邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法.docx

邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法 试验仪器一：紫外-可见分光光度计的运用邻二氮菲吸光光度法测定铁一、试验目的1. 初步熟识分光光度计的运用方法 2. 熟识测绘汲取光谱的一般方法 3. 学习标准曲线定量方法 二、试验原理在建立一个新的汲取光谱法时，必需进展一系列条件试验，包括显色化合物的汲取光谱曲线〔简称汲取光谱〕的绘制、选择适宜的测定波长、显色剂浓度和溶液pH值的选择及显色化合物影响等此外，还要探究显色化合物符合朗伯－比尔定律的浓度范围、干扰离子的影响及其解除的方法等本试验利用分光光度计能连续变换波长的性能，测定邻二氮菲－Fe2+的汲取光谱，并选择适宜的测定波长在pH=3～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲〔phen〕生成稳定的橙红色络合物，λmax＝508nm,ε＝1.1×104L/〔mol·cm〕，lgβ3=21.3(20℃)2?Fe?3phen?Fe?phen?3 〔橙红色〕2?Fe3+与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色络合物〔lgβ3=14.1〕，故显色前应先用盐酸羟胺将Fe3+复原为Fe2+，其反响为2Fe3??2NH2OH?HCl?2Fe2??N2??2H2O?4H??2Cl?在508nm处测定吸光度值，用标准曲线法可求得水样中Fe2＋的含量。

假设用盐酸羟胺等复原剂将水中Fe3＋复原为Fe2＋，那么本法可测定水中总铁、Fe2＋和Fe3＋各自的含量三、仪器与试剂 1．仪器732型分光光度计、酸度计、容量瓶〔50mL〕、吸量管〔5mL，10mL〕等 2．试剂〔1〕铁标准溶液精确称取0.2152克优级纯铁铵矾〔NH4Fe〔SO4 )2 ·12H2O〕于小烧杯中，加水溶解，参加6mol∕L HCl溶液5mL，定量转移至250mL容量瓶中稀释至刻度，摇匀所得溶液每毫升含铁0.101 mg〔即101ug/mL〕〔2〕0.15％邻二氮菲〔又称邻菲咯琳〕水溶液：称取1.5g邻二氮菲，先用5～10mL 95％乙醇溶解，再用蒸馏水稀释到1010mL〔3〕10％盐酸羟胺水溶液〔别致配制〕； 〔4〕HAc－NaAc缓冲溶液〔pH＝4.6〕：称取136g优级纯醋酸钠，加120 mL冰醋酸，加水溶解后，稀释到500mL 〔5〕0.1mol∕L NaOH溶液 〔6〕0.1mol∕L HCL溶液 四、试验步骤 (一)试验条件的选择1．汲取曲线的制作和测量波长的选择：用吸量管吸取0.0，1.0mL铁标准溶液〔101μg/ml〕，分别注入两个50mL比色管中，各参加1mL盐酸羟胺溶液，2mL邻二氮菲，5mL HAc-NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。

放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白〔即0.0mL铁标准溶液〕为参比溶液，在440～560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，在最大汲取峰旁边，每隔5nm测定一次吸光度在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A和λ关系的汲取曲线从汲取曲线上选择测定Fe的相宜波长，一般选用最大汲取波长λmax2．酸度影响于8只50 mL容量瓶〔或比色皿〕中，用刻度移液管各参加1.0 mL 101μg/ml的铁标准溶液，再参加1 mL盐酸羟胺溶液和2mL邻二氮菲溶液，摇匀然后分别参加NaOH溶液0.0 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL用蒸馏水稀释至刻度，摇匀放置10 min后分别测定各溶液的pH值和吸光度吸光度测定条件为：1cm比色皿，蒸馏水作参比，测定波长为λmax 3．显色剂用量的影响取7个50 mL容量瓶〔或比色皿〕，依次参加1.0 mL 101μg/ml的铁标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液摇匀再分别参加邻二氮菲溶液0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、 0.8 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL，参加5.0ml的HAc－NaAc，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

