饵料生物之轮虫的营养价值及培养技术要点.ppt

第三章第三章 褶皱臂尾轮虫的培养褶皱臂尾轮虫的培养概述概述1 1、分布：轮虫、分布：轮虫( (RotiferRotifer) )是一群体形微小的多细胞是一群体形微小的多细胞动物，种类繁多（约动物，种类繁多（约18001800种），广泛分布于淡水、种），广泛分布于淡水、半咸水和海水水域中半咸水和海水水域中2 2、优点：具有生活力强、繁殖迅速、营养丰富、大、优点：具有生活力强、繁殖迅速、营养丰富、大小适宜和容易培养等特点小适宜和容易培养等特点3 3、应用：至今，在世界范围内广泛培养，至少在、应用：至今，在世界范围内广泛培养，至少在6060种海洋有鳍鱼类和种海洋有鳍鱼类和1818种甲壳动物幼体的培育中应用种甲壳动物幼体的培育中应用4 4、作为生物饵料培养的轮虫主要种类有：壶状臂尾、作为生物饵料培养的轮虫主要种类有：壶状臂尾轮虫；萼花臂尾轮虫；褶皱臂尾轮虫；角突臂尾轮轮虫；萼花臂尾轮虫；褶皱臂尾轮虫；角突臂尾轮虫；裂足轮虫虫；裂足轮虫一、褶皱臂尾轮虫的分类地位和主要特征一、褶皱臂尾轮虫的分类地位和主要特征1 1、分类地位：属于轮虫门、单卵巢纲、游泳目、、分类地位：属于轮虫门、单卵巢纲、游泳目、臂尾轮虫科、臂尾轮虫属。

臂尾轮虫科、臂尾轮虫属2 2、主要特征：身体前端头盘的周围生有纤毛环，、主要特征：身体前端头盘的周围生有纤毛环，称为轮盘；其次，消化道的咽喉内有一很发达的称为轮盘；其次，消化道的咽喉内有一很发达的咀嚼器根据轮盘和咀嚼器的存在与否，可以把咀嚼器根据轮盘和咀嚼器的存在与否，可以把轮虫和其他动物区别开来轮虫和其他动物区别开来第一节第一节 褶皱臂尾轮虫的生物学褶皱臂尾轮虫的生物学裂足轮虫裂足轮虫 二、生殖习性二、生殖习性 褶皱臂尾轮虫的生殖方式有单性生殖和两性生褶皱臂尾轮虫的生殖方式有单性生殖和两性生殖两种方式，两种生殖方式在一定条件下可相互转殖两种方式，两种生殖方式在一定条件下可相互转换1 1、单性生殖、单性生殖 单性生殖又称孤雌生殖单性生殖又称孤雌生殖( (Parthenogenesis)Parthenogenesis)、、非混交生殖非混交生殖( (AmicticAmictic reproduction) reproduction) 孤雌生殖首先由休眠卵发育成双倍体的雌性轮孤雌生殖首先由休眠卵发育成双倍体的雌性轮虫，称为不混交雌体虫，称为不混交雌体( (AmicticAmictic female) female)，，然后不混然后不混交雌体经有丝分裂产生双倍体的非混交卵交雌体经有丝分裂产生双倍体的非混交卵( (AmicticAmictic egg)egg)，，最后非混交卵成熟后不需受精就能迅速发育最后非混交卵成熟后不需受精就能迅速发育成双倍体的雌性轮虫，此后，雌性轮虫又经有丝分成双倍体的雌性轮虫，此后，雌性轮虫又经有丝分裂产生双倍体的非混交卵，这样一代接一代进行孤裂产生双倍体的非混交卵，这样一代接一代进行孤雌生殖循环。

雌生殖循环2 2、两性生殖、两性生殖 两性生殖两性生殖( (Bisexual reproduction)Bisexual reproduction)又称混交生又称混交生殖殖( (MicticMictic reproduction) reproduction) 褶皱臂尾轮虫的两性生殖首先由不混交雌体产褶皱臂尾轮虫的两性生殖首先由不混交雌体产生混交雌体生混交雌体( (MicticMictic female) female)，，混交雌体经减数分裂混交雌体经减数分裂产生混交卵产生混交卵( (MicticMictic egg) egg)如果混交雌体在年轻时如果混交雌体在年轻时不与雄体交配，不论以后有无交配混交卵均不受精，不与雄体交配，不论以后有无交配混交卵均不受精，发育为单倍体的雄体，如果混交雌体在年轻时交配，发育为单倍体的雄体，如果混交雌体在年轻时交配，混交卵受精，受精卵再形成厚壳的休眠卵混交卵受精，受精卵再形成厚壳的休眠卵  轮虫进行单性生殖时，在适宜的条件下，每尾轮虫进行单性生殖时，在适宜的条件下，每尾雌体平均产雌体平均产21个卵，繁殖持续时间为个卵，繁殖持续时间为6~7天，经天，经10 天培养，可由原来天培养，可由原来1个个/ml增殖到增殖到1500~2000个个/ml。

