[精品][经典]松花粉药理作用及临床应用研究概况.doc

［经典］松花粉药理作用及临床应用研究概况松花粉药理作用及临床应用研究概况基金项目：广东省河源市科技局2011年科技立项课题（项目编号：2011024）松花粉（Pine pollen）,中药名松花、松黄，是松属植物的单性 花，泛指马尾松、油松、赤松、黑松和云南松等松属植物的雄性配子体，是我国传统食药兼用的花粉品种［l］o最早记载始见于2400年 前的汉《神农本草》，将“松黄”列为上品［2］o唐《新修本草》、宋《本草衍义》、明《本草纲目》、清 《本草从新》等中均有记载，归纳为「性味甘平，无毒功 能主治：润心肺，益气 除风止血，治心腹寒热邪气，治痢，利小便， 消瘀血，治产后壮热、头痛、郑索、口干唇焦、多烦躁渴、昏闷不爽； 外用善治诸痘疮伤损并湿烂不痂等；久服轻身益力气，延年［3］而 松花饼、松花糕、松花酒等一些传统美食，迄今仍以松花粉为主耍原 料松花粉是祖国医学古籍中收载的仅有的两种花粉之一，中华人民 共和国1985年版药典收录松花粉为传统药物，1997年卫生部确认松 花粉为新资源品种，列为普通食品管理［4］1松花粉的有效成分现代研究发现，松花粉成分丰富，含有多种蛋白质、游离氨基酸 （含18种必需氨基酸）、视黄醇、单糖、多糖、维生素、磷脂、葡萄糖氧化酶、核酸、叶酸、脂肪酸、黄酮、生物活性酶、笛醇、微量元素等成分，总量达200多种［5-8］o其黄酗类化合物成分，主要为黄 酮和黄酮醇类，其次是二氢黄酮醇类。

另外还有少量黄烷醇类的花青 素［9］以红外光谱、扫描电镜和X射线能谱仪分析发现其含Mg, Se, Si, Sr, P, S, Cl, K, Ca, Mn, Fe 共 11 种无机元素，其中 K 元索含量最高此外，破壁马尾松花粉的元素能谱强度显著高丁•天然 马尾松［10］近期研究在马尾松花粉中除B 2谷笛醇外，还首次发现了单硬脂酸生油酯、1-正十六烷酸甘油酯、对轻基苯甲醛、3-轻基 -4-甲氧基苯甲酸、3, 30, 5, 50, 7-五梵基二氢黄酮醇、双氢山奈素、 对拜基苯甲酸、3, 4-二拜基苯甲酸、山奈酚、丁二酸等10种化合物 ［11］在苏格兰松的花粉中还发现睾酮、表睾酮和雄笛烯二酮［12］2松花粉的功效2.1免疫调节及疫苗佐剂作用 喂服破壁松花粉可提高小鼠血清 溶血素抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、小鼠抗体生成和小鼠NK 细胞活性及ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化［13］,使小鼠免疫器官 的重量增加及网状内皮系统的吞噬能力增强［14］, 一个以油松花粉 进行的研究结果显示松花粉的种类有可能形成这一作用的细致差异 ［15］此外，实验还观察到，破壁松花粉可减轻二硝基氟苯诱导小 鼠迟发型变态反应的影响［13］。

在弗氏完全佐剂（含分枝杆菌的水油 乳佐剂）和牛II型胶原纤维诱发的小鼠关节炎中，松花粉提取物可使 炎性细胞因了的生成显著减少，表现出明显的抗炎症作用，这一作用 与松花粉的免疫调节机制有关［12］松花粉的免疫调节作用与剂呈 相关而对破壁与不破壁松花粉的药理活性是否相同，尚有争议但 在对小鼠血清溶血素生成及对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响上, 未发现破壁与不破壁松花粉对免疫功能作用的明显差别，不破壁松犹 粉可直接应用［16］从松花粉中提取的松花粉多糖，能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠 的抗体水平、血液淋巴细胞比率、脾脏淋巴细胞转化率以及小肠IgA 含量，200 mg/kg）剂量的效果即非常显著，400 mg/kg）剂量能使环磷 酰胺（CTX）诱导的免疫抑制完全恢复到正常水平［17］破壁松花粉作为饲料添加剂，能够增强雏鸡的体液免疫和细胞免 疫水平，而达到抵抗新城疫病毒的目的破壁松花粉作为新城疫疫苗 佐剂接种易感兔，与普通组织灭活苗接种后的情况比较：组织灭活苗 免疫后第10天效价为2. 75 log2, 20 d抗体水平达到6.25 log2, 30 d为5. 25 log2,已开始有所下降；而松花粉佐剂疫苗免疫后作用 快，第10天效价为3. 05 log2, 20 d抗体水平已达7 log2, 30 d抗 体水平高达6. 75 log2o由此可见，松花粉佐剂疫苗吸收快、产生效 价高且作用持久，明显优于普通组织灭活苗［18］。

