四环素类药物发展第一阶段金霉素土霉素课件.ppt

四环素类抗生素的分析四环素类抗生素的分析药本药本0808级级 苗露苗露第三小组第三小组 lWhat Ill show you：l四环素发展的三个历史阶段l四环素发展历史上的四个事件四环素类抗生素四环素类抗生素 Tetracyclines ，TCs 四环素类抗生素四环素类抗生素 Tetracyclines ，TCs l1，药物历史，药物历史 1500百年前的流传百年前的流传l2，药物疗效及理化性质，药物疗效及理化性质 耐药性和坏牙？耐药性和坏牙？l3，典型药物及检测，典型药物及检测 人畜二次污染！？人畜二次污染！？l4，药物修饰及其发展，药物修饰及其发展 取代基！新活力！取代基！新活力！1，1500百年前的流传百年前的流传l l 最新研究显示，最新研究显示，1500年前的远古努比年前的远古努比亚人深谙养生之道，亚人深谙养生之道，他们在啤酒中有意地他们在啤酒中有意地添加一种物质添加一种物质(链霉菌链霉菌链霉菌链霉菌培养基）培养基）培养基）培养基），从而使啤酒，从而使啤酒富有大量的四环素，富有大量的四环素，提高了身体免疫能力提高了身体免疫能力 谷物制成发酵稀粥，然后掺入带有链霉菌谷物制成发酵稀粥，然后掺入带有链霉菌谷物制成发酵稀粥，然后掺入带有链霉菌谷物制成发酵稀粥，然后掺入带有链霉菌的土壤，链霉菌可生成四环素。

的土壤，链霉菌可生成四环素的土壤，链霉菌可生成四环素的土壤，链霉菌可生成四环素 四环素与人体钙物质结合，可沉积在骨骼四环素与人体钙物质结合，可沉积在骨骼四环素与人体钙物质结合，可沉积在骨骼四环素与人体钙物质结合，可沉积在骨骼中，从而易被检测中，从而易被检测中，从而易被检测中，从而易被检测科学家在紫外线下观测发科学家在紫外线下观测发科学家在紫外线下观测发科学家在紫外线下观测发现，现，现，现，15001500年前努比亚人骨骼中富含四环素年前努比亚人骨骼中富含四环素年前努比亚人骨骼中富含四环素年前努比亚人骨骼中富含四环素1，1500百年前的流传百年前的流传四环素类药物发展史四环素类药物发展史l l1948年年Benj ami n Duggar从从金霉素链霉金霉素链霉菌菌（Streptomyces aureofaciens）中发）中发现了现了第一个四环素类抗生素金霉素第一个四环素类抗生素金霉素（Chlortetracycline）l l同年，辉瑞制药的研究部门发现了同年，辉瑞制药的研究部门发现了土霉素土霉素（Oxyt et racycl i ne，氧四环素）氧四环素）l l20世纪世纪50年代，年代，四环素（四环素（Tetracycline）和）和地美环素地美环素（Demeclocycline）被相继发现。

被相继发现这些天然产物被归类为这些天然产物被归类为第一代（第一代（1948-1957）四环素）四环素 四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段四环素类抗生素四环素类抗生素l是放线菌产生的一类是放线菌产生的一类广谱抗生素广谱抗生素包括金霉素、土霉素、四环霉素、土霉素、四环素及半合成四环素类素及半合成四环素类抗生素l具有具有十二氢化并四苯十二氢化并四苯基本结构该类药物基本结构该类药物有共同的有共同的A、B、C、D四个环的母核，仅四个环的母核，仅在在5、6、7位上有不位上有不同的取代基同的取代基 四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段临床用药：临床用药：l盐酸四环素l剂型需要，盐酸化l片剂、胶囊、注射剂四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段l金霉素、土霉素、四环素有相似的理金霉素、土霉素、四环素有相似的理化性质化学结构中化性质化学结构中4位的二甲氨基显碱位的二甲氨基显碱性，性，C3，C5，C6，C10，C12，C12a含含酚羟基或烯醇基，显酸性，呈两性能在酚羟基或烯醇基，显酸性，呈两性能在酸性或碱性溶液中溶解酸性或碱性溶液中溶解在干燥条件下比在干燥条件下比较稳定，但遇光易变色。

