染量或5织细胞感染量(ID5或课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,50%,感染量或,50%,组织细胞感染量,(,ID50,或,TCID50,),测定法,用半数感染量可估计病毒感染性的强弱及含量，但不能准确测定感染性病毒颗粒的数量方法是测定病毒能使,50%,的组织培养细胞发生感染的最小量,一般是将病毒悬液作10倍的系列稀释，分别接种细胞，经一定时间后观察,CPE,、,血细胞吸附等指标，以最高稀释度能感染,50%,细胞的量为终点最后用统计方法计算出,50%,感染量(,ID,50,),或,50%,组织细胞感染量(,TCID,50,或,TCD,50,),*50%感染量或50%组织细胞感染量(ID50或,二 病毒的增殖,（一）病毒的增殖方式,病毒的增殖方式是复制因病毒不具有能独立进行代谢的酶系统，因此在细胞外是处于无活性或静止状态只有进入活的易感宿主细胞，由宿主细胞供给合成病毒核酸与蛋白质的原料，如低分子量前体成分、能量、必要的酶和细胞器等，病毒才能增殖,二 病毒的增殖,（,二）病毒复制周期,1 吸附与穿入,病毒的增殖首先吸附在宿主细胞后方可穿入,（1）吸附有两种,：病毒与细胞的静电结合 病毒和细胞在生理,pH,条件下均带阴电荷，因而可互相排斥，除随机的碰撞外，一般较少相互吸引。

如有阳离子存在，则可促进结合但这种结合是非特异的和可逆的；宿主细胞表面受体与病毒表面结构成分的特异结合，这是真正的结合,（二）病毒复制周期,（2）病毒的穿入,病毒可通过数种方式穿入细胞膜，即吞饮、融合和转位：吞饮 即病毒与细胞表面结合后内凹入细胞，细胞膜内陷形式类似吞噬泡，病毒原封不动地进入细胞浆内无包膜的病毒多以吞饮形式进入易感动物细胞内；融合 是指病毒包膜与细胞膜融合，而将病毒的核衣壳释放至细胞浆内,病毒体吸附细胞的过程可在几分钟到几十分钟内完成,（2）病毒的穿入,2 脱壳,病毒脱去蛋白衣壳后,核酸才能发挥作用多数病毒穿入细胞之后，随即由细胞溶酶体酶的作用，使衣壳蛋白质水解,露出病毒核酸但痘病毒特殊，分为两步脱壳先由溶酶体酶作用脱去外壳蛋白质，病毒核心(含有内层衣壳和核酸)释放于细胞浆中，然后再经病毒编码产生一种脱壳酶，脱去内层衣壳方能释放出核酸,2 脱壳,3 生物合成,病毒脱壳之后，接着就进入病毒复制的生物合成阶段，即病毒利用宿主细胞提供的低分子物质合成大量病毒核酸和结构蛋白生物合成阶段用血清学方法和电镜检查在细胞内找不到病毒颗粒，故称其为隐蔽期各病毒的隐蔽期长短不一，如脊髓灰质炎病毒是3-4,h，,正粘病毒7-8,h，,副粘病毒11-12,h，,腺病毒16-17,h。

隐蔽期实则是在病毒基因控制下进行病毒核酸和蛋白质合成的阶段病毒核酸复制部位因核酸类型不同而异DNA,病毒除痘病毒外，都在细胞核内复制；,RNA,病毒除正粘病毒和逆转录病毒在细胞核内复制外，其余都在细胞浆内复制,3 生物合成,由于病毒核酸类型不同，病毒的生物合成过程基本归为6类，,DNA,病毒包括双链,DNA,病毒和单链,DNA,病毒；,RNA,病毒包括单正链,RNA,病毒、单负链,RNA,病毒、双链,RNA,病毒及逆转录病毒,由于病毒核,(1)双链,DNA,病毒,首先利用宿主核内的依赖,DNA,的,RNA,多聚酶，转录早期,mRNA，,再于胞浆内的核糖体转译成早期蛋白早期蛋白主要包括依赖,DNA,的,DNA,多聚酶及脱氧胸腺嘧啶激酶，以利用其合成子代,DNA,分子再以子代,DNA,分子为模板转录多聚成大量晚期,mRNA，,继而在胞浆核糖体上转译出病毒结构蛋白，主要为衣壳蛋白,(1)双链DNA病毒,双链,DNA,复制为半保留复制形式,即亲代,DNA,的双链在解链酶作用下，解开成为正、负两个,DNA,单链再分别以这两条单链为模板，在,DNA,酶的作用下，按照核苷酸碱基配对的规律，分别合成互补的,DNA(,负链或者正链)，为新合成的双链,DNA，,即为子代,DNA。

