复合减肥茶及其减肥机理的研究.doc

复合减肥茶及其减肥机理的研究摘要：研究了乌龙茶以及山楂、荷叶等常见食用中药对大鼠离体激 素敏感性脂肪酶和胰脂酶活性的影响，据此确定复合减肥茶的配方, 并通过动物试验检验了其减肥功效试验结果表明，该减肥茶能极 显著地提高激素敏感性脂肪酶活性(P<0.01),增加离体脂肪释放FFA 的百分率达112.9%；能有效地抑制营养肥胖型大鼠体重的增长和减 少其体内脂肪含量(pvO.Ol)；降血脂作用显著(pvO.O5),减肥效果良好 肥胖是指体内堆积过多的脂肪组织，膳食热量过剩是造成肥胖的主要 因素肥胖会增加患者心脑血管疾病、糖尿病、脂肪肝、肿瘤、内分 泌失调等疾病的发病率［1,2］I大I此，减肥是肥胖者必须重视的健康问 题在我国，肥胖者只增不减，患病人数达9000万，加上隐性肥胖 共约1.5〜2亿人，在经济发达的城市儿童肥胖率已超过10%［3］因 而开发减肥保健品，对预防和降低肥胖的发病率有着重要的现实意 义，其市场潜力巨大目前市面上虽然已有一些利用食用中药配制的 减肥胶囊和减肥茶，但相关减肥机理的研究尚未见系统报道为此， 本研究对几种常用的具减肥降脂作用的食用中药，以大、小鼠为实 验对象，进行有关减肥生理、生化指标的测定，较系统地探讨其减 肥机理，为这类中药的开发利用以及研制确实有效的减肥品提供科学 依据。

1材料与方法1.1材料食用中药：山楂、荷叶、乌龙茶等均为市售；实验动物：SD雄性大 鼠及昆明种雄性小鼠，由中山医科大学实验动物中心提供1.2主要仪器及试剂Olympus BH -2型显微镜、测微器、ER-120A 型台式电子秤、721型分光光度计、日立CT5DL型离心机、HH-2型 恒温水浴锅、ZFQ-85型旋转蒸发仪、HH-B11电热恒温培养箱、恒 温振荡器盐酸肾上腺素（福建省福州制药厂），泰氏培养液，戊巴比 妥钠、硬脂酸，二乙基硫代氨基甲酸酯钠等试剂均为分析纯1.3方法1.3.1激素敏感性脂肪酶活性的测定激素敏感性脂肪酶是脂肪组织中 甘油三酯水解成脂肪酸的限速因子［4］因此，本实验采用测定一定条件下的脂肪组 织所释放游离脂肪酸（FFA）的量来考察该酶的活性其方法如下［5］： 采用不饥饿的SD雄性大鼠，以戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉 后，取出副睾脂肪垫，放入生理盐水中供试验用称取脂肪组织若干 份（每份200mg）,破碎后置于50ml三角烧瓶中按下列条件分组： 空白组，加培养液4ml；阳性对照组，加培养液3.9ml和盐酸肾上腺 素0.1ml（20ng/ml）；药物组：加培养液3.9ml和不同的中药捉取液 0.1ml（lg生药/ml）, 37C振荡培养90min后测定FFA含量，酶活以U M/200mg/90min表示。

以硬脂酸为标准物，绘制标准曲线并求出其 回归方秤，1.3.2胰脂酶活性的测定［5JSD雄性大鼠，乙醯麻醉，剖腹取出胰腺, 置研磨器中加适量生理盐水，充分研匀，制成0.5g/ml的胰腺组织液, 离心取上清液备用将中药提取液调至p H 7 ,取若干个锥形瓶， 分别加入胰组织液lml ,空口组煮沸以破坏胰酶，各瓶加酪酸乙酯 lml＞蒸憾水10ml及甲苯lml空白对照组加蒸憎水lml,药物组加 中纱提取液lml（lg生药/ml）,充分混合后置37C恒温箱保温24h此 间摇动数次，取出冷却后，加酚駄指示剂2滴，分别用O.lmol/LNaOH 滴定，样品所用NaOH量减去空白所用量即为胰脂肪酶活力133减肥茶配方的确定及其提取液的制备本实验以所选中药对大鼠离体激索敏感性脂肪酶活性的影响为主要 依据，以对大鼠离体胰脂酶活性的抑制作用为参考因子，优选减肥茶 的配方，将所选中药配制成复合型减肥茶取适量减肥茶加入沸水浸 泡30min,离心取上清液，反复3次，然后再将提取液低温浓缩成lg 生药/ml的溶液，备用1.3.4减肥试验1.341营养肥胖模型的建立及给药方法选用体重50〜60g的SD雄性幼大白鼠共32只，随机分成4组， 即：正常对照组、模型对照组、减肥茶高、低剂量组。

