（新编）胶乳凝集试.docx

胶乳凝集试验——类风湿因子的检测【实验目的】1.学习凝集反应的类型及原理2.掌握胶乳凝集试验检测血清中的类风湿因子的方法【实验原理】1.凝集反应 是一种血清学反应颗粒性抗原（完整的病原微生物或红细胞等）与相应抗体结合，在有电介质存在的条件下，经过一定时间，出现肉眼可见的凝集小块参与凝集反应的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素根据凝集反应发生的条件分为玻片法和试管法，也可分为直接凝集反应和间接凝集反应两类胶乳凝集试验也是一种间接凝集试验，它是以聚苯乙烯胶乳微粒作为惰性载体2. 胶乳凝集试验检测血清中的类风湿因子的原理： 类风湿因子主要为 IgM 类自身抗体，但也有 IgG 类、IgA 类、IgD 类和 IgE 类，是一种以变性 IgG 为靶抗原的自身抗体,可与 IgG 的 Fc 段结合胶乳凝集试验是将变性 IgG 包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，此致敏胶乳在与待测血清中的 RF 相遇时，即可发生肉眼可见的凝集胶乳凝集试剂是由纯化的人 IgG 和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳RF 胶乳超过 20U/ml 即出现肉眼可见的凝集颗粒如出现大颗粒凝集的为阳性反应，保持均匀乳液状为阴性反应。

根据阳性阴性反应即可知血清中是否有类风湿因子检测类风湿因子对类风湿性关节炎(RA)的诊断、分型和疗效观察有着重要的意义实验材料】1.待测血清2.类风湿因子(RF)测定试剂盒(胶乳凝集法)： 胶乳液成份：类风湿因子胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液；阳性对照成份：羊抗人 IgG 抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐 缓冲液；阴性对照成份：牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液3.微量加样器，反应板【实验方法】1. 标记：取四个反应板孔，标记 1 号为待测，2 号为阳性对照，3 号为阴性对照，4 号为空白对照2. 加样：取待测血清，加入 4 个孔中，每孔加 20μl1 号加50μl 胶乳液,2 号加阳性对照成份 50μl，3 号加阴性对照成份 50μl 3. 搅匀：轻轻晃动，充分混和2-3 分钟后观察结果实验结果】正常参考范围：成人＜2 0IU/ml 目测法：与阳性和阴性对照比较，凝集出现可判断样本中 RF＞20IU/ml 阳性；无凝集出现可判断样本中 RF＜2 0IU/ml 阴性注意事项】1.加试剂和阴性、阳性对照，保证滴液大小一致 2.若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。

3.试剂盒贮存 2-10 摄氏度，受热会导致试剂阳性率偏高，切勿冷冻4.阴阳性对照经检 HbsAg,HCV,HIV 为阴性，但仍须如病人样品 一样小心处理参考文献】1、吕绳凯等：上海医院检验杂志 4（2）：97.1989 2、Galiving，.P.et al；Clin.lab.Assays 4：73-95（1983）。