通过此复制过程，生成大量与亲代结构完全相同的子代,DNA,双链DNA复制为,(2)单链,DNA,病毒,是以亲代,DNA,作模板，在,DNA,多聚酶的作用下，产生互补链，并与亲代,DNA,链形成,dsDNA，,作为复制中间型，即,DNA RI然后再以半保留形式进行复制,(2)单链DNA病毒 是以亲代DNA作模板，在DNA,(3)正单链,RNA,病毒,由于该病毒,RNA,具有,mRNA,功能，其,RNA,可直接附着于宿主细胞的核糖体上转译早期蛋白-依赖,RNA,的,RNA,多聚酶在该酶的作用下，转录出与亲代正链,RNA,互补的负链,以此为模板复制出子代,RNA,(3)正单链RNA病毒 由于该病毒RNA具有mRNA,(4)负单,RNA,病毒,大多数有包膜病毒属于此类，如流感病毒、狂犬病病毒等这些病毒含有依赖,RNA,的,RNA,多聚酶病毒,RNA,在此酶的作用下，首先转录出互补正链,RNA，,形成,RNA RI(RNA)再以,RI,的正链,RNA,模板起,mRNA,作用，转录出与其互补的子代负链,RNA，,再转译出病毒结构蛋白和酶,(4)负单RNA病毒 大多数有包膜病毒属于此类，如,(5)逆转录病毒,首先以病毒,RNA,为模板，在逆转录酶的作用下合成互补的,DNA,链，构成,RNA：DNA,中间体。

中间体中的,RNA,由,RNA,酶,H,水解，在,DNA,多聚酶作用下由,DNA,复制成双股,DNA该双股,DNA,则整合至宿主细胞的,DNA,上，成为前病毒(,provirus)，,前病毒还可核内经细胞的依赖,DNA,的,RNA,多聚酶转录成病毒的,mRNA,和子代,RNAmRNA,在胞浆核糖体上转译出子代病毒的蛋白质,(5)逆转录病毒 首先以病毒RNA为模板，在逆转,细胞,细胞表面的,病毒受体,1111吸附,1 吸附,1 吸 附,2 穿 入,3 脱 壳,4 核 酸 游 离,5 早 期,mRNA,转 录,6 翻 译 早 期 蛋 白 质,7 复 制 子 代 病 毒,DNA,8 晚 期,mRNA,转 录,9 翻 译 子 代 病 毒 蛋 白 质,10 子 代 病 毒 的 装 配 与 成 熟,生物合成,11 释放,病 毒 的 复 制 周 期,细胞细胞表面的1111吸附1 吸附1 吸 附 2,4 装配成熟与释放,病毒核酸与蛋白质合成之后，在细胞浆内或细胞核内装配为成熟的病毒颗粒除痘病毒外，,DNA,病毒均在细胞核内装配；,RNA,病毒与痘病毒则在细胞浆内装配,成熟的病毒体释放有下列几种方式：,4 装配成熟与释放,（1）破胞释放,裸露的,DNA,病毒和,RNA,病毒都以这种方式释放。

即病毒装配完成后，宿主细胞破裂而把病毒全部释放到周围环境中,（2）芽生,有包膜的,DNA,病毒和,RNA,病毒，在装配完成后，以出芽方式释放到细胞外通常细胞不死亡，仍能分裂增殖,（1）破胞释放 裸露的DNA病毒和RNA 病毒都以这种,三 病毒增殖的细胞效应,病毒在复制的过程中阻断或抑制宿主细胞的正常代谢，可致细胞的损伤、裂解并释放出大量的子代病毒（如无包膜的肠道病毒）出芽释放的病毒在细胞内可因细胞功能功能及代谢的改变最终导致细胞死亡（如疱疹病毒）有些病毒（如据悉胞病毒）通过细胞间桥或细胞融合方式侵入新的细胞,三 病毒增殖的细胞效应,干扰现象,：两种病毒感染同一细胞时，可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象，称为病毒的干扰现象干扰现象不仅在异种病毒之间发生，也可在同种、同型及同株病毒之间发生后者如流感病毒的自身干扰发生干扰的原因可能是：与病毒诱导宿主细胞产生的干扰素(,IFN),有关；宿主细胞的表面受体被结合或宿主细胞代谢途径发生了变化，从而阻止了另一种病毒的吸附、穿入细胞或生物合成病毒之间干扰现象能够阻止发病,也可以使感染中止,导致宿主康复,干扰现象：两种病毒感染同一细胞时，可发生一种病毒抑制另,四 病毒的异常增殖,(一)缺陷干扰颗粒,是指因病毒基因组不完整或者因某一点改变不能进行正常增殖的病毒。

