过氧化氢纳米雾(超干雾)用于GMP车间空间灭菌效果研究.pdf

1 过氧化氢纳米雾（超干雾）用于GMP 车间空间灭菌效果研究张超张杰刘万忠（湖北荷普药业股份有限公司）（地址武汉市东西湖区金银湖南四街2号 ,邮编 430000）制药厂生产洁净区消毒是药品生产质量保证的一个重要生产环节，为了保证产品质量免受生产过程中微生物污染，必须每天每批时刻进行消毒尽管如此，但是环境空间的微生物是比较难控制的看似简单的消毒过程，要达到相关消毒要求，选择合适的消毒方式尤为重要空间消毒比较普遍使用的是甲醛熏蒸，甲醛的杀菌能力不容置疑，但是随着科学技术的发展，越来越不被认证专家认可，而且甲醛是一级致癌物质，国内有些大型企业不惜重金购置了比较先进的VHP ，即是汽化过氧化氢过氧化氢容易验证，广泛被欧盟认可，我国的GMP要与欧盟接轨，过氧化氢自然成为了大势所趋据市场反应，VHP采用高浓度的过氧化氢，当冷凝薄雾时很容易对彩钢板造成腐蚀、使用久了出现墙壁起泡等缺点为了克服上述缺点，湖北荷普药业股份有限公司利用喷雾干燥和文丘里（Venturi ）原理，研制出全球首台过氧化氢纳米雾发生器，这种设备可将过氧化氢消毒剂雾化并干燥至1μm以下的小颗粒，这种干燥的小颗粒消毒剂能够长时间悬浮在空气中作无规则的布朗运动，从而保证了消毒剂与空气中的细菌充分接触而达到消毒灭菌的目的。

是目前用于可密闭空间（如GMP 车间、医院病房、实验动物中心、小型仓库等）和各种人造设备（如隔离器、冷冻干燥机、孵化箱、传递窗、生物安全柜、高压蒸汽灭菌锅、过滤器和各类风管及管道等）理想的消毒灭菌工具为了验证该设备对GMP 车间的消毒灭菌效果，我们选用了荷普威?活性过氧化氢消毒剂（专用杀孢子剂）和荷普威?活性氧免洗消毒液（杀孢子型，过氧化氢浓度1.5%）进行试验，结果如下1. 试剂与仪器1.1 生物指示剂 ( 嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，孢子量106) ，含配套化学指示剂和TSB 液体培养基（北京金四环科技有限责任公司生产），1.2 荷普威 ?活性过氧化氢消毒剂（专用杀孢子剂，过氧化氢浓度6% ）（湖北荷普药业股份有限公司生产）1.3 荷普威?活性氧免洗消毒液（杀孢子型，过氧化氢浓度1.5%）（湖北荷普药业股份有限公司生产）1.4 GY-02 型过氧化氢气体浓度探测器2 1.5 NMW-1 型纳米雾TM（超干雾）消毒灭菌仪（湖北荷普药业股份有限公司生产，地址武汉市东西湖区金银湖南四街2 号）1.6 试验场地湖北荷普药业股份有限公司GMP 车间，车间高2.8m, 宽 4.4m，长 6.5m, 空间总体积约80m3。

2．使用流程整个过氧化氢纳米雾灭菌过程分为6 个阶段：（ 1）带入洁净区前 , 请将设备表面用75% 酒精或者0.5%荷普威 ?活性氧免洗消毒液进行擦拭消毒, 空调停风 , 包括 ( 送风 , 出风和新风 ) 2） 根据洁净区空间大小（ m3），计算喷雾体积或者喷雾时间3） 将计算好的消毒液灌入本设备的储液装置中4）开启电源开关，开始喷雾5） 喷雾完毕后，密闭90-120 分钟 6） 通风：该阶段通过洁净空气置换以排除房间内部的残余过氧化氢气体，从而使房间内部的过氧化氢气体浓度低于职业允许暴露水平(1 ppm)3．实验方法用 NMW-1 型纳米雾TM（超干雾）消毒灭菌仪对上述80m3的 GMP 车间进行消毒灭菌试验根据车间空间大小，按5ml/m3喷雾量即400ml 荷普威 ?活性过氧化氢消毒液或者1.5%活性氧免洗消毒液进行纳米雾消毒雾化时将纳米雾设备置于车间正中间，5 片生物指示剂分别放置在车间中间（编号3）和四个不同角落（设备喷雾头前方两个角落点编号分别为1 和 2，设备喷雾头后方角落两个点编号分别为4 和 5），所有生物指示剂离地面的高度均为1m ，当消毒液雾化完毕后，将房间密闭2 小时再排风2 小时除去残留的消毒剂，使其达到安全水平（空气中过氧化氢浓度小于1ppm ），取出生物指示剂（芽孢条），放入对应编号的嗜热脂肪芽孢培养液中，按照所购生物指示剂的使用说明书，置于恒温培养箱中，在50℃-55 ℃培养 48h 后观察。

