细胞培养正常版.doc

一，名词解释In vitro culture体外培养:指从活体内取出组织，模拟体内的生理环境，在无菌、适当的温度和一定营养条件下存活 和生长的方法包括细胞培养、组织培养、器官培养Cell culture细胞培养：指从体内取出单细胞或细胞群，在无菌适当温度和一定营养条件下生存和生长并维持其结构 和功能的方法Life span of culture cells培养细胞生命期：指细胞在培养中持续增殖和生长的时间，与细胞种类，生物学性状和 供体的年龄等因素有关Cell fusion细胞融合：两个细胞或两个以上细胞合并形成一个细胞的过程常用诱导物为：①仙台病毒（RNA病毒） ②聚乙二醇（PEG）“返祖”现象细胞分化特征减弱或不明显，形态和功能趋于单一化，发生转化，获得不死性，或变成具有恶性性状的 细胞群Immatality永生性或恶性性，是细胞转化的标志之一，即细胞获得持久增殖能力永生性的细胞能够长期传代不死， 并多伴有核型的改变，不一定具有恶性，但都会进一步演变成恶性细胞Deadaption不适应：表现为细胞在原体内时所拥有•的分化特性在体外培养时减弱或不明显Dedifferentiation去分化或脱分化：即细胞失掉发生分化的能力。

可能是基因变异所致导致细胞分化表达受阻，分 化基因表达不充分，但并不意味着细胞分化能力完全丧失Anchorage-dependent cells贴壁性细胞或锚着依存性细胞：这类细胞在培养时能黏附在支持物表面生长，大多数培养 细胞呈贴壁性生长，有赖于贴壁才能生长的细胞铺路石样”:细胞紧密排列时，细胞呈多角形或六角形Netting拉网现象:在构成上皮细胞膜状生长的细胞群中一些细胞常相互分离卷曲，致使上皮细胞膜中形成网眼状空洞, 可能与细胞分泌透明质酸酶有关NIH3T3细胞：美国国立卫生研究院首先建系的小鼠成纤维细胞的无限细胞系，具有永生性，接触抑制，无异体接种致 癌性，每三天传代一次，每次接种3X10,细胞/MNude mouse,裸鼠：是20世纪60年代作为无毛变种被发现，后来查明该类小鼠先天性胸腺缺陷，此性状由隐性遗传基 因“nu”传递裸鼠缺乏T细胞免疫反应，而移植瘤的伽疫排斥反应主要有T淋巳细胞完成，因此将肿瘤细胞移植在裸 鼠体内，能成功建立移植瘤Feddercell饲细胞：也成滋养细胞，系成纤维细胞或其他细胞生长形成单层细胞后，再用大剂量的射线照射，使细胞 失去增殖能力，但应具有活力和代谢能力，令其作为底物将其他细胞接种于其上，饲细胞的代谢产物有利于其他细胞 的生长，通常用饲细胞培养特殊难培养细胞。

Saturation density饱和密度：在特殊情况下，培养容器所达到的最大细胞数，此后，细胞停止增殖，在贴壁生长的 细胞以每平方厘米细胞数表示，在悬浮培养的细胞，以每立方厘米的细胞数表示Contact inhibition接触抑制：当一个贴壁生长的正常细胞也另一个细胞相互接触式，便停止分裂增殖，相互之间紧 密接触，但不存在交叉重叠的现象，称为接触抑制作为区分正常细胞和癌细胞的标志之一Density inhibition密度抑制：细胞接触回合成片后，虽然发生接触抑制，只要营养充分，细胞仍然能进行增值分裂, 因此细胞数量仍在增多但当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多是，细胞因营养的枯竭和 代谢物的影响，则发生密度抑制，导致细胞分裂停止Apoptic body凋亡小体：细胞凋亡后，降解的胞浆及胞核成分被包裹在膜性成分中而形成凋亡小体，嗜伊红染色阳性 PCD细胞程序性死亡：正常机体细胞在受到生理和病理刺激因细胞凋亡基因表达而出现的一种主动的死亡过程特点是 凋亡小体形成，不引发炎症反应BBS平衡盐溶液：主要是由无机盐，葡萄糖组成，作用是维持细胞渗透压的平衡，保持pH稳定，并提供简单营养 Hamfl2：使用微量元素，适应在血清含量低的情况下的细胞培养，有利于培养细胞的分化，也适合于克隆化培养，无 血清培养基中常用的基础培养基MC-C0Y5：是一种为肉瘤细胞设计的培养液，发现它除适用于原代细胞培养，，组织活检体液细胞及淋巳细胞生长外， 还特别适用于较难培养的细胞的生长Serum freemedium无血清培养基：利用促细胞生长物质的组合与合成附加物，再与基木培养及混合，使构成无血清培 养基，对细胞有良好的促生长效应Scid mouse严重联合免疫缺陷小鼠：一种淋巳细胞分化过程受损的小鼠，因抗原R基因重组异常，使B淋巳细胞不能 发育成熟，机体的体液细胞免疫功能均缺陷，难检测到免疫球蛋白的分泌，这样Scid小鼠就成为异种移植的良好活体 承载系统Suspension culture悬浮培养：细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中的一种培养方法Primary culture原代培养：也成为初代培养，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续1-4周。

