2005 中药色谱指纹图谱研究.pdf

仅供试读 · For Preview Purpose Only 中药色谱指纹图谱研究 主编 谢培山 编著者（以章节顺序排列） 谢培山 盛龙生 梁逸曾 孙毓庆 毕开顺 李 华 屠鹏飞 果德安 祝晨蔯 陈四保 李发美 王峥涛 孙文基 协编：李博岩 人民卫生出版社 仅供试读 · For Preview Purpose Only 序 一 色谱指纹图谱用于中药质量控制既符合中药内含多为物质群的情况， 又合乎目前诸多内含物质化学结构尚不清楚，须控制其稳定性的现实要求中药色谱指纹图谱使我们可以在控制某些峰已知对应物质（即指标成分）的同时，还可通过对整个峰群的掌握，以全面控制所含物质群 我们从 2000 年起正式推行中药指纹图谱，以控制中药质量作为一种新技术，用于传统中药，难免一时引起众多疑云，更何况从原料到工艺，涉及面又如此之广但本书作者谢培山先生等一批科技工作者，坚持在实践中探索，在实践中完善 通过近几年难能可贵的努力， 广州香雪制药公司九味复方抗病毒口服液、广州白云山药厂板蓝根冲剂等中成药产品相继成功建立起色谱指纹图谱质控标准，用于工业生产控制，相似度都在 90%以上，在评价产品的质量是否稳定和一致方面起到了传统质量控制标准所不能起到的作用。

实践证明了利用中药色谱指纹图谱技术控制中药质量是可行的，中成药质量是可以实现基本稳定可控的事实也证明色谱指纹图谱质控要求是一项牵一发而动全身，四两拨千斤，促进中药生产集约化，现代化程度全面提高的关键技术 它促使企业建立原料药材 GAP 基地，从而有力地推进了 GAP 的实施它也促进企业界对工艺操作参数的优化与精确化， 有利于推进中药制药工程和监控的应用与发展使中药业的现代化全面深化 我们在对中药指纹图谱质量稳定性的评判中，提出了相似度的概念，并总结出一整套计算方法， 这既使中药色谱指纹图谱作为质量标准有了科学公正的量化评判方法，而且也使中药色谱指纹图谱控制质量有了坚实的现实基础即承认批间图谱存在差异，尽量缩小差异，使之稳定性控制在一定范围内这个范围，对于不同品种可以实事求事地分别对待，有的可以在 96%以上，有的可以在 90%以上，我想即使是 80%，也比没有控制好，就算是 70%也是很大的进步但我希望相似度能不断提高以保证疗效安全有效谢培山先生等在实践的基础上，适时总结编著本书，从原理到操作规程，深入浅出，并附以大量的应用实例，内容详实， 这是第一本系统论述我国中药色谱指纹图谱的技术的著作。

我相信本书对于推进我国在这一领域的技术进步将起到重要作用 国家食品药品监督管理局 任德权 2004 年 5 月 仅供试读 · For Preview Purpose Only 序 二 中药现代化体现了在新的历史条件下中药研究的“与时俱进” 其主要内容之一，是试图用中医药的理论和现代科学方法手段,围绕了中药的有效性、安全性和可控性，不断地加以发展与提高，从而才能更好地服务于我国和世界人民其中，中药质量是重要关键，即：如何能更客观和科学地控制中药质量，从而才能有效实施一系列规范措施（GAP、GLP、GMP、GCP）达到不断提高中药质量的目的，应该说这是一项十分重要而又艰巨的任务 因此当我有幸先睹《中药色谱指纹图谱研究》这部科学专著后，感触颇多首先，以谢培山教授为代表的作者们，知难而进，积极探索从传统一个“点”到现在一个“面”的观点来鉴别中药的真伪质控方法，这样便能更客观地反映出中药物质基础的整体观，为阐明中药作用于人体的多靶点，多层次，多途径方式创造了条件；其次，本书作者们遵循了实践—理论—实践的原则，通过大量的应用实例，从中找出带有普遍性的规律及问题，并加以修改，充实和完善，不追求一蹴而就，这是一种实事求是的科学态度；最后，本书充分体现了科学研究的协作和团队精神，其中既有集思广益，又有各抒己见，我国科学研究在新的历史条件下，更应该大力提倡这种精神。