同时取同批生物指示剂1 片作阳性对照经过48 小时的培养，若培养液变浑浊，颜色由紫色变为黄色则判定为阳性；若培养液澄清，颜色不变色则为阴性；继续培养至第7 天，仍无菌生长则为判定灭菌合格4．实验结果4.1 灭菌效果试验结果见下表1 所示结果表明，当车间的雾化量为5ml/m3，密闭时间为2 小时时，使用 2 种不同浓度的杀孢子剂，均可达到灭菌的要求，即均可杀死106的孢子3 表 1 不同消毒剂雾化后灭菌效果比较培养基编号活性过氧化氢专用杀孢子剂雾化后培养基试验结果( 浓度 6% ，喷雾量为5ml/m3) 活性氧免洗消毒液雾化后培养基试验结果( 浓度 1.5%，喷雾量为5ml/m3) 48 小时7 天48 小时7 天1 紫色紫色紫色紫色2 紫色紫色紫色紫色3 紫色紫色紫色紫色4 紫色紫色紫色紫色5 紫色紫色紫色紫色阳性对照黄色——黄色——4.2 过氧化氢残留量的测定灭菌结束后用通风2h，在房间的不同部位（与生物指示剂放置位置相同）GY-02 型过氧化氢气体浓度探测器对过氧化氢的残留量进行检查，结果均小于＜1ppm （见表 2 所示）表 2 过氧化氢的残留量检测结果检测部位检测项目1 2 3 4 5 过氧化氢残留量（ppm ）＜1 ＜ 1 ＜1 ＜1 ＜1 5．结论本研究采用采用湖北荷普药业股份有限公司生产过氧化氢纳米雾TM（超干雾）消毒灭菌仪（型号NMW-1 型）以及荷普威 ?活性过氧化氢消毒剂（专用杀孢子剂，过氧化氢浓度6% ）和荷普威?活性氧免洗消毒液（杀孢子型，过氧化氢浓度1.5%）对 GMP 车间进行消毒灭菌，并用生物指示剂( 嗜热脂肪芽孢杆菌孢子，孢子量 106) 进行验证，结果均能使芽孢下降六个对数，满足灭菌要求，且灭菌后过氧化氢残留也符合要求。

6．注意事项6．1 根据洁净区的不同要求，选择不同的雾化方式：用于A/B 级灭菌时，选择6% 荷普威 ?活性过氧化氢杀孢子剂原液，雾化体积为3-5ml/m3, 雾化完毕后，密闭时间90-120 分钟；用于C/D 级消毒时，可选择 3% 荷普威 ?活性过氧化氢杀孢子剂( 用等体积的纯化水对6% 荷普威 ?活性过氧化氢杀孢子剂进行稀释即4 得) ，雾化体积为3-5ml/m3, 喷雾完毕后，密闭时间60-90 分钟；用于普通区域消毒时，可选择荷普威?活性氧免洗消毒液，雾化体积为3-5ml/m36．2 杀孢子剂的具体用量应根据待消毒或灭菌的空间布局进行适当调整，当空间布局比较复杂（如含有大量设备影响空气流通）时可适当增加杀孢子剂用量，反之则适当减少杀孢子剂用量6．3 设备在工作使用时要尽可能放置在通风良好且远离墙壁和其它设备的地方6．4 空气过分潮湿会对消毒效果产生一定的影响，建议使用时保持空气相对湿度小于60% 6．5 必须注意高浓度过氧化氢非常危险，不仅具有强烈的腐蚀性，而且还会灼伤皮肤，吸入蒸汽也是非常危险，因此必须知道如何正确使用高浓度过氧化氢：使用晴纶手套, 而不是乳胶手套 ( 过氧化氢可使乳胶手套变脆) ，穿着长袖衣服避免皮肤接触到过氧化氢，同时还要佩戴护目镜。