检测生物组织中的糖类、蛋白质、脂肪.ppt

检测生物生物组织中的糖中的糖类、脂肪和蛋白、脂肪和蛋白质 1.实验原理 斐林斐林试剂苏丹丹ⅢⅢ橘黄色橘黄色红色色砖红色沉淀色沉淀紫色紫色苏丹丹ⅣⅣ 双双缩脲试剂鉴定物定物质试剂实验现象象还原性糖原性糖脂肪脂肪蛋白蛋白质淀粉淀粉 碘液碘液￿ ￿ 蓝色色￿ ￿生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定l实验原理实验原理选材：含糖量较高的选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰)，苹果、梨最好，苹果、梨最好 l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液：制备组织样液：制浆：去皮、切块、研磨，制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（２（２mL））显色反应显色反应 ２mL组织样液刚配制的斐林试剂２mL现象：现象： (用前混匀用前混匀)50～～65.C水浴水浴加热加热2min葡萄糖，果糖，葡萄糖，果糖，麦芽糖；麦芽糖；蔗糖为非还原蔗糖为非还原性糖性糖还原糖的原糖的检测和和观察：察：还还原糖的原糖的原糖的原糖的检测结检测结果果果果2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡３－４取材：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片），去皮，将子叶削成薄片 制片：制片：①①选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央②②在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹ⅢⅢ(或苏丹或苏丹ⅣⅣ) 染液染液2 －－ 3滴，滴，染色染色２－３２－３min③③滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液1—2滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的苏丹多余的苏丹ⅢⅢ )④④吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片临时装片显微观察：显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：现象：有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的脂肪的检测结果果3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液：组织样液：黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）［黄豆浸泡［黄豆浸泡 →去皮去皮→切片切片→研磨研磨→过滤过滤→滤液］滤液］ 显显色色反反应应２mL组织样液双缩脲试剂Ａ　２mL现象：现象：无色无色双缩脲试剂Ｂ３－４滴紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白蛋白质的的检测结果果4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆取材：马铃薯匀浆检测：检测：２mL组织样液碘液碘液2滴滴现象：现象： 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能加3～～4滴而不能滴而不能过量？过量？ 过量的双量的双缩脲试剂B会与会与试剂A反反应，使溶液呈，使溶液呈蓝色，色，而掩盖生成的紫色。

而掩盖生成的紫色3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太太长，，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在液就沉淀在试管底部而无管底部而无法参与反法参与反应l深化深化4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下的的Cu2+NaOH浓度为浓度为CuS04浓度为浓度为NaOH浓度为浓度为CuS04浓度为浓度为先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，，而后而后立即使用立即使用先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，摇匀滴，摇匀不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要知识结构1、、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉．苹果转熟时单糖聚合成淀粉 Cl例题例题２、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世２、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国，引起世人注目。

鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯人注目鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是定不需要用到的化学试剂是( ) A.斐林试剂斐林试剂 B. 红墨水红墨水　　C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹ⅣⅣ染液染液 Bl例题例题3(2005.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是物的鉴定实验中，以下操作错误的是( )A、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红、可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀色沉淀B、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜、只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A 。