此期 细胞呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛subculture传代培养：当细胞增殖到一定密度后，需要分离出部分细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存， 这一过程叫传代或将细胞从一个培养瓶转移到多个培养瓶的过程传代(passage)：细胞增殖达到一定密度时，需要分离出部分细胞并更换新营养液，适应细胞的继续生长和增殖，这 一过程称为传代Mitotic index (MI)细胞分裂指数：细胞群中每1000个细胞中的分裂数，用来描述指数增生期细胞的分裂数量，是 判定细胞生长旺盛与否的一个重要指标细胞群体倍增时间是指培养物中细胞数量翻倍的平均时间Diploid Cells二倍体细胞：在细胞培养中呈二倍体核型的细胞群体称二倍体细胞Diploid cell line Z1倍体细胞系：正常细胞在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，这种细胞 称二倍体细胞系Stem line干系：当某一核型的细胞，在该细胞群中居多数时，具有该数值染色体数的细胞群即称为干系，也叫主流系 二倍体细胞培养法：能维持细胞保持二倍体状态的培养方法Cell line细胞系：初代培养物开始第一次传代培养后的细胞即称之为细胞系。

Clone:是指由一个祖细胞分裂形成的细胞群体，其遗传学特征、生物学特征都应完全相同Colony (集落)：是指一个以上的祖细胞分裂增殖而聚集在一起的细胞团由于是来自不同的祖细胞，故其遗传学特征、 生物学特征不同，甚至差异很大Cell cloning细胞克隆：又称为单细胞分离培养，即把单个细胞从群体中分离出来单独培养，是指重新繁衍成一个新 的细胞群体的培养技术Cell strain细胞株：细胞经过克隆后，后裔细胞群来源于一个共同的祖细胞，即形成所谓的纯系，即细胞株Certified Cells已鉴定的细胞：各种已被命名Cell line和经过细胞生物学鉴定Cell Strain具有以下特征：形态均一、生长增殖稳定、生物学性状清楚符合上述情况的细胞群即文献中常称之为已鉴定细胞RPMI1640：是一•种常用的细胞培养液，最初是针对淋巳细胞培养而设计的，后来发现它能广泛用于许多种类细胞的培 养，包括正常细胞和肿瘤细胞的培养，最适合于悬浮细胞生长Coloning efficiency克隆形成率：克隆细胞时，要把细胞先制成单细胞悬液，再接种培养在底物上，让细胞单独生长, 适应性较强和活力较好的细胞能增殖形成细胞小群(colony)克隆。

