紫外分光光度法测定化肥中的硝态氮.ppt

紫外分光光度法测定化肥中 的硝酸态氮 （一）实验目的1 1、、掌握利用紫外光谱对物质进行定性分掌握利用紫外光谱对物质进行定性分析、定量测定的基本原理析、定量测定的基本原理2 2、了解紫外分光光度计的性能与特点，学、了解紫外分光光度计的性能与特点，学会使用紫外分光光度计会使用紫外分光光度计LamberLamber-Beer-Beer定律：吸收光谱法基本定律定律：吸收光谱法基本定律图 物质对光的吸收 Ø 描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系假设一束平行单色光通过一个吸光物体 （二）基本原理硝酸根的水溶液对紫外光有吸收这是由硝酸根的结构所决定的在硝酸根的结构中，N、O之间除有一个σ键外，还有一个伸展着的大的键，因此在紫外区能够发生电子跃迁而产生紫外吸收本实验用含硝酸根的水溶液进行测定，最大吸收波长为300nm，硝酸态氮含量在100～1000g／ml范围内符合Beer定律测定是只需要将一定量的样品以水溶解后，就可利用标准曲线求得硝酸态氮的含量钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm1．光源：2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件棱镜——对不同波长的光折射率不同 色散元件 分出光波长不等距光栅——衍射和干涉 分出光波长等距（三）分光光度计的结构3．吸收池：玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光 区要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 光电池 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器4．检测器：将光信号转变为电信号的装置5．记录装置：讯号处理和显示系统光源光源单色器单色器样品池样品池检测器检测器记录装置记录装置图图 分光光度计构造方框图分光光度计构造方框图图 单光束分光光度计基本结构示意图ü 特点： •使用时来回拉动吸收池→移动误差 •对光源要求高 •比色池配对ü 特点： •不用拉动吸收池，可以减 小移动误差 •对光源要求不高•可以自动扫描吸收光谱 图 双光束分光光度计结构示意图ü 特点： •利用吸光度差值定量 •消除干扰和吸收池不 匹配引起的误差图 双波长分光光度计结构示意图（四）试剂与仪器¡硝酸钾标准溶液：称取14.437g KNO3（基准级,110℃烘干）于250ml烧杯中，以蒸馏水溶解后定容之500ml，此溶液每毫升含4.00mg硝酸态氮。

¡硝酸铵化肥试样¡754型紫外可见分光光度计五）实验步骤1、吸收曲线的绘制移取4.0ml标准KNO3溶液于25ml的容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀在752型分光光度计上，用1cm的石英比色皿，以蒸馏水为空白，在270～325nm的波段内，每隔5nm测量一个吸光度值以波长为横座标、吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线有吸收曲线找出最大吸收波长，并根据最大吸收峰处的吸光度值计算摩尔吸收系数2、标准曲线的绘制在五个25ml的容量瓶中分别加入硝酸钾标准溶液1.0ml、2.0 ml、3.0 ml、4.0 ml、4.5 ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀用1cm的石英比色皿，以蒸馏水做空白，在最大吸收峰处测定各溶液的吸光度值以硝酸态氮的浓度为横坐标、吸光度为纵坐标作图3、化肥试样的测定准确称取0.3～0.35g化肥试样于100ml烧杯中，以少量水溶解后，移入100ml容量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，摇匀按照作标准曲线相同的方法测定吸光度值由标准曲线上查的含量后，计算样品中硝酸态氮的百分含量六）分光光度计的使用注意事项：1、 比色皿的清洁程度，直接影响实验结果因此，特别要将比色皿清洗干净装样前处理：自来水反复冲洗→蒸馏水漂洗2次→待装溶液漂洗2次。

必要时，需用浓硝酸或铬酸洗液短时间浸泡 用完后用自来水和蒸馏水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿盒中2)拿放比色皿时，应持其“毛面”，不要接触“光 面”3）若比色皿外表面有液体，应用擦镜纸朝同一方向 拭干，以保证吸光度测量不受影响4) 比色皿内盛液应为其容量的2/3，过少会影响 实验结果，过多易在测量过程中外溢，污染仪器5) 比色皿的光面要与光源在一条线上七）思考题1、紫外－可见分光光度计由哪几部分组成？各部分的作用是什么？2、Lamber-Beer定律的应用条件是什么？如不满足这些应用条件，使用会出现什么结果？。