思考：思考：1 1、轮虫的那一种生殖方式对鱼类的生产更有利？、轮虫的那一种生殖方式对鱼类的生产更有利？2 2、两性生殖对轮虫有何意义？、两性生殖对轮虫有何意义？ 轮虫进行两性生殖时，产生休眠卵，休眠卵必轮虫进行两性生殖时，产生休眠卵，休眠卵必 须经过须经过7~12天的休眠，在条件适宜时才能孵化天的休眠，在条件适宜时才能孵化3 3、两种生殖方式结果的比较、两种生殖方式结果的比较4 4、诱发轮虫两性生殖的因子、诱发轮虫两性生殖的因子 诱发轮虫两性生殖的因子是复杂的，有种的诱发轮虫两性生殖的因子是复杂的，有种的特异性、遗传和世代交替的内在因素等，但更主特异性、遗传和世代交替的内在因素等，但更主要的是外界环境条件刺激的影响，从目前的研究要的是外界环境条件刺激的影响，从目前的研究看，诱发轮虫两性生殖的环境因子主要有：看，诱发轮虫两性生殖的环境因子主要有：（（1 1）高的种群密度高的种群密度2 2）低温与温度的剧烈变化低温与温度的剧烈变化3 3）盐度的突然改变盐度的突然改变4 4）饵料的型式和数量的改变饵料的型式和数量的改变三、褶皱臂尾轮虫的变异三、褶皱臂尾轮虫的变异 轮虫是形态变异极大的动物，就是同一品系轮虫是形态变异极大的动物，就是同一品系也有大小和形状的变化，即多型性，经研究人们也有大小和形状的变化，即多型性，经研究人们发现，水温变化、饵料的质和量、增殖密度等环发现，水温变化、饵料的质和量、增殖密度等环境条件是引起轮虫大小变化的主要的外在因素。

境条件是引起轮虫大小变化的主要的外在因素 四、褶皱臂尾轮虫的生态条件四、褶皱臂尾轮虫的生态条件1 1、温度、温度 不同的品系，对温度的适应范围差别较大，不同的品系，对温度的适应范围差别较大，5℃ 5℃ 是轮虫生活的最低温度，是轮虫生活的最低温度，10℃ 10℃ 是轮虫繁殖的临界低温，是轮虫繁殖的临界低温，40℃ 40℃ 是轮虫生活和繁殖的临界高温是轮虫生活和繁殖的临界高温2 2、盐度、盐度 褶皱臂尾轮虫为广盐性生物，能在褶皱臂尾轮虫为广盐性生物，能在0.2~ 5.0%的盐的盐度范围内生长繁殖，其最适盐度范围，不同品系不同，度范围内生长繁殖，其最适盐度范围，不同品系不同，也依原生活环境盐度的不同而略有差别，但对盐度的也依原生活环境盐度的不同而略有差别，但对盐度的突然变化耐力较低（从突然变化耐力较低（从0.38%0.38%突变到突变到1.8%1.8%水环境中，水环境中，1 1天后全部死亡）天后全部死亡）3 3、光照、光照 由此可见，在暗条件和光条件下，褶皱臂尾轮虫由此可见，在暗条件和光条件下，褶皱臂尾轮虫均均 能生长繁殖，但在光条件下比在全暗条件下繁殖能生长繁殖，但在光条件下比在全暗条件下繁殖迅速。

迅速 褶皱臂尾轮虫对环境酸碱度的适应范围较广，褶皱臂尾轮虫对环境酸碱度的适应范围较广，在在pH5~10的范围内均能生长繁殖的范围内均能生长繁殖5、溶解氧、溶解氧 褶皱臂尾轮虫对水环境中的溶解氧含量的适应范褶皱臂尾轮虫对水环境中的溶解氧含量的适应范围很广，能够长时间耐受围很广，能够长时间耐受2mg/L低氧，在培养过程低氧，在培养过程中溶解氧要保持在中溶解氧要保持在1.5mg/L以上6、非离子氨、非离子氨 非离子氨（即游离氨、分子态氨）对水生生物的非离子氨（即游离氨、分子态氨）对水生生物的毒性很高，现已研究证实，非离子氨水平是影响褶毒性很高，现已研究证实，非离子氨水平是影响褶皱臂尾轮虫增长的限制因子非离子氨水平不宜超皱臂尾轮虫增长的限制因子非离子氨水平不宜超过过1mg/L4 4、酸碱度、酸碱度五、饵料和轮虫的营养价值五、饵料和轮虫的营养价值 褶皱臂尾轮虫食性广泛，可食多种饵料，包括细菌、褶皱臂尾轮虫食性广泛，可食多种饵料，包括细菌、酵母、单胞藻、小型原生动物、有机碎屑等直径在酵母、单胞藻、小型原生动物、有机碎屑等直径在25μm 以下的颗粒目前以使用单胞藻和酵母投喂居多。