总之，我认为这是一部反映中药质量控制方面“与时俱进”的一部好书既有理论，又有实践，深入浅出，内容翔实，相信无论是从事中药教学、科研、生产、质控甚至外贸的专业者，都能从中得到裨益或启迪我愿意积极推荐给从事中药工作的同行们，并乐为之序 中国工程院院士 中国医学科学院药用植物研究所名誉所长 肖培根教授 2004 年 4 月 26 日 仅供试读 · For Preview Purpose Only 前 言 用色谱或光谱的整体特征鉴别中药早在 20 世纪七、八十年代就有部分学者利用紫外光谱、红外光谱、薄层色谱、液相色谱等手段进行试验研究，所以早在 20 多年前就已经有指纹图谱的雏形对于中药而言，指纹图谱不同于传统的鉴别之处是在于它不是从一个“点”（某一个指定的有效成分、活性成分、或者是与生物活性没有关联的指标成分）鉴别中药的真伪，而是从某一个“面”来鉴别真伪（一个在特定条件下的完整色谱的整体特征） ，而且带有“量化”的概念从深层意义讲，这一从“点”到“面” 、从线性到非线性、从精确到模糊的质量评价模式的转变首先是对天然带有非线性和不确定性的中药质量评价观念的改变转变观念方可在实践中有质的飞跃。

在质量控制模式的这个“转型期” ，争论乃至反对都是很自然的，但实践才是最要紧的2001 年广州的《国际色谱指纹图谱评价中药质量研讨会》之后，反馈得到的意见看来各有关方面对中药指纹图谱分析产生很大的兴趣、疑惑和关注，索要研讨会论文集者颇多，于是引发了著书的念头，因此，邀集了几位当时可以联系到的专家，征询可否集体编著一本关于指纹图谱的专著，一是集思广益，将大家已经实验研究的认识和初步实践经验奉献出来供广范围的交流和探讨， 二是抛砖引玉， 希望借此引起更广泛的关注、更深入的思考和更切合中医药实际的研究方法著书的原则一是原创性；二是可操作性，摒弃食之无味，弃之可惜的“鸡肋”式文章；三是充分尊重各位专家的见解和写作风格，不拘泥于格式上的一致，不强求统一，各抒己见，求同存异；四是图文并茂，图谱要自己实验室做出来的为主动议一出，获得各位的欣然同意，从动笔到截稿，前后花了两年多的时间，有的章节是数易其稿书稿完成后，根据后来研究的继续发展，以及本书作者以外的许多学者的更多的研究， 已经感到其中的不足， 譬如复方中成药指纹图谱研究的内容很少，固然这涉及到避免与产品的生产者直接利益冲突，不过，复方中成药指纹图谱难度较大，欠稳健的试验我们认为还不宜匆忙地收载，以免误导读者。