止常对照组喂 基础饲料，其余各组喂营养饲料（每100g营养饲料含70g基础饲料, 10g奶粉、猪油和蛋黄粉，10滴鱼肝油），连续喂养45d,以建立营 养肥胖模型然后对高、低剂量组，每天分别按l・5ml/100g、 0.75ml/100g体重灌减肥茶提取液;模型对照组,每天按1.5ml/100g体 重灌生理盐水连续灌胃4周；空白对照组口由饮水，各组均喂基 础饲料134.2肥胖指数、脂肪指数和脂肪细胞数目、大小的测定在134」 实验中的末次给药后，各组大鼠空腹12h,称其体重；并测量其体长 (鼻至肛门的长度)；计算出大鼠的肥胖指数(体重X 103/体长)各组 大鼠经眼眶取血，分离血清，釆用酶联试剂比色法测定血清总胆固醇 (TC)及甘油三酯(TG)的含量然后解剖大鼠，剥离其生殖器及肾周围 的脂肪，称脂重，计算山大鼠的脂肪指数(g脂肪重量/100g体重) 在同一部位取小块脂肪组织，用10%甲醛固定、切片,在400倍显 微镜下计数全视野中的脂肪细胞个数(HBF),并用测微器测量脂肪细 胞大小和显微摄影1.3.5小鼠胃肠蠕动作用试验 按文献［5］的方法进行1.3.6各组间的实验数据处理 采用Excel软件包进行t检验。

2结果与讨论2.1食用中药对大鼠离体激素敏感性脂肪酶及胰脂肪酶活性的影响 激索敏感性脂肪酶是脂肪分解的限速酶，脂肪组 织的甘油三酯在它的作用下释放出游离脂肪酸和甘油 二酯，促进脂肪酸进入线粒体氧化分解增强该酶 的活力，可促使甘油三酯水解速率加快，即加速了 脂肪的动员从而达到减肥的冃的而胰脂酶则在控制 食物中脂类吸收、利用中起重要作用，该酶活性受 到 抑 制而 使 脂肪 吸 收 受阻以硬脂酸为标准物得到的标准曲线，冋归方程 是：Y= 1 .2693X + 0.1 202(r = 0.9966)所选药物对 大鼠离体脂肪分解作用的影响结果见表1 试验表明，山楂、泽泻、荷叶、乌龙茶、决明子、绞 股蓝都有类似于肾上腺素的作用，能提高激素敏感 性脂肪酶的活性，促进脂肪组织释放F F A的作用， 其中以山楂效果最好，而黄罠和茯苓则无此作用从表1中还可看出，八种中药的水提物对大鼠胰脂酶 活性的影响是不同的，除了乌龙茶能极显著地抑制 大鼠胰脂肪酶的活性外，其他中药都有不同程度地 提 高 胰 脂 酶 活 性 2.2减肥茶配方的确定理想的减肥效果应是能加速脂肪动员，其次是抑 制食物脂肪的消化吸收，因后者可通过控制饮食来减 少脂肪的摄入。

