肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清肌酐的比较.doc

1肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清肌酐的比较【关键词】 肌酐；肌氨酸氧化酶法；苦味酸法；方法比较［摘要］ 目的：评测肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定血清样本肌酐(Cre)的偏倚 方法：依据美国国家临床实验室标准协会EP9A 文件，每天取临床样本 8 份，分别用两种方法测定血清样本Cre 含量，共测定 5 d，记录结果，去除离群点，计算线性回归方程和相关系数，进行偏倚估计结果:在测定患者新鲜非黄疸血清样本Cre 时，肌氨酸氧化酶法和苦味酸法测定结果的预期相对偏倚在Cre 浓度<100 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≤-1.8%， 酶法的测定结果低于苦味酸法; 当 Cre 浓度>200 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≥11.9%，酶法的测定结果高于苦味酸法，当 Cre浓度>500 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≥20.1%结论：随血清 Cre 浓度上升，酶法和苦味酸法的测定结果的预期偏倚增加，临床实验室在换用不同仪器或试剂时必须对肌酐测定的不同方法建立不同的参考值范围［关键词］ 肌酐；肌氨酸氧化酶法；苦味酸法；方法比较Measurement of Serum Creatinine by Sarcosine Oxidase and Picric Acid MethodsComparison between Two 2MethodsAbstract: Objective To determine the bias between two methods for measuring the serum creatinine (CRE). Methods Following the protocol described by the NCCL approved guideline (method comparison and bias estimation using patient samples)， 40 patient samples were analyzed in 5 operating days， each sample was analyzed in duplicate by both enzymatic assay and Jaffe kinetic assay. The duplicates were assessed for each method within the same run. The coefficient of correlation was calculated and the bias between the two methods was calculated accordingly. Results The bias between the enzymatic assay and Jaffe kinetic assay were -1.8% at 100 μmol/L， 11.9% at 200 μmol/L and 20.1% at 500 μmol/L for creatinine. Conclusion The bias between the two methods increases as the concentration of the serum creatinine increases. New reference range for creatinine should be established when new instrument or new reagent is applied. Key words：Creatinine；Sarcosine oxidase；Picric acid methods； Method comparison3血中的肌酐(Cre)由外源性和内源性两类组成，主要由肾小球滤过，肾小管基本不重吸收。

内源性 Cre 由肌肉代谢产生，每天生成量相当衡定，在外源性 Cre 摄入量稳定的情况下，血液中 Cre 的浓度取决于肾小球的滤过功能当肾实质受损时血中 Cre 浓度升高，这是检测肾小球滤过功能的重要指标为评测肌氨酸氧化酶法(Y)和碱性苦味酸法(X)测定血清 Cre 的偏倚，依据美国国家实验室标准协会 EP9A 文件，分别测定样本中 Cre 含量进行比较，报道如下1　材料和方法1.1　 仪器　Olympus AU 640(日本)1.2　 肌氨酸氧化酶法 (四川省迈克)， 批号 020305， 校准物为 Roche 公司 Calibrator for automated systems 批号759350， 质控物为 RANDOX 公司 ASSAYED HUMAN MULTI SERA 296UN/1 R1， R2，苦味酸法( 四川迈克 )， 批号 020305， 校准物为 Roche 公司 Calibrator for automated systems 批号759350， 质控物为 RANDOXASSAYED HUMAN MULTI SERA 296UN/1 R1，R21.3　 临床样本 　本院患者血清标本， 全部标本总胆红素均4<25 μmol/L。

1.4　 分析方法 　用改良 Jaffe 速率法，两法的参数均在试剂厂商提供的参数基础上加以修改. 每天选取 8 份临床患者样本，分别用 Y 和 X 在 Olympus AU 640 上按顺序 1→8 测定血清 Cre，再按相反顺序 8→1 重复测定2　结果2.1　 记录测定结果 (Xij 和 Yij， j 表示重复次数)，计算每个样本测定结果的均值(Xi 和 Yi)、每样本两次重复测定值的差的绝对值(Dxi 和 Dyi)及两种方法测定结果均值间的差值(Yi-Xi) 以 Yi 对Xi 作散点图，以(Yi-Xi)对 Xi 作偏差图目测离群点计算样本两次重复测定值的差的绝对值(Dxi 和 Dyi)的平均数计算两种方法测定结果均值间差值(Yi-Xi)的平均数判断：对任一样品， 如果重复测定值的差的绝对值(Dxi 和 Dyi)或两种方法测定结果均值间差值(Yi-Xi)超出平均数 4 倍，则检验结果视为无效，结果见表 1表 1　患者样本检验结果( 略)2.2　 患者样本检验结果 　见表 1，Yi 对 Xi 均值散点图见图1，偏差图见图 25图 1　Yi 均值对 Xi 均值散点图( 略)图 2　(Yi-Xi)对 Xi 散点图( 略)2.3　 排除离群点后， 计算两种方法测定患者血清 Cre 浓度结果的线性回归方程为：Y=1.256X-27.446，相关系数 r2 为0.995。

2.4　 根据上述线性方程，对酶法与苦味酸法测定患者血清Cre 的结果进行预期偏倚估计，结果见表 2表 2　Y 与 X 测定血清 Cre 结果的预期偏倚估计( 略)3　讨论本文据 NCCLS 文件 EP9A 对 Y 和 X 测定血清 CRE 进行了比较EP9A 文件是为临床实验室及仪器厂家提供的用于评价同一被测物的两种测定方法之间偏倚的实验设计对于实验室，评价的目的在于确定两种方法能否得到相同的结果EP9A 提供了基于患者标本的方法学比较实验设计EP9A 文件的方法比较实验设计规定最少样本例数为 40，排除离群点数不得多于 1当 r2≤0.95 时，应增加测定样本量本试验结果表明，随 CRE 浓度上升，Y 和 X 的测6定结果的预期偏倚增加当 CRE 浓度<100 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≤-1.8%， Y 的测定结果低于 X; 当 CRE 浓度在>200 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≥11.9% ，Y 的测定结果高于 X，当 CRE 浓度>500 μmol/L 时，两种方法的预期偏倚≥20.1%本文测定结果与居漪等［3 ］报道的结果有一定的差异， 可能是由于所用仪器和试剂不同所致， 提示临床实验室在换用不同仪器或试剂时， 应注意分析参数设定的合理性，并重新建立参考值范围。

参考文献 ：［1］　NCCLS (EP9A ).Method comparison and bias estimation using patient samples［J］. Approved guideline.1995.［2］　叶应妩. 全国临床检验操作规程［M ］.第 2 版.1997：262263.［3］　居漪， 曾芝如. 酶法和 Jaffe 速率法测定血清肌酐的方法学比较［J］.上海医学检验杂志，2002， 12:2425.。