以下的颗粒目前以使用单胞藻和酵母投喂居多1、单细胞藻类饵料、单细胞藻类饵料 在各种藻类种，普遍认为绿藻优于金藻，金藻又优在各种藻类种，普遍认为绿藻优于金藻，金藻又优于硅藻，我国多应用亚心形扁藻投喂时以使得水中于硅藻，我国多应用亚心形扁藻投喂时以使得水中略呈藻色为宜单纯用单胞藻培养的轮虫虽然营养丰略呈藻色为宜单纯用单胞藻培养的轮虫虽然营养丰富，但需要花费大量的设备和人力，育苗池富，但需要花费大量的设备和人力，育苗池:轮虫池轮虫池:单胞藻池为单胞藻池为1:(0.5~1.8):(1.5~2.1)，并且在生产性培养中，，并且在生产性培养中，轮虫的密度不大，只能达到轮虫的密度不大，只能达到40~60个个/ml2、酵母饵料、酵母饵料 面包酵母不耐盐，在海水中存活时间不长，因此，面包酵母不耐盐，在海水中存活时间不长，因此，应采用分次投饵和控制投饵量，一般每一百万轮虫日应采用分次投饵和控制投饵量，一般每一百万轮虫日投饵投饵1.2g酵母，分两次投饵可使轮虫培养达到酵母，分两次投饵可使轮虫培养达到400~600个个/ml 酵母具有供应稳定、易于贮藏、投喂简便等优点，酵母具有供应稳定、易于贮藏、投喂简便等优点，并且可使得培养轮虫的密度大大提高。

但人们发现，并且可使得培养轮虫的密度大大提高但人们发现，如果单纯用酵母培养的轮虫连续投喂真鲷、石鲷仔鱼，如果单纯用酵母培养的轮虫连续投喂真鲷、石鲷仔鱼，7~10天后，会使得鱼苗食欲减退，游泳缓慢、腹部膨天后，会使得鱼苗食欲减退，游泳缓慢、腹部膨胀等症状，胀等症状，2~3天后会大量死亡天后会大量死亡 3 3、培养高密度高营养轮虫的方法、培养高密度高营养轮虫的方法 （（1 1）用面包酵母和海水小球藻混合培养轮虫用面包酵母和海水小球藻混合培养轮虫2 2））在在制制造造面面包包酵酵母母工工序序中中，，供供给给含含有有丰丰富富的的不不饱饱和脂肪酸的油脂和脂肪酸的油脂3 3））用用海海水水小小球球藻藻或或油油脂脂酵酵母母对对用用面面包包酵酵母母生生产产的的轮虫作二次强化培养轮虫作二次强化培养4 4））用用以以生生鸡鸡蛋蛋黄黄和和水水乳乳化化的的鱼鱼肝肝油油与与面面包包酵酵母母一一起对轮虫进行强化培养起对轮虫进行强化培养5 5））通通过过向向小小球球藻藻培培养养基基中中加加入入某某些些维维持持轮轮虫虫培培养养的稳定性的稳定性第二节第二节 轮虫的分离和培养轮虫的分离和培养一、轮虫种的分离一、轮虫种的分离水水温温升升高高至至15℃以以上上，，用用120μm左左右右的的浮浮游游生生物物网网在在水水质质较较肥肥的的水水体体中中捞捞取取（（清清晨晨日日出出之之前前效效果果更更佳佳）），，去掉其他杂物。

