探讨嵌合抗原受体基因修饰的T细胞免疫治疗骨肉瘤的应用进展.docx

          探讨嵌合抗原受体基因修饰的T细胞免疫治疗骨肉瘤的应用进展                    摘要：在临床当中骨肉瘤是一种较为常见的恶性肿瘤，通常对患者进行常规的治疗之后能够改善患者的生存率，但是对于已经转移的患者而言其效果有限而靶向骨肉瘤相关抗原的嵌合抗原受体修饰的T细胞疗法这是当前前景较大的一种治疗方式，其中包含靶向HER-2、IL-11Rα、ROR1和GD2等骨肉瘤相关抗原的特异性CAR-T治疗，当前在一部分基础以及临床研究当中均有所研究，并且对于骨肉瘤的治疗具有良好的效果关键词：嵌合抗原受体基因修饰的T细胞;骨肉瘤;免疫治疗骨肉瘤是当前青少年或者儿童群体中较为常见的一种恶性肿瘤，其在儿童骨恶性肿瘤中最为常见，当前对于该疾病的治疗方式主要为手术治疗和化疗有相关研究指出，非专一性骨肉瘤的患者其长期的存活率为65%至70%但是对于已经转移的患者而言，其5年内的存活率不足20%其转移性的病变快速发展和对化疗的抵抗是导致患者出现死亡的主要因素，辅助化疗对于肺转移的患者作用有限这样一来就导致新的治疗骨肉瘤的研究非常重要[1]近年来一种新出的免疫治疗方式嵌合抗原受体基因修饰的T细胞免疫治疗实在一些基础以及研究中有所报导，本文将对这方面进行概述：1、CAR-T细胞免疫疗法目前对于免疫治疗骨肉瘤方面已经有了一定的治疗效果，过继性T细胞治疗属于一种有效的治疗肿瘤的免疫治疗手段。

CAR-T作为当前一种新的过继性免疫治疗手段，在最近几年来取得了快速发展，其并非依赖于通常使用肿瘤耐受的常规治疗途径，同时在血液肿瘤领域也有了一定的应用其中识别CD19靶点的CAR-T细胞能够有效的治愈B淋巴细胞白血病以及淋巴瘤CTL019也有可能在未来的1至2年中可以获得FDA批准而上市，这样将为CAR-T细胞免疫治疗的广泛推广到血液肿瘤以及实体瘤中带来希望[2]2、靶向骨肉瘤表面抗原的CAR-T细胞免疫治疗的相关研究2.1人表皮生长因子受体2(HER2)在骨肉瘤患者中大约有60%为HER2阳性，其中HER2阳性可能和骨肉瘤的不良预后具有一定关系但是HER2基因位点在这种疾病中不会扩增，可能会将HER2靶向免疫治疗进一步的扩展到HER2阳性，但是对于HER2抗体不敏感的肿瘤还有研究指出，包含第二代CD28/CD3-ζ胞内结构域的HER2-CAT-T细胞在临床前动物模型当中显示出良好的抗肿瘤活性在犬骨肉瘤实验当中也发现了构建的HER2-CAR-T能够以抗原依赖的方式识别以及杀死HER2阳性的犬骨肉瘤细胞系但是CAR-T疗法在临床当中的应用安全性问题依然需要重视HER2特异性的CAR-T细胞在临床研究当中展现出了归巢、一定限度的持久性以及抗肿瘤的效果。

在改善构建之后T细胞的扩增以及持久性，会导致CAR-T细胞在临床当中的应用具有更好的治疗效果[3]Shoba Nava和她的同事使用靶向HER2的CAR-T细胞对10名复发和难治性HER+肉瘤患者进行了治疗这些患者接受了多达5次的抢救治疗，治疗难度很大这项研究发现，在接受car-t治疗的10名患者中，有8名接受了car-t细胞以在体内增殖一名患有横纹肌肉瘤和骨髓转移的儿科患者获得了完全缓解(CR)缓解期持续12个月，疾病复发再次接受car-t治疗后，她的CR持续了17个月另一名儿科骨肉瘤患者也实现完全缓解，缓解期已达32个月[4].2.2白细胞介素11受体α链(IL-11Rα)当前IL-11Rα是一种具有前景的治疗靶点，能够进行治疗骨肉瘤相较于HER2来讲，IL-11Rα也许回事一种治疗或者抑制骨肉瘤肺转移更好的靶点因为转移性结节的生物学特征以及原发性肿瘤的生物学特征有所不同，而在骨肉瘤细胞肺转移当中HER2表达较为薄弱，IL-11Rα的高度表达靶向HER2构建特异性的CAR-T治疗骨肉瘤肺转移中HER2DE的效果并不理想除过消化道以外，IL-11Rα在正常的器官组织中不表达或者表达很低。