细胞群.单个细胞形成克隆的百分数称为克隆形成 率，用于表示细胞生活力和独立生长能力Plating efficiency接种存活率：细胞被制成散在的悬液后，以低密度2-5个/c^接种到底物上贴壁并能存活生长形 成细胞小群的细胞的分数值，成为接种存活率HAT medium：是有次黄麋岭(H)、氛基蝶岭(A)、胸昔(T)和甘氛酸及双蒸水配制而成的完全培养基可以选择性的杀死 骨髓瘤细胞及自身融合细胞，可用于杂交瘤技术中单克隆抗体的制备MTT test (四甲基偶氮唆盐检测法)用于多药耐药性的检测检测原理：活细胞线粒体脱氢蟾可以还原MTT为蓝色产 物，药物作用后，用96孔板在酶标仪上测570nm的吸收值，能表示存活细胞的量Precancerous Cell癌前细胞：受一定剂量致癌物处理的细胞群中，并非所有的细胞都必定受到损害，受到打击发生启 动并进入转化发展阶段的细胞仅是一小部分，散在于那些未受损的正常细胞中，这些细胞称为癌前细胞随着转化的 不断进展，细胞接触后却不发生接触抑制，最后形成可见的转化灶Population Dependence群体依赖性：单个细胞不是细胞永久存在的形式，不能长期生存。

一个有活力的细胞终需经过 繁殖形成群体，只有群体细胞才是培养细胞的基本存在形式单个细胞虽能生长繁殖，但不如群体细胞生存能力强， 细胞量多时比少时易于培养，说明细胞之间能相互沟通信息，呈现着相互依存性或群体依赖性Gene Transfection基因转染：将基因导入体外培养细胞中，观察目的基因在体外细胞中的表达可用于基因治疗即取 出体内细胞导入基因后，再输回体内Gene transfer基因转导：即把基因导入细胞的技术，或成导入，培养细胞是基因转导最适宜的对象外源性基因能整 合入受体细胞基因组中Transgenic Technique转基因技术：是基因转导技术的一种，受体细胞是受精卵，向受精卵导入H的基因后，再置入 宿主动物了宫，发育成个体；可在胚胎期检测基因表达，也可于生后再进一步观察目的基因在整体水平内的表达 cell therapy细胞治疗指将正常或遗传改造过的人体细胞直接移植或输入患者体内，以达到替代受损细胞、治疗疾病 的目的MDR多药耐药基因：其产物是一种糖蛋白p-170,它能将进入癌细胞中的抗癌药物泵出细胞外Stem cells, SC干细胞：是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种 功能细胞。

按分化潜能大小来分类全能干细胞，多能干细胞，专能干细胞PDFG血小板生长因子：来源与血小板和血清中的一种多肽，具有强烈刺激细胞分裂活动性，可以表示细胞增殖旺盛程 度染色是利用化学染料与细胞及各种细胞器发生化学作用或吸附作用，使各种细胞结构能够通过染色改变其折射率，从 而清晰地显现出来染色有单染和复染两种TUNEL法 细胞凋亡时，DNA双链断裂或只要一条链上出现缺口而产生的一系列DNA的3 -011末端可在脱氧核糖核甘 酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核甘酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到 DNA的3—末端，从而可进行凋亡细胞的检测诱发细胞转化基因：能诱发细胞发生无限增殖和包括恶变在内的转化作用，癌基因便是该类基因中最主要的基因 功能性基因：该类基因表达时，能产生特定功能的产物，如B球蛋白基因便是典型的功能性基因1. 填空现代组织培养的进步主要体现在消化酶的应用和液体培养基的应用体外浸润性生长实验通常不选用鸡胚的软骨组织作为实验对象,是由于组织中含有胶原酶抑制物细胞培养液的除菌需用滤过瞄法单细胞培养的主要方法学基础是腴蛋白酶的应用和液体培养基的应用诱发细胞融合的物质是家乙二醍，分子量:是1000,最适pH值是里2，最适用浓度是50： 1鉴定CSC细胞的金标准是看分选得到的CSC能否在移植动物体内形成新肿瘤传代的频率或间隔与下列因素有关：细胞性质、培养液性质（Serum乏少）、接种的细胞数量和细胞增殖速度等。

细胞传一代后，通常经历三个阶段1.潜伏期2.指数增生期3.停滞期体外培养细胞形态大致分类：1.成纤维细胞型2.上皮型细胞3.游走型细胞4.多形型细胞指数增生期是细胞一代中活力最好和最主要的。