胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇1300字.docx

    胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇1300字    胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇【原理】血清中总胆固醇(total cholesterol，TC)包括游离胆固醇(free cholesterol，FC)和胆固醇酯(cholesterol ester，CE)两部分血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA)，胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅与标本中TC含量成正比 【试剂】1．胆固醇液体酶试剂组成(具体含量见相关文献)GOOD's缓冲液(pH6.7) 胆固醇酯酶 胆固醇氧化酶 过氧化物酶 4-AAP 苯酚50mmol/L ≥200U/L ≥100U/L ≥3 000U/L 0.3mmol/L 5mmol/L2．胆固醇标准溶液5.17 mmol/L (200 mg/dl) 精确称取胆固醇200 mg，用异丙醇配成100 ml溶液，分装后，4℃保存，临用取出也可用定值的参考血清作标准 【操作步骤】 终点法检测TC按下表依次加样酶法测定TC操作步骤项目 血清(μl) 标准液/定值血清(μl)蒸馏水(μl) 酶试剂(μl)测定管 50 － － 1.50标准管 － 50 － 1.50空白管 － － 50 1.50混匀后，37℃保温5 min，用分光光度计比色，于500 nm波长处以空白管调零，读出各管吸光度。

【计算】血清TC (mmol/L)＝测定管吸光度×胆固醇标准液浓度标准管吸光度【参考范围】 血清参考值：3.0～5.20 mmol/L；危险阈值：5.20～6.20 mmol/L；高胆固醇血症：≥6.20 mmol/L临床意义】1．TC增高 常见于动脉粥样硬化、原发性高脂血症(如家族性高胆固醇血症、家族性ApoB缺陷症、多源性高胆固醇血症、混合性高脂蛋白血症等)、糖尿病、肾病综合征、总胆管阻塞、甲状腺功能减退、肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣2．TC降低 常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝脏疾病、严重感染、营养不良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性黄疸及慢性消耗性疾病，如癌症晚期等注意事项】1．试剂中酶的质量影响测定结果2．若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成分中去掉胆固醇酯酶即可3．检测标本可为血清或者血浆(以肝素或EDTAK2抗凝)评价】 本方法线性范围为≤19.38 mmol/L (750 mg/d1)本方法特异性好和灵敏度高，既可用于手工操作，也可自动化分析；既可作终点法检测，也可作速率法检测在终点法中血红蛋白高于2 g/L时引起正干扰；胆红素高于0.1 g/L时有明显负干扰；血中维生素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时，会使结果降低。

但是在速率法中上述干扰物质影响较小高TG血症对本法无明显影响检测TC的血清(浆)标本密闭保存时，在4℃可稳定1周，－20℃可稳定半年以上第二篇：实验七、八 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇（附图）教案首页第__5__次课 授课时间：20xx年11月29日～11月30日123＋   -全文完-。