基因不完整的病毒称缺陷病毒缺陷病毒病毒不能复制，但却能干扰同种成熟病毒体进入细胞则被称缺陷干扰颗粒（,DIP）但当与另种病毒共同培养时，若后者能为前者提供所缺乏的物质，则能使缺陷病毒完成正常的增殖这种有辅助作用的病毒被称为辅助病毒腺病毒伴随病毒就是一种缺陷病毒，用任何细胞培养它都不能增殖只有和腺病毒共同感染细胞时才能完成复制周期,四 病毒的异常增殖,(二)顿挫感染,病毒进入宿主细胞后，如细胞不能为病毒增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分，则病毒在其中不能合成本身的成分；或者虽合成部分或全部病毒成分，但不能装配和释放，称为顿挫感染例如，人腺病毒感染人胚肾细胞能正常增殖；若感染猴肾细胞则发生顿挫感染猴肾细胞对人腺病毒而言，被称为非容纳细胞，而对脊髓灰质炎病毒则是容纳细胞,(二)顿挫感染 病毒进入宿主细胞后，如细胞不能为病,第四节 病毒的遗传与变异,病毒和其他生物一样,具有遗传性和变异性.对病毒遗传与变异的研究经历了两个阶段,即传统遗传学和分子遗传学两个阶段,第四节 病毒的遗传与变异 病毒和其他生物一样,一 统遗传学,主要是用表型的病毒变异株之间遗传物质交换来分析各种病毒基因所编码的生物学功能。

采用突变株(从自然界分离的)或用紫外线、亚硝酸等理化因子诱发而得到的变异株,一 统遗传学 主要是用表型的病毒变异株之间,（,一）突变株,是由于病毒基因组核酸链中发生碱基置换、缺失或插入可引起的自发突变（10,-6,-10,-8,），也可用物理或化学因素诱发突变,比较常见有：,温度敏感突变株：2835可复制，3740 则不可复制,宿主范围突变株：改变了宿主范围,抗原性突变株,致病性减弱及耐药性突变株,突变株是指基因改变而发生某些生物特性改变的毒株当该突变株能较稳定地存在，并可在相应的宿主细胞中传代与存活，则称为变异株,（一）突变株 是由于病毒基因组核酸链中发生碱基置换、缺失或,（二）重组与重配,两种不同的病毒感染同一细胞时，有时可发生基因的交换，称为基因重组，其子代称为重组体,对于基因分节段的,RNA,病毒，（如流感病毒、呼肠病毒或轮状病毒）通过交换,RNA,节段而进行,（二）重组与重配,（,三）表型混合,指两种具有共同特征的病毒感染同一细胞时，一种病毒所产生的衣壳或包膜包在另一种病毒基因组（核酸）外面的现象这种改变不是遗传型的改变，而是表型的混合再次传代所产生的子代病毒特性，将由病毒核酸所决定,（三）表型混合,二.分子遗传学,20世纪70年代末开始了用分子遗传学及克隆技术研究病毒基因，从而将病毒遗传学推进到分子遗传学阶段，开展可对病毒基因组的全面研究,二.分子遗传学,（一）开展病毒基因结构分析,病毒保护性表位的确定,病毒抗原高变区的分析,与毒力相关的基因编码区的分析,耐药性变异分析,作用于病毒基因的某些细胞蛋白研究等,（一）开展病毒基因结构分析,第五节病毒的分类,一、根据生物学和理化特性分类,主要根据病毒生物学性状和理化特性分类,核酸性状 包括核酸类型与结构 病毒体的形态与大小；病毒体的结构 衣壳的对称型，有无包膜，衣壳壳粒数目及核衣壳直径；对乙醚或氯仿等溶剂的敏感性等分类。

将病毒分为20个科其中7个病毒科属于,DNA,病毒，13个病毒科(包括逆转录病毒)属于,RNA,病毒,染量或5织细胞感染量(ID5或课件,（二）根据组织亲嗜性分类,根据病毒感染的靶细胞及靶器官来分类，也不是绝对的分类，但对临床医学有实际意义,1 泛嗜性病毒 麻疹病毒、风疹病毒、天花病毒、黄热病病毒等,2 嗜神经性病毒 狂犬病病毒、流行性乙型脑炎病毒及脊髓灰质炎病毒等,3 嗜肺性病毒 流感病毒、呼吸道合胞病毒与鼻病毒等,4 嗜肠性病毒 轮状病毒与脊髓灰质炎病毒等,（二）根据组织亲嗜性分类,5 嗜皮肤性病毒 乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒及传染性软疣病毒等,6 嗜肝病毒 甲、乙、丙、丁及戊型肝炎毒,7 嗜淋巴细胞性病毒 嗜,T,细胞白血病病毒(,HTLV-1，HTLV-2)、,人类免疫缺陷病毒(。