放置10 min后测定各溶液的吸光度吸光度测定条件为：1cm比色皿，以蒸馏水作参比，测定波长为λmax 〔二〕铁含量的测定 1．标准曲线的制作：用移液管吸取101μg·mL-1铁标准溶液10mL于101mL容量瓶中，参加2mL 6mol·L-1的HCl，用水稀释至刻度，摇匀此溶液每毫升含Fe3+ 10μg 在6个50mL容量瓶〔或比色管〕中，用吸量管分别参加0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 10μg·mL-1铁标准溶液，分别参加1mL盐酸羟胺，2mL Phen，5mL HAc－NaAc溶液，每加一种试剂后摇匀然后，用水稀释至刻度，摇匀后放置10min用1cm比色皿，以试剂为空白〔即0.0mL铁标准溶液〕，在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线用绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe2+－Phen络合物的摩尔吸光系数2．试样中铁的测定精确吸取适量试液于50ml比色管中，按标准曲线的制作步骤，参加各种试剂，测量吸光度从标准曲线上查出和计算试液中铁的含量〔μg·mL-1〕五、数据记录与处理 1．绘制A-λ，得出λmax 2．绘制A-pH，得出最正确pH范围3．绘制A-Vphen，得出phen最正确运用体积4．绘制工作曲线，从工作曲线上找出未知试样的含量，并计算水样中的铁含量〔μg·mL-1〕六、留意事项 1. 本试验旨在学会分光光度法测定水中微量物质时的最根本操作条件、原理和方法以及732型分光光度计的运用。

因此，要细致阅读仪器说明书，了解仪器的构造和各个旋钮的功能；在运用时，必须要遵守操作规程和听从教师的指导 2. 在每次测定前，应首先作比色皿配对性试验方法是：将同样厚度的4个比色皿分别编号，都装空白溶液，在508nm处测定各比色皿的吸光度〔或 透光率〕，结果应一样假设有显著差异，应将比色皿重新洗涤后再装空白溶液测定，直到吸光度〔或透光率〕相同假设经过屡次洗涤，仍有显著差异，那么用下法校正： 〔1〕以吸光度最小的比色皿为0，测定其余三个比色皿的吸光度值作为校正值 〔2〕测定水样或溶液时，以吸光度为零的比色皿作空白，用其它各皿装溶液，测各吸光度值减去所用比色皿的校正值 溶液吸光度测量值的校正例如 比色皿编号 1 2 3 4 空白溶液校正值〔A〕 0.0 0.0044 0.0088 0.0223 显色溶液测得值〔A〕 0.0 0.2041 0.4089 0.6234 校正后测得值〔A〕 空白 0.200 0.400 0.601 3. 拿取比色皿时，只能用手指捏住毛玻璃的两面，手指不得接触其透光面盛好溶液〔至比色皿高度的4/5处〕后，先用滤纸轻轻吸去外部的水〔或溶液〕，再用擦镜纸轻轻擦拭透光面，直至干净透亮。

另外，还应留意比色皿内不得粘附小气泡，否那么影响透光率4. 测量之前，比色皿需用被测溶液荡洗2～3次然后再盛溶液比色皿用毕后，应马上取出，用自来水及蒸馏水洗净、倒立晾干5. 仪器不测定时，应翻开暗箱盖，以爱护光电管 6. 绘制汲取光谱时应选择恰当的坐标比例，曲线应光滑 七、思索题1. 依据试验数据，计算在最大汲取波长下，邻二氮菲-Fe〔Ⅱ〕的摩尔汲取系数ε你的计算值与文献值ε＝1.1×104是否相同？如不相同，请作说明2. 本次试验中用732型分光光度计测得的最大汲取波长与文献值λmax＝508nm是否有差异？如有差异，请说明缘由3. 单色光不纯对汲取光谱的测定有何影响？4．本试验量取各种试剂时应分别采纳何种量器较为适宜？为什么？5．怎样用吸光光度法测定水样中的全铁〔总铁〕和亚铁的含量？试拟出简洁步骤 本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！第6页 共6页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页第 6 页 共 6 页。