但是在骨肉瘤肺转移中的表达是骨肉瘤肺转移的功能靶标采用IL-11肽进行构建IL-11Rα-CAR所使用的肽联合IL-11Rα作为细胞受体识别信号，通过嵌合CD28共刺激结构域和激活T细胞的CD3-ζ激活结构域，介导细胞内信号传导，胞内双结构域CD28和CD3-ζ的第2代CAR将T细胞活化改善IL-11Rα-CAR-T细胞则在体外细胞实验中能够靶向杀死4个骨肉瘤细胞系，细胞毒性和IL-11Rα在肿瘤细胞上的表达水平具有一定关系2.3其它分子靶点研究斯坦福大学医学院的研究人员发现，c-jun的功能缺陷是T细胞耗竭的关键原因用改良的car-t细胞治疗的白血病小鼠比传统的car-t细胞存活时间更长此外，过表达c-Jun的car-t细胞还可以降低肿瘤负荷并延长骨肉瘤小鼠的寿命[5]在斯隆凯特琳癌症中心的第一阶段临床研究中[6]，研究人员使用名为lcasm28z的car-t细胞治疗恶性胸膜间皮瘤患者这种癌症是一种侵袭性很强的肺癌Lcasm28z是一种靶向间皮素的car-t细胞疗法同时在电芯上增加了一个可以关闭car-t电芯功能的安全开关在这项试验中，21名患者接受了car-t治疗38周后，13名患者外周血中仍存在car-t细胞，间皮素相关肽水平下降50%，影像学显示肿瘤缩小。

3、存在问题及展望相较于传统的过继性T细胞治疗，CAR-T细胞的scFv结构域会直接结合靶细胞表位，并且不需要MHC的抗原呈递所以，CAR-T细胞能够客服因为HLA下调而从导致的肿瘤逃逸CAR-T细胞识别抗原是更加的广谱，不需要繁琐的分离程序，并且可以在人体中长期存在，持续杀伤肿瘤细胞[7]这些均是传统的免疫疗法无法实现的，但是CAR-T细胞具有特异性杀伤力，准确靶向肿瘤细胞，怎样促使CAR-T细胞在体内的扩增，持续性的产生效应都将是临床应用CAR-T细胞免疫治疗骨肉瘤，这些都是传统的免疫疗法中无法企及的但是CAR-T细胞在实体瘤上的应用还存在有一定的挑战怎样才能够明确骨肉瘤靶点，促使CAR-T细胞具有特异性的杀伤力，准确的靶向肿瘤细胞；怎样促使CAR-T细胞在体内的扩增，并持续性的产生效应都是当前临床采用CAR-T细胞进行免疫治疗骨肉瘤无法忽视的问题免疫治疗肿瘤在近些年来也获取了长足的发展，但是目前并没有对肿瘤治疗起到决定性的作用骨肉瘤依然是当前难以治愈的恶性肿瘤之一，对于这一问题依然具有各种挑战但是有很多的基础以及临床研究表示CAR-T细胞免疫治疗对于骨肉瘤具有较好的杀伤作用，同时也坚信伴随着免疫治疗手段的进一步发展，解决好临床应用中的不足之处，CAR-T细胞免疫疗法将对于骨肉瘤的治疗作出突出贡献。

参考文献[1]王新宇.骨肉瘤T细胞相关免疫治疗的研究进展[J].德州学院学报,2021,37(04):22-27.[2]童晨曦,宋银宏.嵌合抗原受体基因修饰的T细胞免疫治疗骨肉瘤的研究进展[J].基础医学与临床,2018,38(07):1012-1015.[3]李朝旭.γδT细胞免疫治疗骨肉瘤的临床前研究[D].浙江大学,2012.[4]Hegde Meenakshi,Joseph Sujith K,Pashankar Farzana et al. Tumor response and endogenous immune reactivity after administration of HER2 CAR T cells in a child with metastatic rhabdomyosarcoma.[J] .Nat Commun, 2020, 11: 3549.[5]Ilkins RM，Cullen JW，Camozzi AB，et a1．Improved survival in primary nonmetastatic pediatric osteosarcoma of the extremity．Clin Orthop Relat Res，2005；438：128—36．[6]Adusumilli Prasad S,Cherkassky Leonid,Villena-Vargas Jonathan et al. Regional delivery of mesothe lin-targeted CAR T cell therapy generates potent and long-lasting CD4-dependent tumor immunity.[J] .Sci Transl Med, 2014, 6: 261ra151.[7]Benassi MS，Chiechi A，Ponticelli F，et a1．Growth inhibition and sensitization tocisplatin by zoledronic acid in osteosarcoma cells．Cancer Lett 2007；250(2)：194-205  -全文完-。