细胞化学成分显.ppt

细胞化学成分显示,酸性蛋白质、碱性蛋白质的显示 DNA、RNA的显示,酸性蛋白、碱性蛋白的显示,生理条件下，整个蛋白质所带的负电荷多为酸性蛋白质；带正电荷多为碱性蛋白质 经三氯醋酸处理提出核酸后、用不同PH值的固绿染液分别染色，使酸性蛋白和碱性蛋白显示出来实验准备,（1）材料 蟾蜍 （2）仪器和器材 光学显微镜 解剖器械 载玻片 染色缸 水浴箱 （3） 试剂 70%乙醇 5%三氯醋酸 0.1%碱性固绿染液 0.1%酸性固绿染液 丙酮 甲基绿-派罗宁染液,处死蟾蜍，制作三张蟾蜍血涂片，晾干 两张 70%乙醇固定6min 90℃、5%三氯醋酸、15min 冲洗 一张酸性固绿5-10min、另一张碱性固绿30-40min 冲洗晾干、观察 酸性蛋白：细胞质、核仁 碱性蛋白：细胞核内,,,,,,另一张，70%乙醇固定6min 晾干 甲基绿-派罗宁滴染20min 冲洗，吸干 丙酮分色（沾2-3次）晾干观察 一小块洋葱表皮 甲基绿-哌罗宁滴染30-40min 一滴水冲洗 盖片、观察 蟾蜍血涂片：细胞质红色、核蓝绿色、核仁紫红 洋 葱 表 皮：细胞质红色、核绿色,,,,,,,,两张 70%乙醇固定6min 90℃、5%三氯醋酸、15min 冲洗 一张酸性固绿5-10min、另一张碱性固绿30-40min 冲洗晾干、观察 另一张，70%乙醇固定6min 晾干 甲基绿-哌罗宁滴染20min 冲洗，吸干 丙酮分色（沾2-3次）晾干观察 一小块洋葱表皮 甲基绿-哌罗宁滴染30-40min 一滴水冲洗 盖片、观察 作业：分别绘制蟾蜍红细胞中酸性蛋白质分布、碱性蛋白质分布和DNA、RNA分布。

细胞组织化学法：在保持细胞结构的基础上，利用某些化学试剂与细胞内的一些物质发生化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀再通过显微镜对细胞内的化学成分进行定位定性的检测方法 三氯醋酸的作用：抽提DNA 、RNA，使蛋白质与DNA 、RNA分开 固定：将细胞杀死，使其仍然保持原来的结构和形态 甲基绿-哌罗宁染色原理：核酸是强性酸，甲基绿-哌罗宁是碱性染料，具有亲和力，这两种碱性染料有选择的特异染色，甲基绿把DNA染成绿色，哌罗宁把RNA染成红色。