为棉絮状、羊毛状或粉末状。

注意事项,消毒小白鼠时不要碰到眼睛注射时不要扎的太深以免刺伤对侧手指磨卵壳及钻孔时力量要适中看过的鸡胚不要倒入水池，倒入指定的大烧杯中,关于心脏病要做哪些检查，在这里为您解答心脏病患者体检时应查的项目有内科检查、血压、心电图、血脂、血糖、肝肾功能、血常规因为心电图检查只能作短时静态记录，所以，心脏病患者应视情况加做以下检查 　　（一）动态心电图（Holter）又称长程心电图，可提供受检者全日的动态心电活动的信息有效地补充常规心电图的不足，不仅可以获得连续24小时甚至48小时的心电图资料，结合病人的活动日记，还可以明确病人的症状、活动状态及服用药物等与心电变化之间的关系应用范围： 　　1．心悸、胸痛、头昏、晕厥等症状性质的判断 　　2．心律失常的定性、定量诊断 　　3．心肌缺血的定性、定量及相对的定位诊断 　　4．心肌梗塞患者出院后随访作预后评估 　　5．选择安装心脏起搏器的适应证，评定起搏器的功能 　　6．抗心律失常及抗心肌缺血药物的疗效评定 　　（二）心电图运动负荷试验心电图运动负荷试验，是用以发现早期冠心病的一种诊断方法，虽然与冠状动脉造影结果对比有一定比例的假阴性和假阳性，但由于其方便、无创伤、安全，仍被公认为一项重要的临床检查手段。

其中平板运动试验是目前应用最广泛的运动负荷试验方法 　　适用于： 　　适用于：,精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。