去掉其他杂物1、、先先用用300μm尼尼龙龙网网滤滤去去小小鱼鱼，，杂杂物物等等，，再再集集中中容容器中放置数小时器中放置数小时2、利用轮虫对缺氧或恶劣环境抵抗力强的特性，不、利用轮虫对缺氧或恶劣环境抵抗力强的特性，不充气数小时，待桡足类及其他浮游动物等都死亡沉于充气数小时，待桡足类及其他浮游动物等都死亡沉于水底，再用沙布或滤纸平放水面使浮在水上层的轮虫水底，再用沙布或滤纸平放水面使浮在水上层的轮虫黏附其上，取出沙布把轮虫冲洗入另备容器中，即可黏附其上，取出沙布把轮虫冲洗入另备容器中，即可得较纯轮虫，按此方法再经得较纯轮虫，按此方法再经2~3次分离后，可得到纯次分离后，可得到纯种轮虫3、、也也可可把把采采集集的的水水样样放放在在显显微微镜镜下下用用微微吸吸管管将将目目标标吸出 二、休眠卵的浮化二、休眠卵的浮化1、休眠卵孵化的环境条件：、休眠卵孵化的环境条件：（（1）光照）光照（（2）盐度：）盐度：0.15~3.5% 但以但以1.5~2.0%最适最适（（3）温度：）温度：5~35℃ 但以但以20~25℃最适最适（（4））在在孵孵化化器器中中，，加加入入少少量量扁扁藻藻或或小小球球藻藻藻藻液液，，使水略呈很淡的藻色，有利于孵化。

使水略呈很淡的藻色，有利于孵化2、休眠卵的孵化方法：、休眠卵的孵化方法：（（1）孵化海水要过滤，容器要消毒）孵化海水要过滤，容器要消毒（（2）孵化期间每天需搅拌）孵化期间每天需搅拌1~2次次（（3）孵化后的仔虫应吸移到备用的培养容器中）孵化后的仔虫应吸移到备用的培养容器中培养 三、培养方式三、培养方式（（一一））依依培培养养条条件件的的人人为为控控制制和和分分：：粗粗养养、、精养精养1、、粗粗养养：：室室外外大大型型水水泥泥池池≥50m3或或土土地地600~1500m22、、精养：室内一般精养：室内一般0.5~1m3（（二）依培养和收获的特点分：二）依培养和收获的特点分：1、一次性培养、一次性培养2、半连续培养、半连续培养3、连续培养、连续培养四、一次性培养四、一次性培养（一）培养容器、培养池（一）培养容器、培养池（二）培养用水（二）培养用水300目滤除敌害生物，消毒，盐度目滤除敌害生物，消毒，盐度1.5~2.0%（三）培养单细胞饵料（三）培养单细胞饵料小小球球藻藻或或微微绿绿球球藻藻1000~3000万万个个细细胞胞/ml，，亚亚心心形扁藻为形扁藻为20~30万个细胞万个细胞/ml，，即可接种。

即可接种四）接种（四）接种单纯藻饵，接种量单纯藻饵，接种量0.1~0.5个个/ml，，经经7~10d培养培养面包酵母饵，面包酵母饵，25℃ 接种量接种量14~70个个/ml（五）投饵（五）投饵1、、投投藻藻，，投投喂喂不不宜宜过过多多，，应应以以呈呈现现淡淡藻藻色色为为宜宜，，饵饵料料被被吃吃光光时时，，水水变变清清，，呈呈淡淡（（轮轮虫虫的的本本色色）），，应及时补投饵料应及时补投饵料2、、酵酵母母 2次次/日日 1~1.2g/100万万轮轮虫虫，，最最后后需需强强化营养培养化营养培养六）搅拌或充气（六）搅拌或充气（七）生物情况的观察和检查（七）生物情况的观察和检查1、观察、观察（（1））情情况况良良好好：：轮轮虫虫游游泳泳活活泼泼，，分分布布均均匀匀，，密密度加大2））情情况况异异常常：：活活动动力力弱弱，，多多沉沉于于底底层层，，或或集集成块状浮于水面上，密度不增加时甚至减少成块状浮于水面上，密度不增加时甚至减少2、镜检、镜检（（1））生生长长良良好好：：身身体体肥肥大大，，胃胃肠肠饱饱满满，，游游动动活活泼泼，，多多数数成成体体带带非非混混交交卵卵，，少少的的1~2个个，，多的多的3~4个，不形成休眠卵。

个，不形成休眠卵生生长长不不良良：：多多数数不不带带非非混混交交卵卵或或带带休休眠眠卵卵；；雄体出现；轮虫死壳多，沉底活动力弱等雄体出现；轮虫死壳多，沉底活动力弱等八）收获（八）收获一般经一般经3~7d培养培养五、半连续培养五、半连续培养（一）培养池（一）培养池室室外外：：轮轮虫虫池池/单单胞胞藻藻池池=30~40/100~200m3，，有效水深有效水深1.2m（（二）培养单胞藻饵料二）培养单胞藻饵料清洗、消毒、灌水、施肥清洗、消毒、灌水、施肥（三）接种（三）接种（四）培养（四）培养（五）采收（五）采收每次培养一般能维持每次培养一般能维持15~25d，，最多达最多达30d。