此外，指纹图谱的相似度计算问题，由于是化学计量学遇到了指纹图谱这一新问题，肯定要不断地实践与完善，现在远不是尘埃落定的时候，这些都只能留待下一版补充而到此书和读者见面的时候，肯定会发现更多的遗憾和不足也可以说此书只是一个尝试，是摸着石头过河开头的几步，任何的质疑和评论，都是本书所有作者所期待的 感谢在编著过程中协助编辑和参与试验的同仁，他们的名字均附在相应的章节中 编者 2004 年 5 月 仅供试读 · For Preview Purpose Only 目目 录录 上篇上篇 总论总论 第一章 中药质量控制模式的演变 第一节 第二节 第三节 第一节 第二节 第三节 第一节 中药质量控制的沿革及传统质量控制模式的局限 中药质量控制的发展过程 传统中医药对现行质量控制模式的挑战 第二章 色谱指纹图谱的缘起、属性、特点和作用 色谱指纹图谱分析是传统中药鉴别合乎逻辑的发展 色谱指纹图谱的属性与特点 色谱指纹图谱的应用 第三章 中药色谱指纹图谱方法学 高效液相色谱法 一． 实验条件与分离度 （一） 溶剂强度的影响 （二） 选择性影响 （三） 柱理论板数的影响 （四） 进样量的影响 二． 色谱柱 （一） 柱填料 （二） 键合固定相 三． 色谱峰的检测 （一） 紫外检测器 （二） 其它检测器 四． 方法与步骤 （一） 供试品制备 （二） HPLC 方法的选择与建立 五． 反相色谱法 （一） 反相色谱法—中性化合物 （二） 反相色谱法—酸、碱性及离子化合物 （三） 离子对色谱法 六． 梯度洗脱 （一） 概述 （二） 梯度洗脱原理 （三） 梯度分离方法的建立 仅供试读 · For Preview Purpose Only （四） 梯度分离的实验条件 七． 正相色谱法 （一） NPC 的保留机制 （二） NPC 的优化 八． 其它分离模式 （一） 离子交换色谱法 （二） 分子排阻色谱法 （三） 手性 HPLC 中药薄层色谱指纹图谱技术 第二节 第三节 第四节 一． 实验器材的规范化 二． 操作规程的规范化 三． 供试品溶液的预处理 四． 展开溶剂的选择 五． 溶剂蒸气对色谱行为的影响 六． 环境因素的影响 中药气相色谱指纹图谱技术 一． 气相色谱法简介 二． 填充柱气相色谱 （一） 气－液填充柱 （二） 气－固填充柱 三． 毛细管柱气相色谱 四． 检测器 五． 分离条件的选择 （一） 分离度的影响因素 （二） 实验条件的选择 六． 中药色谱指纹图谱定性与半定量 中药毛细管电泳指纹图谱技术 一． 概述 （一） 基本概念 （二） 电泳法的分类 （三） 毛细管电泳的流路 （四） 毛细管电泳法的特点 （五） 毛细管电泳法的应用 二． 毛细管区带电泳法 仅供试读 · For Preview Purpose Only （一） 基本原理 （二） 实验方法 三． 胶束电动毛细管色谱 （一） 分离机制 （二） 表面活性剂 （三） 应用实例 四． 环糊精电动毛细管色谱 （一） 分离机制 （二） 应用实例 五． 毛细管电泳法的进样技术 （一） 电动进样 （二） 气动进样 （三） 进样的注意事项 六． 毛细管电泳法的检测器 第四章 色谱指纹图谱的操作规程 第一节 中药色谱指纹图谱实验研究技术规范 一． 中药指纹图谱的获取 （一） 供试品收集 （二） 供试品溶液的制备 （三） 对照品 （四） 指纹图谱获取实验 （五） 中药指纹图谱的建立和辨识 二． 中药指纹图谱方法验征 三． 中药指纹图谱的校验和复核 第二节 质量标准中指纹图谱的标准书写格式 一． 中药制剂（相关产品）的指纹图谱书写格式（推荐） 二． 指纹图谱复核及检验报告书有关内容的书写格式 第三节 液相色谱指纹图谱试验操作规程 一． 试品溶液的制备 二． 液相色谱实验条件 第四节 薄层色谱指纹图谱试验操作规程 一 仪器与材料 二 实验 （一） 操作方法 仅供试读 · For Preview Purpose Only （二） 系统适用性试验 （三） 测定法 （四） 检视 第五节 气相色谱指纹图谱试验操作规程 一 供试品溶液的制备 二 参照物 三 气相色谱试验条件 四 系统适用性试验 五 气相色谱指纹图谱的建立和辨认 第六节 毛细管电泳色谱指纹图谱试验操作规程 一 供试品溶液的制备 二 参照物 三 实验 四 系统适用性实验 五 毛细管电泳指纹图谱的建立和辨认 第五章 色谱指纹图谱与化学信息学 中药色谱指纹图谱的信息意义 色谱的分析特点及其信号分析原理 第一节 第二节 第三节 第四节 中药色谱指纹图谱的标准建立与矢量相似性度量原理 一． 标量与矢量及其在化学量测中的含义 二． 矢量之间的相似性度量 （一） 相关系数 （二） 相合系数（矢量之间的夹角余弦） （三） 一类色谱指纹图谱的对照模式 三． 中药色谱指纹图谱相似性分析的部分计算机仿真实验结果 中药色谱指纹图谱的数据预处理方法 一． 中药色谱指纹图谱峰面积计算与基线校准 二． 中药色谱指纹图谱的保留时间漂移的校准方法 （一） 光谱相关色谱 （二） 色谱指纹图谱的仪器系统误差的局部最小二乘校正方法 三． 中药色谱指纹图谱的平滑处理方法 （一） 窗口移动平均法 （二） 窗口移动多项式最小二乘平滑法 四． 中药色谱指纹图谱的数据压缩方法 仅供试读 · For Preview Purpose Only （一） 小波多分辨变换法与数据压缩 （二） 。