总胆红素(TBIL) 钒酸盐氧化法.doc

项 目总胆红素(TBIL)方 法钒酸盐氧化法目 录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理钒酸盐 测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度胆红素 ———— 胆绿素pH 3.02. 标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录注意有无应用影响测试项目的药物此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组 成浓度R1：柠檬酸缓冲液100mM反应促进剂表面活性剂R2：磷酸缓冲液10mM偏钒酸钠3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染试剂R1、R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融参见校准血清说明书4．仪器KONELAB 30型号仪器性能：波长450nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆本法为终点法参数见后附，附录A试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程6．计算ΔA测定C = ———— × C0ΔA标准 式中：c—— 测定总胆红素浓度，μmol/L；ΔA测定—— 标本管吸光度；ΔA标准—— 标准管吸光度；CO—— 校准血清中总胆红素浓度，μmol/L；7．操作性能7.1 精密度：批内CV< 0.67%，批间CV<2.97％7.2 准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%7.3 灵敏度：总胆红素浓度为：90μmol/L时，显色吸光度A450nm为0.272～0.3327.4 可报告范围：血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为680μmol /L7.5 特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内7.6 干扰：内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响8．参考值2.0～20.4μmol /L9．临床意义胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断附录A: 参数。