EGFR基因靶向治疗.ppt

EGFR基因靶向治疗主要内容一、EGFR蛋白的正常结构与功能二、EGFR在肿瘤中的变异三、针对EGFR进行肿瘤靶向治疗的的药物四、EGFR靶向治疗当中产生的耐药问题五、检测EGFR基因变异的临床诊断一、EGFR蛋白的正常结构与功能•表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor ），简称为EGFR、ErbB-1或HER1是ErbB受体家族家族的成员之一•erbB家族为受体酪氨酸激酶，是一类具有跨膜结构的酶蛋白，包括HER1/EGFR/erbB-1、HER2/erbB-2、HER3/erbB-3、HER4/erbB-4四个成员•由于EGFR的酪氨酸激酶活性，可以调节细胞的生长、增殖，分化，迁移，并且与肿瘤的发生有关•EGFR是一种跨膜蛋白，由三个部分组成：•①细胞外结构域：是配体的结合位点；•②单次跨膜的疏水α螺旋区；•③细胞质部分：有自磷酸化位点、和酪氨酸蛋白激酶(RTK)活性结构域•受体激活 ：•当EGF同受体细胞外结构域结合位点结合后，受体被激活，导致两个EGF受体单体形成二聚体，使酪氨酸自我磷酸化，激活细胞质部分的酪氨酸激酶•信号通路激活：•二聚体自磷酸化之后酪氨酸激酶活性增强，下游信号通路的蛋白质可与EGFR上磷酸化的酪氨酸位点结合，分别引起细胞内不同的信号应答，从而引起一系列生物效应，调节细胞的生长、增殖，分化，迁移，与肿瘤的发生。

•主要激活的信号通路有：JAK/STAT、PI3K/AKT、RAS信号通路•EGFR失活：•膜表面没有与配体结合的EGFR单体，可被内吞至细胞内部，被内吞的EGFR一部分被细胞降解，一部分重新回到细胞膜上细胞膜上EGFR的半衰期为30分钟二、EGFR在肿瘤中的变异•EGFR在肿瘤细胞中的变异：•数量变异•结构变异•数量变异：•正常情况下，一个细胞上会有4*10 ^4~1*10 ^5个EGFR分子•肿瘤细胞中，可观察到每个细胞有2*10 ^6个EGFR分子•在许多肿瘤细胞中，都有EGFR异常高表达现象•当细胞膜上有高浓度的EGFR单体时，EFGR分子可在没有配体的情况下自行聚合形成二聚体，并且二聚体可自我激活，激活下游的信号通路•基因变异：•EFGR基因位于第七号染色体的短臂上•EGFR的酪氨酸激酶活性位点，主要是位于第18号外显子到第24号外显子之间•此区域的突变会影响EGFR的酪氨酸激酶活性•基因变异：•45%是第19号外显子缺失变异；•40%是发生在第21号外显子上的L858R变异（第858号氨基酸残基由亮氨酸变成了精氨酸）；•变异的EGFR不需要与配体结合就拥有了持续的酪氨酸酶活性。

三、针对EGFR进行肿瘤靶向治疗的的药物•特异性针对肿瘤细胞进行靶向治疗，可以从分子水平逆转肿瘤细胞的恶性生物学行为靶向治疗具有靶向性强、特异性高和毒副作用低等特点，并能增强放、化疗疗效，代表着肿瘤治疗领域的最新发展方向•单克隆抗体(Mab)：西妥昔单抗、帕尼单抗、尼妥珠单抗西妥昔单抗、帕尼单抗、尼妥珠单抗•酪氨酸激酶抑制剂（TKI）：吉非替尼、厄洛替尼、埃克替尼；阿法替尼；塔格瑞斯•副作用：皮疹、瘙痒、腹泻、肠道溃疡•单克隆抗体：•抗体可特异性地识别EFGR，阻断了配体与EGFR的结合，从而阻断了配体对EGFR的激活作用，抑制了EGFR的酪氨酸激酶活性•同时还可促进EGFR的内吞机制，减少膜表面的EGFR数量•对野生型、变异型EGFR均有效•西妥昔单抗（Cetuximab，商品名爱必妥、尔必得舒、艾比特思）•是第一个FDA批准抗EGFR的单抗药•由德国默克里昂公司出品•是一种人/鼠嵌合单克隆抗体•可用于治疗转移型结肠直肠癌和头颈部肿瘤•帕尼单抗（Panitumumab，商品名Vectibix）•是第一个完全人源化单克隆抗体•与EGFR具有高亲和性，用于治疗化疗失败后转移性结直肠癌。