较稳定，但遇光易变色在酸性、碱性条在酸性、碱性条件下件下均不稳定均不稳定，失去活性失去活性 四环素类抗生素四环素类抗生素四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段 2 耐药性和坏牙？耐药性和坏牙？l l四环素，高浓度时具杀菌作用四环素，高浓度时具杀菌作用l l自自20世纪世纪50年代开始应用，至今已有年代开始应用，至今已有50余年历史上世纪余年历史上世纪70-80年代，四环素产年代，四环素产销处于全盛时期，我国有上百家企业生产，销处于全盛时期，我国有上百家企业生产，临床用量很大临床用量很大l l自自20世纪世纪80年代后期起，因细菌耐药性增年代后期起，因细菌耐药性增加以及新的抗生素大量上市等原因，四环加以及新的抗生素大量上市等原因，四环素产销逐渐萎缩，市场疲软素产销逐渐萎缩，市场疲软四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段 2 耐药性和坏牙耐药性和坏牙？l l四环素与人体钙物质结合，四环素与人体钙物质结合，四环素与人体钙物质结合，四环素与人体钙物质结合，可沉积在骨骼中，从而易被可沉积在骨骼中，从而易被可沉积在骨骼中，从而易被可沉积在骨骼中，从而易被检测l在牙的发育矿化期服用四环在牙的发育矿化期服用四环素族药物，可被结合到牙组素族药物，可被结合到牙组织内，使牙着色。

织内，使牙着色1950年，年，国外有报道四环素族药物沉国外有报道四环素族药物沉积于牙、骨骼以至指甲等，积于牙、骨骼以至指甲等，而且还能引起釉质发育不全而且还能引起釉质发育不全国内直至国内直至70年代中期方引起年代中期方引起注意，并逐渐停用注意，并逐渐停用 四环素类药物发展第一阶段四环素类药物发展第一阶段 OVER四环素类药物发展史四环素类药物发展史l第一代第一代天然四环素天然四环素的广泛使用，耐药性的的广泛使用，耐药性的问题促成了药物化学家对天然四环素的问题促成了药物化学家对天然四环素的结结构修饰构修饰l强力霉素（强力霉素（Doxycycline，辉瑞制药，辉瑞制药 1967年发明）和米诺环素（年发明）和米诺环素（Minocycline 为代表的半合成的第二代（为代表的半合成的第二代（1965-1972）四环素问世四环素问世 l在在80年代末年代末第一代四环素类药物退出临床第一代四环素类药物退出临床应用的范围，转投入应用的范围，转投入兽医市场兽医市场四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段3，人畜二次污染！？，人畜二次污染！？l l天然的四环素类抗生素中金霉素因毒性大，天然的四环素类抗生素中金霉素因毒性大，只作外用。

土霉素和四环素现在在临床上也只作外用土霉素和四环素现在在临床上也已少用，主要用作已少用，主要用作兽药和饲料添加剂兽药和饲料添加剂 l l四环素类抗生素由于能有效地治疗和预防动四环素类抗生素由于能有效地治疗和预防动物疾病，被广泛用于畜牧养殖可是长期滥物疾病，被广泛用于畜牧养殖可是长期滥用，造成畜牧产品中的高水平残留人长期用，造成畜牧产品中的高水平残留人长期摄入这样的畜牧产品后，摄入这样的畜牧产品后，TCs不断在体内蓄不断在体内蓄积，当浓度达到一定量后，就会对人体产生积，当浓度达到一定量后，就会对人体产生毒性作用毒性作用 四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段3，人畜二次污染！？，人畜二次污染！？四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段药物身份药物身份四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段药物鉴别药物鉴别四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段药物检查药物检查l l酸度酸度 （PH）l l澄清度（可见澄清度（可见杂质杂质 eg：菌：菌种产物）种产物）l lHPLC检测四环检测四环素类抗生素相素类抗生素相关物质的量关物质的量四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段l l有关物质有关物质 土霉素、土霉素、4-差向四环素、盐酸金差向四环素、盐酸金霉素、脱水四环素、差向脱水四环素的峰霉素、脱水四环素、差向脱水四环素的峰面积分别不得大于对照溶液主峰面积的面积分别不得大于对照溶液主峰面积的1/4（0.5% 减少一半）、减少一半）、1.5倍（倍（3.0%）、）、1/2（1.0%）、）、1/4（0.5% 减少至四分之一）减少至四分之一）、1/4（0.5% 减少一半），减少一半），l新增加新增加： 其他各杂质峰峰面积的和不得大其他各杂质峰峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的于对照溶液主峰面积的1/2（1.0%）。