所以本减肥茶的组方以对激索敏感性 脂肪酶活性的影响为首要因素，并综合考察对胰脂酶活 性的作用由动物体外试验结果(如表1)显示，在所 选诸中药中，山楂、泽泻、荷叶加速脂肪动员效果 最好，但泽泻和III楂均能极显著地提高胰脂肪酶活 性两者相比，山楂对胰脂酶活性促进作用相对较 小，且对提高激素敏感性脂肪酶活性的作用最强 而乌龙茶能极显著地促进FFA的释放和抑制胰脂肪酶 的活性，减肥作用较为理想所以确定山楂、乌龙 茶、荷叶作为减肥茶主料，泽泻、决明子、绞股 蓝等为辅料配制成复合减肥茶在各组分的协同作用 下，复合减肥茶增加脂肪组织释放FFA的百分率高达 1 1 2 . 9 % ,比任何一种单组分的效果都好2.3复合减肥茶的减肥功效231复合减肥茶对营养肥胖型大鼠体重的影响复合减肥茶对营养肥胖型大鼠体重、体长、肥 胖指数的影响结果见表2o由表2可知，给药4周 后，复合减肥茶高、低剂量组体重与止常对照组相 当，而高剂量组与模型对照组之间存在极显著差异（p <0.01）,低剂量组的体重也显著低于模型对照组（p <0.05） o模型对照组肥胖指数均显著高于高、低剂 量组（p v 0・0 5 ）表明此减肥茶能有效抑制肥胖大鼠体 重 的 增 长 o2.3.2复合减肥茶对营养肥胖型大鼠体脂和脂肪细胞的影响复合减肥茶对营养肥胖型大鼠脂肪指数、脂肪细胞数目和形态、大小 的影响结果见表3和图1、图2。

从表3、图1和图2可知，模型对 照组的脂肪指数和脂肪细胞体积，都极显著地高于另外三组（p<0.01 ）, 高剂量组的脂肪细胞体积显著低于正常对照组（P <0.05） o表明该减肥茶能加快大鼠体内脂肪组织的 氧化分解速度，使脂肪细胞变小此结果与体外促 进激素敏感性脂肪酶活性试验的结果相符，由此也进 一步证实了该减肥茶加速脂肪动员的作用233复合减肥茶对营养肥胖型大鼠血脂水平的影响表4的数据表明，复合减肥茶有明显地降低营养肥 胖型大鼠血清胆固醇（TC ）和甘油三酯（TG）水平的作用2.4复合减肥茶及其四种组分对小鼠胃肠蠕动的影响 为进一步探讨减肥茶的作用机理，分别采用III 楂、荷叶、乌龙茶、泽泻及复合减肥茶进行了小鼠 胃肠蠕动试验由表5可见，荷叶、泽泻和复合减 肥茶都能极显著地促进小鼠的胃肠蠕动，从而加速食 物在肠道的运行，减少食物中热能营养素的消化吸 收此作用能弥补或减轻因复合减肥茶促进胰脂酶活 性 而 带 來 的 负 面 影 响2.5减肥机理的探讨山楂、荷叶、乌龙茶等是本复合减肥茶的主要 组成山楂黄酮类具有的降血脂作用已为外许多研究 所证实林秋实［6］等指出，山楂黄酮主要是通过调节 大鼠肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)转录水平和提高抗 氧化能力，抑制脂质过氧化预防脂质代谢紊乱。

余 以刚［7］、杜力军［8］、许腊英［9］等的研究表明’荷叶生 物碱、黄酮类物质是其具降脂减肥作用的主要成分， 对实验性高血脂症大鼠和小鼠有明显抑制血脂作用 但这些成分对提高激素敏感性脂肪酶活性、促进脂肪 组织释放FFA所起的作用仍未见相关报道，尚待深入 探讨Han［10］(1999)、Nakahara ［ 11 ］ (1 99 3) > 奥田拓道 ［12］(2000)等人报道，乌龙茶咖啡因可以提高激素敏感 性脂肪酶的生物活性；多酚类化合物对葡萄糖昔酶和 蔗糖酶具有显著的抑制效果，能减少或延缓葡萄糖的 肠吸收，而电貳类化合物能有效地抑制胰脂酶的活 性本实验也证实了乌龙茶具有显著提高激素敏感性 脂肪酶活性和抑制胰脂酶活性的作用综上所述， 复合减肥茶是通过多种成分以各种方式影响机体脂肪 代谢从 I佃达至!J 减肥效杲 的3结论3.1从常见食纱同源植物中筛选出具有促进激素敏感性脂肪酶活性 的原料，确定了以山楂、乌龙茶、荷叶为主料，泽泻、决明子、绞股 蓝等为辅料配制成复合减肥茶3.2经动物试验表明，所研制的复合减肥茶可明显地提高激索敏感性 脂肪酶活性，加速脂肪动员和促进胃肠的蠕动3.3减肥试验显示，本产品能显著地抑制营养肥胖型大鼠体重的增 加，减小脂肪细胞的体积，减轻体内脂肪质量和降低血脂水平，具有 较好的减肥效果。