•尼妥珠单抗（Nimotuzomab，商品名泰欣生）•是我国第一个用于治疗恶性肿瘤的功能性单抗药物，用于与放疗联合治疗 EGFR)表达阳性的III/IV期鼻咽癌•酪氨酸激酶抑制剂TKI：•TKI与ATP竞争EGFR的酪氨酸酶活性中心，阻止酪氨酸激酶活性的激活，从而抑制EGFR对下游信号通路的激活作用•易瑞沙（Iressa，通用名Gefitinib）•EGFR的可逆抑制剂，用于治疗晚期非小细胞肺癌，尤其化疗失败后的非小细胞肺腺癌•阿斯利康公司易瑞沙/印度易瑞沙•第一代TKI类药物对19号外显子缺失变异和L858R变异（第858号氨基酸残基由亮氨酸变成了精氨酸）的EGFR疗效更为显著•塔格瑞斯 （ Tagrisso ） •由FDA2015年11月批准上市的第三代TKI类靶向药物•由阿斯利康研发•对于有T790M耐药突变的EGFR有很强的抑制作用四、EGFR靶向治疗当中产生的耐药问题•第一代TKI类药物用药4-6个月后会出现耐药突变耐药并非单一因素且机制之间也存在交叉，错综复杂：•1、EGFR基因突变或靶点缺失：T790M•2、绕开 EGFR通路的其他 TK受体的活化•3、胞内 EGFR下游信号蛋白非依赖性或组成性活•化：Kras、PI3K、Src•4、肿瘤诱导的非依赖于 EGFR的血管生成： VEGF的过度表达•5、膜表面的EGFR内吞降解过程异常•T790M变异：• T790M突变是导致TKI耐药主要因素。

•EGFR 基因第790号氨基酸残基由苏氨酸变成体积庞大的甲硫氨酸，造成了位阻效应，导致TKI类药物无法靠近酪氨酸激酶活性中心；•T790M突变还增加了EGFR-L858R突变体与ATP的亲和力，而产生对TKI的获得性耐药•与T790M相似的耐药突变还有D761Y、L747S和T854A•争议： T790M是“获得性”还是“选择性”？•其他TK受体的活化：• 细胞内存在许多转导增殖刺激的TK受体，它们都参与调节细胞的许多生理功能，并且许多调节作用存在相互交叉细胞从环境中得到的不是单一的信号，许多信号通路是公用的因此，EGFR被阻断后，其他受体能够通过替代EGFR的主要功能来维持细胞的存活•肝细胞生长因子受体MET扩增，酪氨酸激酶活性增强，也可激活PI3K/AKT、RAS等信号通路肝细胞生长因子 HGF也能刺激EGFR的转录活化MET抑制剂联合使用•Kras突变：•在ras基因中，K-Ras对人类癌症影响最大，在生理情况下，EGFR信号通路活化后， KRAS蛋白短暂激活，其后迅速失活，KRAS激活/失活效应是受控的而KRAS基因突变时，可以导致EGRF信号通路持续激活，加速肿瘤细胞增殖。

20%非小细胞肺癌、30-35%大肠癌患者中存在KRAS基因突变K-ras突变型编码异常的蛋白，刺激促进恶性肿瘤细胞的生长和扩散；并且不受上游EGFR的信号影响，所以对抗 EGFR治疗效果差• VEGF的过度表达：•EGFR自分泌通路能够部分调控多种血管生成生长因子，其中包括 VEGF与 ｂＦＧＦ•EGFR抑制剂的获得性耐药可能是由于 VEGF的表达增强所致五、检测EGFR基因变异的临床诊断•近年来表皮生长因子受体（EGFR）在肺癌致瘤中的作用以及针对EGFR的靶向治疗备受关注，病理学家在如何筛选合理的EGFR靶向治疗对象及判定检测结果中起着关键的作用•1、通过基因检测筛选出对药物敏感的患者，为患者提供个体化用药的科学依据；•2、指导EGFR-TKI类药物的合理使用，帮助医生为患者选择最优的治疗方案；•3、避免无治疗或治疗不当造成病人病情延误，降低治疗风险；•4、减轻患者的经济和精神负担，节省医疗资源•目前临床实践中主要针对EGFR络氨酸激酶编码区18、19、20、21外显子的突变位点开展检测测方法：•1、 TKI药物对18、19或21外显子发生敏感突变的EGFR更为有效，而野生型则无法获益。

女性、从不吸烟，亚裔被认为是与非小细胞肺癌EGFR基因敏感突变最重要因素•2、T790M突变获得耐药性•3、KRAS突变：KRAS抑制剂靶向治疗•谢谢。