药物检查药物检查 CHP2010 与与2005的区别的区别四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段抗生素四项常规检测抗生素四项常规检测l l干燥失重干燥失重l l杂质吸光度杂质吸光度l l热原热原l l无菌（生物无菌（生物制取分离所制取分离所得抗生素必得抗生素必须严格限制须严格限制无菌）无菌）四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段HPLC测定药物含量测定药物含量l l色谱条件色谱条件与系统适与系统适应性实验应性实验四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段l l目的：目的：目的：目的：建立快速检测四环素及其制剂中盐酸四建立快速检测四环素及其制剂中盐酸四建立快速检测四环素及其制剂中盐酸四建立快速检测四环素及其制剂中盐酸四环素含量的测定方法环素含量的测定方法环素含量的测定方法环素含量的测定方法 （UV-VISUV-VIS）l l方法：采用比色法，对经硫酸处理后的样品在方法：采用比色法，对经硫酸处理后的样品在方法：采用比色法，对经硫酸处理后的样品在方法：采用比色法，对经硫酸处理后的样品在431 nm431 nm波长处测定吸收值，通过回归方程计算波长处测定吸收值，通过回归方程计算波长处测定吸收值，通过回归方程计算波长处测定吸收值，通过回归方程计算出对应的含量。

结果出对应的含量结果出对应的含量结果出对应的含量结果 此方法在此方法在此方法在此方法在0 03 33 30 gL 0 gL 的范围内呈良好的线性关系，回归方程：的范围内呈良好的线性关系，回归方程：的范围内呈良好的线性关系，回归方程：的范围内呈良好的线性关系，回归方程：Y=9Y=90510 X-60510 X-682108210；r=0r=099959995l l结论：该方法简单、快捷、靶向性高，重现性结论：该方法简单、快捷、靶向性高，重现性结论：该方法简单、快捷、靶向性高，重现性结论：该方法简单、快捷、靶向性高，重现性好，可用于四环素及其制剂含量的快速初筛好，可用于四环素及其制剂含量的快速初筛好，可用于四环素及其制剂含量的快速初筛好，可用于四环素及其制剂含量的快速初筛l l关键词：四环素；快速检测；含量关键词：四环素；快速检测；含量关键词：四环素；快速检测；含量关键词：四环素；快速检测；含量 快速检测四环素片含量的测定方法快速检测四环素片含量的测定方法四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段l l标准溶液的制备：标准溶液的制备：l l精密称取标准品（盐酸四环素）适量精密称取标准品（盐酸四环素）适量(约约75 mg)，置，置25 ml容量瓶中，加容量瓶中，加01 molL 的盐酸的盐酸10 ml溶解后，再加水至刻溶解后，再加水至刻度，摇匀，再精密量取上述溶液度，摇匀，再精密量取上述溶液1 ml，加，加水至水至10 mI，摇匀，制成，摇匀，制成03 gL 的溶液，的溶液，作为作为标准溶液标准溶液备用。

备用 快速检测四环素片含量的测定方法快速检测四环素片含量的测定方法四环素类药物发展第二阶段四环素类药物发展第二阶段l l标准曲线精密量取上述标准溶液标准曲线精密量取上述标准溶液标准曲线精密量取上述标准溶液标准曲线精密量取上述标准溶液0.050.05、0.10.1、0.150.15、0.20.2、0.250.25、0.30.3、0.40.4、0.5 m10.5 m1分别置分别置分别置分别置10 ml10 ml容量瓶中，分别加入浓容量瓶。