2.2调节血脂血糖及铜锌代谢研究观察到喂服添加3.5%松花粉 饲料后不仅非常显著地增加了家猪粪便中甘油三酯、胆固醇及脂肪酸 的排泄量，同时也促进了胆酸的排泄在大鼠的实验中还发现饲料中 添加松花粉后可以使大鼠体重得到生理性的控制［19］在弗氏完全 佐剂和牛II型胶原纤维诱发的小鼠关节炎中，100 mg/kg)剂量的松花 粉提取物治疗显示出明显的降低低密度脂蛋白-胆固醇、蛋白拨基 (protein carbonyl) > 后期糖化终产物(advanced glycation endproducts)、脱氢丙二酰(malondialdehyde)和升高高密度脂蛋白 -胆固醇的效果［12］四氧U密睫致糖尿病的小鼠灌服30 d破壁松花 粉后观测到，较高剂量(1・5 g/kg)的破壁松花粉能明显降低四氧卩密睫 致糖尿病小鼠的2h吋相血糖含量及血糖曲线下面积，提示高剂量破 壁松花粉具有增强四氧卩密噪致糖尿病小鼠的糖耐量作用,破壁松花粉 有降低血糖的功能这与历代本草记载松花粉可治疗口干唇焦、多烦 躁渴等消渴症状相吻合［20］此外，在止常生长雄性鼠、缺锌幼鼠和前列腺增生大鼠中，还发 现松花粉对铜、锌代谢及其分布有调节作用［14, 21-24］。

2.3抑制前列腺增生有研究通过对前列腺指数和病理学观测以 及对血清生化学、抗氧化指标、铜锌含量、激素水平等的检测发现， 松花粉能够明显改善内酸睾酮所致大鼠前列腺的病理损伤，对实验 性前列腺增生具有明显抑制作用，机制可能是松花粉不仅能够通过降 低雌激素和雄激素，调节微量元素的代谢和过氧化物歧化酶(SOD)活 性而抑制前列腺增生，而但还能通过非激素途径在细胞水平发挥选择 性的抑制作用［14, 23-24］o2. 4抗衰老、抗氧化、抗疲劳、抗炎症抗衰老一玄是人类渴望 攻克的难题衰老研究成为西方科学研究的热点始于上世纪末，迄今 己形成了关于衰老机制的各种假说，如端粒假说、DNA氧化损伤假说、 口由基假说等，为抗衰老的相关研究提供了理论依据和研究方法［25］鲍善芬等用四个体外摸拟人类疾病过程如缺血再灌注、体内炎性 反应等中的&化反应系统对马尾松花粉的抗炎和抗氧化性能进行评 价结果发现，松花粉对这些反应系统所产生的过氧化氢、超氧口由 基、為自由基和次氯酸等活性氧系具有较好的清除作用，以浓度依赖 关系抑制反应的发生并发挥抗氧化作用，对涉及炎症反应的髓过氧化 学物酶(MPO)活性较好的抑制作用［25］。

在后期的一个研究中，他 们用铜诱导的LDL氧化反应模型和Rose Bengal反应模型分别对松花 粉和松针提取物在亲脂性体外模型中的抗氧化能力及其机制进行研 究结果表明，松花粉乙醇提取液具有较好的自由基链式反应阻断剂 的作用,能有效地推迟人血浆中低密度脂蛋白(LDL)氧化生成共轨二 烯松针乙醇提取液对LDL的保护作用优于松花粉在Rose Bengal 系统中，松花粉以清除自由基和螯合铜的两种机制抑制脂质过氧化反 应的发生,而松针主要作为自由基清除剂发挥抗氧化作用即松花粉 和松针在两个亲脂性体外模型中均发挥很好的抗氧化能力，而抗氧化 机制不尽相同［26］儿个研究以D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型， 采用生物化学方法检测了相关指标结果显示，D-半乳糖所致亚急性 衰老大鼠模型组超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase, SOD)活力、 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-PX)活力和总抗 氧化能力(T-AOC)均明显下降，丙二醛(Maleic Dialdehyde, MDA)含 量明显上升经松花粉给药后，衰老小鼠脑组织、血清MDA含量及 脑、肝组织脂褐质(Lf)含量明显降低，SOD、过氧化氢酶(CAT)、 GSII-PX活性及T-AOC均有显著提高；松花粉中、低剂量给药可明显 增加衰老大鼠体重，并改善大鼠毛色及活动；松花粉还可提高D-半 乳糖所致亚急性衰老大鼠精了的数量、活动度和存活率。

