常用培养基的制备.ppt

技能训练 常用培养基的制备 •熟悉培养基制备的基本程序•会制备常用的培养基 实训目标高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、等 仪器材料方法步骤（一）肉汤培养基（一）肉汤培养基（二）琼脂培养基（二）琼脂培养基（三）半固体培养基（三）半固体培养基（四）血液琼脂培养基（四）血液琼脂培养基制备培养基制备培养基 方法步骤方法步骤•计算•称量•溶化•调PH•分装•灭菌•无菌检验•备用 （一）肉汤培养基（一）肉汤培养基（二）琼脂培养基（二）琼脂培养基（三）半固体培养基（三）半固体培养基（四）血液琼脂培养基（四）血液琼脂培养基（一）肉汤培养基（一）肉汤培养基1．成分 牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水1000ml2．制法 将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后，加热溶解矫正pH至7.4～7.6，过滤分装置高压蒸气灭菌器内，121.3℃灭菌20min即成3．用途 可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基的基础原料供营养要求较高的细菌分离培养，亦可供溶血性的观察和保存菌种（二）固体琼脂培养基（二）固体琼脂培养基1．计算：．计算： 1000 mlg，再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。

营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000 （g） 其中： 15代表一个平板需要营养琼脂约15 ml； n代表要做的培养基平板的数量 2．称量：用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相应的 蒸馏水的量，要尽量准确 3．溶化：将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸2—3次 4．分装：倒平板或倒试管•若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15ml左右，以刚好覆盖平皿底为易•若做斜面培养基应倒入试管中，量为试管的1/3包扎：包扎：包扎：包扎：◇◇◇◇加塞后，试管通常每加塞后，试管通常每加塞后，试管通常每加塞后，试管通常每7 7支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，用线绳扎紧三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎用线绳扎紧三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎用线绳扎紧三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎用线绳扎紧三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎◇◇◇◇以活结形式扎紧，以便使用时容易解开。

以活结形式扎紧，以便使用时容易解开以活结形式扎紧，以便使用时容易解开以活结形式扎紧，以便使用时容易解开◇◇◇◇用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸5．灭菌：用高压灭菌器灭菌包扎好，直立放入内筒中，在121.3℃灭菌20-30min灭菌完毕后，将平板培养基拿出平放于桌面，凝固前勿动；将试管培养基摆成斜面，凝固前勿动 6．无菌检验： 随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小时，若无菌 生长则为合格7．备用：将合格的培养基放入冰箱，在0-4℃中保存备用（三）半固体培养基（三）半固体培养基肉汤培养基中加入0.3%～0.5%琼脂粉制成，用于菌种的保存或观察细菌的运动性 （四）血液琼脂培养基（四）血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃，以无菌操作，加入5%～10%的无菌血液（或脱纤维血），然后倾注平皿或分装试管制成斜面 课后作业1.写出实习报告；。