一种礁膜多糖的化学组成和结构研究---.pdf
9页
一种礁膜多糖的化学组成和结构研一种礁膜多糖的化学组成和结构研一种礁膜多糖的化学组成和结构研一种礁膜多糖的化学组成和结构研究究究究 •此研究以成年雌性牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象，采用荧光实时定量方法检测不同卵巢发育期的性腺P450aromA (CYP19A) 酶基因表达，运用重亚硫酸氢盐修饰后测序法测定其启动子区CpG富集区每个CpG位点甲基化模式结果发现，在整个卵巢发育期都有CYP19A 基因表达，在Ⅳ期达到最高值，然后下降至卵巢发育初期水平；而启动子CpG富集区整体甲基化水平却与之成相反趋势这暗示P450aromA酶是催化雌激素合成的关键酶，促进卵母细胞成熟；CYP19A 基因表达可能受启动子区CpG甲基化修饰影响这些结果初步解释了CYP19A 基因的生理功能及其表达调控的分子机制优游娱乐 lyt •P450芳香化酶是催化雄激素转化为雌激素的关键酶和限速酶利用PCR-SSCP技术检测牙鲆CYP19A基因启动子CpG富集区单核苷酸多态性（SNPs），并分析了突变位点对牙鲆繁殖内分泌的影响结果在2个CpG富集区（P1、P2和P3）发现31个SNPs。
经过多重比较分析发现，P1位点与雌鱼血浆雌二醇（E2）水平和雄鱼性腺指数（GSI）存在显著性关系(p<0.05)；P2位点与雄鱼血浆睾酮（T）水平和肝重指数（HSI）呈显著性相关(p<0.05)这2个突变区域都与牙鲆的繁殖性能存在显著性相关通过此研究为牙鲆的分子育种和繁殖调控提供一些有价值的参考信息 •目的：核苷酸结合寡聚化结构域样蛋白-2（nucleotide-binding domain and leucine-rich repeat containing family receptors 1，NOD2 ) 受体作为一种胞浆内模式识别受体，在天然免疫系统中能够识别入侵的外源病原微生物本研究在斜带石斑鱼中对NOD1及NOD2蛋白的功能进行了初步研究方法：用同源克隆和RACE的方法克隆斜带石斑鱼NOD1及NOD2基因的 cDNA全长序列，核苷酸和氨基酸序列同源性比对在NCBI上提供的BLAST程序中进行蛋白结构域的预测由软件SMART完成信号肽的预测由软件SignalP完成用qRT-PCR方法进行组织分布、攻毒试验及NLR信号通路蛋白在石斑鱼对病原识别中的作用的研究艾米网 tfl •结果：克隆得到斜带石斑鱼NOD1及NOD2基因的 cDNA 的ORF全长。
此两种蛋白具有典型的NOD-LRR结构域，不具有跨膜结构域，与哺乳动物及其他鱼类的蛋白结构相似；进化树分析表明，斜带石斑鱼NOD1及NOD2蛋白进化上十分保守，与其他鱼类亲缘关系较近，而与哺乳类亲缘关系较远组织表达模式显示，斜带石斑鱼NOD1及NOD2基因在多个免疫相关组织中广泛表达用溶藻弧菌对健康斜带石斑鱼进行攻毒试验表明，NOD1及NOD2基因参与了斜带石斑鱼对病原的识别受LPS及Poly I:C刺激之后，斜带石斑鱼免疫组织白细胞中NOD1及NOD2基因及信号通路蛋白RICK及IL-8的表达均呈现不同程度的上调结论：斜带石斑鱼NOD1及NOD2蛋白及其信号通路可能在免疫保护及病毒入侵中发挥着重要的作用，为研究斜带石斑鱼抵御病原侵染的自我保护机制奠定了一定的基础 •本实验对来自湖北武汉市南湖，湖北咸宁阳武干渠，湖北鄂州池塘，江西南昌青岚湖，安徽巢湖，江苏宜兴太湖6个地理种群的铜锈环棱螺（Bellamya aeruginosa）的细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因片段的核苷酸序列进行了分析，以探讨COI的核心片段序列在铜锈环棱螺种群遗传结构和分子系统发育研究中的应用价值，为进一步利用这一序列鉴定我国环棱螺种质资源，种群遗传结构，分类阶元和遗传多样性提供基础依据。
测序结果表明，所有铜锈环棱螺扩增片段长度均为709bp，序列A+T含量（0.664-0.684）明显高于G+C含量铜锈环棱螺6个地理种群种群间共有变异位点（Variable sites）24个，在核酸序列中发现3种变异类型，其中转换20次，厦门酒店预订 zyx •颠换3次，转换/颠换1次其中简约信息位点（Parsimony informative sites）13个，单一多态位点数（Singleton polymorphic sites）为10，核苷酸多态性（Pi）为0.015，平均核苷酸差异数（K）10.933同义替换（Synonymous Substitutions）和非同义替换（NonSynonymous Substitutions）位点数为158.17和549.83以COI基因片段序列为标记，用Corbicula fluminalis和Taylorconcha insperata作为外群，并将其它已公布的部分环棱螺（Bellamya sp., B.capillata, B.pagodiformis, B.mweruensis, B.crawshayi, B.trochlearis, B.rubicunda, B.unicolor, B.jeffreysi, B.bengalensis）， •田螺（Viviparidae sp.,V. ater, V.contectus）和其他螺类（Theodoxus transversalis, Nerita costata, Pseudamnicola exilis）为内群，构建了环棱螺的系统发生树。
其拓扑结构显示6个地理种群的铜锈环棱螺聚为一个单元，然后与其它环棱螺和田螺聚为一支，而与其它的螺类形成不同分支，与外群相区别，其结果与传统的形态分类结果基本相符说明COI基因适合作为环棱螺种群遗传结构和系统发生研究的分子标记鸟网 gln •本文对一种礁膜多糖进行化学组成和结构研究礁膜藻体经热水提取、乙醇沉淀、冻干得礁膜粗多糖，经Q Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-400/HR分离纯化，得到多糖组分MPS高效凝胶渗透色谱法分析表明MPS为纯度高的均一多糖，分子量约为58.4 kDa；气相色谱法测得多糖MPS主要由鼠李糖组成，还含有少量木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖；MPS硫酸根和糖醛酸含量分别为28.5%和3.94%；经甲基化分析和核磁共振波谱分析表明，MPS主要由→3)-α-Rhap-(1→、→2,3)-α-Rhap-(1→和→2)-α-Rhap-(1→组成，还存在少量的→2,3,4)-α-Rhap-(1→、→2,4)-α-Rhap-(1→、α-Rhap-(1→和→3,4)-α-Rhap-(1→，硫酸基团主要位于→3)-α-Rhap-(1→的C-2位和→2)-α-Rhap-(1→的C-3位。
本研究表明多糖MPS是一种结构新颖的硫酸多糖菲律宾圣安娜 ana 。