上述作用， 松花粉的效果好于维生素E故认为松花粉可显著提高亚急性衰老大 鼠抗氧自由基的能力，提高精了的数量、活动度和存活率，具有延缓 衰老的作用［27-30］o此外，松花粉也可能通过明显改善D-半乳糖 衰老模型小鼠T细胞亚群的变化，显著增高网状内皮系统的吞噬指 数和吞噬活性，增强衰老鼠的免疫功能而延长老龄鼠的牛存吋间［28］ 钟馨等以在国际上普遍认可的口然衰老小鼠和口 然衰老人胚肺二倍体细胞作为动物和细胞衰老的研究模型，从器官、 组织、细胞、分了和基因等多个水平着手，选取形态学、自由基、端 粒酶、线粒体为衰老研究指标，系统地研究了松花粉的抗衰老效果及 其分子机制已完成的实验，证实松花粉具有促进细胞增殖、抑制自 由基表达、提高端粒酶活性和降低线粒体mtDNr977突变率等作用， 从抑制衰老诱发因素的负效应、促进细胞增殖等方面验证了松花粉的 抗衰老效果后期又从松花粉对两条衰老相关的内在基因调控途径, 即p53-p21-pRb和pl6-pRb途径中p 16及p21基因表达的影响进行研 究，发现:①松花粉具有促DNA增殖，改善G1期阻滞(Glcycleaxrest) 的作用②在年轻细胞中P16INK4A与P21CIP-1的mRNA均维持较低 的表达。

而在衰老细胞中，P16INK4FRNA表达量出现显著上升，并 在松花粉处理后出现显著的下降，•且下降程度与剂量具有相关性 P21cIP-lmRNA表达量在衰老细胞中也出现显著上升，但松花粉处理 组与衰老模型组中其表达无显著性差异说明松花粉对P21cIP-lmRNA 表达无影响，但显著抑制了 pl6INK4mRNA的表达，并通过 P16-cyclinD-cDK4/6-RB通路延缓了细胞衰老的启动和衰老进程，这 可能是松花粉抗细胞复制性衰老的主要分子［31］相关研究显示，松花粉能显著延长小鼠负重游泳时间，降低运动 后小鼠血乳酸含量和血清尿素氮含量，且运动后肝糖原含量高于对照 组，证实松花粉具有抗疲劳作用［32］松花粉及其提取物还有明显的抗炎症作用和减低痛敏感性，该作 用与松花粉及其提取物抵制前炎性介质的产生有关，尤其是那些与脂 氧化酶和环氧合酶通路和关者［12, 33-34］2.5抗肿瘤Lipovova等用从黑松花粉提取的核酸酶与牛精液核 糖核酸酶比较研究体内外抗肿瘤活性体外实验结果显示，黑松花粉Jiff核酸酶在体外的抗肿瘤作用与牛精液核糖核酸酶和比下是微不足道 的然而，体内实验的结果则大为相异，在这种核酸酶和动物核糖核 酸酶及脱氧核糖核酸酶1治疗的小鼠中，观察到人黑素瘤的体积显著 缩小。

然而，在使用10次更高剂量后，用松花粉核酸酶给予荷瘤裸 鼠，其肿瘤体积缩小46%,而用牛精液核糖核酸酶治疗的肿瘤工长仅 稍有缩小而且，与牛精液核糖核酸酶相比，黑松花粉核酸酶的免疫 源性明显地更弱，抗黑松核酸酶抗体在体内不引起生物学效应表明 黑松核酸酶与动物牛精液核糖核酸酶相比，在体内对裸鼠生长中的人 黑素瘤有更高抗肿瘤活性［35］另一研究以马尾松花粉多糖和硫酸酯化的马尾松花粉多糖处理 人肝癌细胞株IIepG2o经马尾松花粉多糖硫酸酯处理后，IIepG2细胞的增殖受到抑制，细胞形态趋于正常与对照组相比，马尾松花粉多 糖硫酸酯组G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少，G2/M细胞数减少;Jiff［Ca2+］ I降低；甲胎蛋白表达降低，白蛋白分泌量上升，丫-谷氨 酰转肽酶与碱性磷酸酶活力降低，胎盘型碱性磷酸酶的比例降低而 马尾松花粉多糖处理组细。