大围山微型鸡繁殖性能的研究.docx

大围山微型鸡繁殖性能的研究指导教师： 职称 指导教师单位通信地址邮编学 院: 动物科学技术学院 专 业： 年级： 论文提交日期： 答辩日期： 答辩委员会主任： 云南农业大学摘要【研究H的】云南屏边大围山微型鸡是我国云南特有的具有独特遗传特性而 且屈于亚热带、热带型早熟地方品种的家禽此次研究研究H的在于阐明其群体 的遗传结构和遗传变异情况方法】采用对囲个家鸡进行特异性的微卫星标记 法对该鸡种自然群体中的30个个体进行多态性电泳检测的研究方法结果】研 究结果显示：研究中的33个微_卫星座位共检测到65个等位基因，每个座位等位 基因的数量在1〜3个之间，这些等位基因的频率范围在0. 0333〜1.000之间， 平均每个座位的等位基因数量为1.9697个，有效等位基因数量在1・00〜2.63个 Z间，平均有效等位基因数为1・6846群体平均杂合度(H)和群体平均多态信 息含量(PTC)分别为0. 1737和0.3279结论】结果显示，大围山微型鸡群体 平均杂合度和群体平均多态信息含量较低，纯合度较高，未受到其它外来血液 的混杂，是一个封闭的原始群体，具有较高的遗传一致性关键词：大围山微型鸡；微卫星标记；遗传变异；多态信息含量；杂合度Research Daweishan Miniature Chicken ReproductivePerformanceABSTRACT【OBJECTIVE] Purpose To PingBian Daweishan Yunnan is Chinas Yunnan unique miniature chickens have unique genetic characteristics and subtropical, tropical early maturing local varieties of poultry . The purpose of this study is toelucidate the genetic structure and genetic variation of the situation of its population. [METHOD] conducted on 33 chicken microsatellite markers specific method for the chicken in 30 natural populations individuals electrophoretic polymorphism detection methods ・【RESULTS 】The results showed that : the study of 33 microsatellite loci were detected 65 alleles , the number of seats for each allele between 1 to 3 , in the frequency range of these alleles 0.10333 〜between 1.1000 , the average number of alleles per locus was 1.19697 , effective number of alleles between 1100 - 2163 , the average effective number of alleles 1.16846. Population average heterozygosity (H) and group average polymorphism information content (PIC) was 0.11737 and 0.13279 .【CONCLUSION] The results showed Dawcishan miniature chicken population average heterozygosity and population mean polymorphism information content is low, homozygosity is higher, not being mixed with other foreign blood , is a closed primitive groups 、 with a higher genetic consistency.Keywords: Dawcishan miniature chicken; microsatcllitc markers; genetic variation; polymorphism information content; heterozygosity1引言云南省屏边人围山微型鸡是云南省畜牧局在2006年进行云南省种质资源调 查吋发现的原始鸡种。

体貌特征和外形特征和家鸡非常接近体型外貌与茶花鸡 更是大同小界，十分和像但是微型鸡的个体却明显没有茶花鸡个头大成年微 型鸡的重量大约只有600g〜1000go但是微型鸡的毛色与茶花鸡有较明显的差 异甚至与目前报道的中国原鸡亚种（Gallus gallus jabouillei）的毛色都有较大的差 异，微型鸡公鸡的毛色更显得斑斓绚丽、漂亮耀眼毛色有两种颜色分别为红 麻花和银白麻花母鸡毛色则为黑褐麻花和银白麻花两种类型此鸡种属于亚 热带、热带性早熟鸡种大围山微型鸡在牛长速度丄较为缓慢，比不上其他类型 的生态鸡种这种机的品种类属于H前报道的地方鸡种中体重较轻的地方性鸡 种此品种的鸡H前处于半家养半野生的状态于是我们可以怀疑此鸡种的基因 可能部分继承了大围山自然保护区内的野鸡（雉鸡）的基因为此我们从分子水 平上进一步研究微型鸡自然群体的遗传结构及其遗传多样性状况以便为以后的 有效保种和选育利用提供可靠理论依据和科学的数据依据实验中我选取了33 个微卫星标记并利用PCR及非变性聚内烯酰胺凝胶电泳技术对其群体遗传变杲进 行了分析微卫星DNA,又称短审联重复序列长度多态性是以少数几个核昔酸（一 般2〜6个）为单位多次串联重复的DNA序列。

