细胞膜渗透性反应.pdf

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告 题目：细胞膜渗透性题目：细胞膜渗透性反应反应 姓名：余振洋姓名：余振洋 学号：学号：200900140156 系年级：系年级：09 级生科级生科 3 班班 时间：时间：2011/3/17 一、【实验目的】一、【实验目的】 1、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度 二、【实验材料】二、【实验材料】 1、器材 显微镜，离心机，离心管，试管，滴管，载玻片，盖玻片 2、试剂 0.85％NaCl 溶液、0.0085％NaCl 溶液、0.8mol/L 甲醇、0.8mol/L 丙三醇、6％葡萄 糖溶液、2％Triton X-100 三、【实验原理】三、【实验原理】 将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶 质可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促 使水分进入细胞， 引起溶血 由于溶质透入速度互不相同， 因此溶血时间也不同 四、【操作步骤】四、【操作步骤】 1、取鸡血 2-3ml，加 0.85％NaCl 溶液 4ml，在 1000r/min 条件下离心 5 分钟，重 复 2~3 次（RBC 压积量应不少于 0.3ml，否则应补加鸡血） 2、将上述离心的红细胞按沉淀量配成 50％浓度。

总体积量应不少于 0.6ml） 3、每组取 6 支试管，分别加入如下溶液各 3ml ○10.85％NaCl 溶液 ○20.0085％NaCl 溶液 ○30.32mol/L 甲醇 ○40.32mol/L 丙三醇 ○56％葡萄糖溶液 ○61.5％Triton X-100 4、向上述 6 支试管中分别加入 50％红细胞悬液 1 滴，轻轻混匀，观察各试管是 否有溶血现象发生（观察时间 1 小时）记录溶血时间并于显微镜下观察各溶液 中细胞 五、【试验结果五、【试验结果及绘图及绘图】】 结果：结果： 表表 1 不同低渗溶液下的溶血现象不同低渗溶液下的溶血现象 试管编号试管编号 是否溶血是否溶血 时间时间 结果分析结果分析 ○1 0.85％NaCl 溶液 +1 滴红细胞悬液 否否 该溶液浓度与鸡红细 胞内细胞液浓度相 当，为等渗溶液，不 发生溶血 ○2 0.0085％NaCl 溶液+1 滴红细胞悬液 是是 5min 该浓度溶液为低渗溶 液，使细胞吸水胀裂 ○3 0.32mol/L 甲醇 +1 滴红细胞悬液 是是 46s 小分子、亲脂性的非 极性分子甲醇为低渗 溶液，容易溶解于脂 双层，并迅速透过， 提高红细胞的渗透 压，促使水分进入细 胞，引起溶血 ○4 0.32mol/L 丙三醇 +1 滴红细胞悬液 是是 31min 不带电荷、极性分子 的丙三醇溶液为低渗 溶液，但分子体积不 够小，虽然能透过脂 双层引起溶血，但时 间较长 ○5 6％葡萄糖溶液 +1 滴红细胞悬液 不完全溶血不完全溶血 葡萄糖虽然不带电 荷，为极性分子，但 分子体积较大，可以 跨膜扩散运输，但比 较困难 ○6 1.5％Triton X-100 +1 滴红细胞悬液 是是 50s 该试剂是一种表面活 性剂，可抽取膜质蛋 白质，使细胞通透性 增强，快速溶血，并 使溶液变浑浊 绘图：绘图： 血细胞液和各试剂混合后外观变化血细胞液和各试剂混合后外观变化（从左到右依（从左到右依次为次为 1-6 号试管）号试管） 0.85％％NaCl 溶液溶液内内的的血血细胞细胞 （（10x10）） 0.0085％％NaCl 溶液溶液内血细胞内血细胞 （（10x40）） 0.32mol/L 甲醇甲醇溶液内溶液内血细胞 （血细胞 （10x40）） 0.32mol/L 丙三醇丙三醇溶液内血细溶液内血细胞胞 （（10x40）） ○○1 ○○2 ○○3 ○○4 ○○5 ○○6 6％葡萄糖溶液％葡萄糖溶液内血细胞（内血细胞（10x40）） 由于技术原因，由于技术原因，1.5％％Triton X-100 溶液内的血细胞无法观察到溶液内的血细胞无法观察到 六、【结果分析与讨论】六、【结果分析与讨论】 1、、 从从 1、、 2 两个试管， 即两个试管， 即 0.85％％NaCl 溶液和溶液和 0.0085％％NaCl 溶液的实验结果可得，溶液的实验结果可得， 血细胞在低渗溶液中容易血细胞在低渗溶液中容易发生溶血。

同时， 因为两组实验所得时间差距极大，发生溶血 同时， 因为两组实验所得时间差距极大， 也可得出：细胞膜内外溶液浓度差也可得出：细胞膜内外溶液浓度差越大，溶血越容易发生越大，溶血越容易发生 2、、 在在 3 号试管，即号试管，即 0.32mol/L 甲醇溶液中，溶血时间极快，但在显微镜下并未甲醇溶液中，溶血时间极快，但在显微镜下并未 观察到明显细胞体积变小且边缘出现褶皱的现象，经分析得：观察到明显细胞体积变小且边缘出现褶皱的现象，经分析得：红细胞在甲醇红细胞在甲醇 溶液中溶血速溶液中溶血速度极快，必须在滴血立刻制片，否则血细胞便会破碎，无法观度极快，必须在滴血立刻制片，否则血细胞便会破碎，无法观 察同时也可以得出：亲脂性的、小分子的非极性分子极易穿过细胞膜同时也可以得出：亲脂性的、小分子的非极性分子极易穿过细胞膜 3、、 在在 5 号试管，即号试管，即 6mol/L 葡萄糖葡萄糖溶液中，几乎不发生溶血，得出：分子体积溶液中，几乎不发生溶血，得出：分子体积 大的极性分子大的极性分子不易进入细胞不易进入细胞 4、、 在在 6 号试管，即号试管，即 Trition X-100 溶液，为一种表面活性剂，可抽取膜质蛋白质，溶液，为一种表面活性剂，可抽取膜质蛋白质， 使细胞通透性增强，快速溶血，产生絮状沉淀，使溶液变浑浊。

该反应也极使细胞通透性增强，快速溶血，产生絮状沉淀，使溶液变浑浊该反应也极 快发生，必须在滴血立刻制片，否则血细胞便会破碎，无法观察快发生，必须在滴血立刻制片，否则血细胞便会破碎，无法观察 附： 溶血结果的判断 （1） 不溶血：液体分 2 层，上层浅黄色透明，下层红色不透明，镜检红细胞 完好 （2） 不完全溶血：溶液混浊，上层变红色，镜检有部分红细胞破裂 （3） 完全溶血：液体变红而且透明，镜检发现细胞全成碎片。