广泛分布于真核基因组中［1］，具 有多态性丰富，选择中性，呈孟德尔共显性遗传，操作简单等特点因此，它 被广泛应用于动物群体遗传变异、遗传结构以及群体遗传关系的研究被称为 是进行家养动物遗传多样性研究的首选工具［2〜5］本研究的主要H的就是通过 利用PCR研究方法对大围山微型鸡微卫星位点进行遗传多样性分析阐明大围山 微型鸡在繁殖过程中表现出来的遗传多样性通过研究表明云南特有鸡种资源的 品种繁殖特征为以后培育地方优质鸡种提供有效地数据支持和科学依据对培 育具有地方特色的禽兽优良品种具有重要的指导意义2材料与方法2. 1材料在云南红河州屏边县的微型鸡种群中随机采集30只大围山微型鸡样本，数 量上保证雌雄个体各占样本总数的一半，随机采集就是为了保证样本中每只鸡之 间没有直接的血缘关系，以确保样本的一般性原则，进而保证研究的-般性和说 服力然后对采集来的样木鸡进行静脉取血样，在每只鸡的鸡翅下静脉取血样2 ml,然后把采集来的血样用ACD抗凝（ACD Blfn二1B6）,均匀混合后立即将其放置 于冰盒里，把混合好的血样带回实验室将其置于零下20摄氏度冰箱里保存备用 2. 2制备基因组DP\把采集好的血液样詁解冻参照苗永旺等［6］的方法提取微型鸡的基因组 DNAo将提取的基因组D\A经琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测纯度和浓度。

然后将其稀释到浓度为30ng /nL,放置于零下20摄氏度冰箱里保存备用2. 3微卫星引物所筛选出的33个微卫星座位分布于家鸡基因组的24条染色体上微卫星引物序 列來自http://iow a. thearkdb. org,引物由上海生工生物工程技术公司合成 （表 1）表1筛选出的囲对微卫星引物的信息Tab. 1 Information of 33 pairs of microsatellite primers序号染色体座位引物序列 退火温度/C扩增片段大小/bpNochromosomelocussequence o f the primer annealing temperaturefragment size11ADLO251F: TTTGGCTTAGGGTGATGCTGR: CGTGCTCCACACAGGAATGT56200〜30021ADL0188F: CACTTCCAGTATTAACGTGAR: GTGGACACAATGAGTTCCTC53150〜20932ADL0257F: ATCTTGAAACCTCACAAAGCR: TCTTCCAACCTATTTTTAGT50161〜21842ADL0190F: TCAGCTCTTCAGGCAAAAAGR: AACTTGGACCACAATCTTAT50220〜23153MCW 0252F: CTGCTCAAGCCCATCAAATGGR: CGATAACATCTGACACTGCC56254〜29663MCW 0224F: ATTACCTTTCTTCATTAACGCCR: TTCATAGACTTGAGCGAGGAC56291〜30174MCW 0122F: TCCTTTGGAGCACGGAGGAACR: AGATGCACAGGCAGAGCTCCA57267〜27784MCW0170F: TTGTGAAACTCACAGCAGCTGR: TTATAGCAGGCTGGCCTGAAG60263-26794MCW 0005F: ACCTCCTGCTGGCAAATAAATTGCR: TCACTTTAGCTCCATCAGGATTCA60189〜259104MCW 0240F: CAAAACCGGTGTCACCTACTGR: GGTTATTTCTTCAGTGACTTCC58172〜197115MCW 0029F: CATGCAATTCAGGACCGTGCAR: GTGGACACCCATTTGTACCCTATG56149—194126MCW 0176F: AAAGAGAAGTATAAAACATGCCR: TCCATTCTTGGCAGTGCATAG58257〜270137MCW 0120F: CTATGTAAAGCTTGAATCTTCAR: ATTCCTGGGTGCTAATTTACC54250〜287148ADL0121F: CTGGAACAAGAGGGCTTTGCR: GGATGTGAAAAATCTCCTGG56125〜127159MCW 0134F: GGAGACTTCATTGTGTAGCATR: ACCAAAAGACTGGAGGTCAAC56260〜2841610MCW 0035F: CAGAAACATTTGGACTTGGCTTR: TTGCTTCATTTCTAGTCTCCAGTT60227〜2331711MCW 0097F: GGAGAGCATCTGCCTTCCTAGR: TGGTCTTCCAGTCTATGGTAG56263〜3091812MCW 0198F: GATCTTTGCTACCATCCACTGR: ACCCATCTGGTTGGA。