定量数据处理流程-xcalibur1.pdf

1 Xcalibur 定量数据处理流程定量数据处理流程定量数据处理流程定量数据处理流程 点击桌面上的 图标，进入 Xcalibur 工作站的主界面 点击，进入处理方法设置界面： 2 选择菜单“Options”选项中的“Calibration Options” ，见下图： 出现如下对话框： 3 选择定量方法：Inernal standard （内标法）或 External standard （外标法） （注：软件默认 为内标法，本教材示例为外标法，选择 External standard） ，出现如下对话框，提示方法更改 为外标法： 点击“OK” 点击，打开一张标准品的数据文件： 4 在界面左下窗口出现总离子流图，开始设置各参数： 在“Identification”中，设置提取组分色谱峰的相关参数： Name：键入组分名称 Detector：选择 MS Filter：下拉选择对应组分的 Scan Event Mass(m/z)：键入定量子离子的质荷比 Peak Detect：选择色谱峰积分方式 ICIS 或 Genesis Retention Time 栏： Expected(min)：键入组分的保留时间 Window(sec)：可容忍的时间偏差窗口 View Width(min)：色谱图可视时间宽度 点击“OK” ，组分 Fluometuron 的色谱峰被提取出来，变为灰色，见下图 5 在“Detection”中，设置色谱峰积分参数： 在“ICIS Peak Integration”中，设置各积分参数，让色谱峰积分合理，见上图 Smoothing Points：键入平滑点数 Baseline Window：基线宽度 Area Noise Factor：面积噪音 Peak Noise Factor：峰噪音 在“ICIS Peak Detection”中，设置其他参数： 选择“Nearest RT” Min Peak Height(S/N)：键入最小峰高 点击“OK” ，进入“Calibration”界面，设置“Calibration”参数： 6 Component Type：若为外标法，该组分只能定义为 Target Compound（目标待测物） ； 若为内标法，选择该组分是 Target Compound 或 ISTD（内标物） ISTD：若为内标法， “Amount”中键入内标物加入的量， “Unit”中键入内标物的单位，若 为外标法，此处不可选。

Target Compound：若为内标法，在 ISTD 中下拉选择待测物对应的内标物；若为外标法，此 处不可选 Calibration Curve Type：Linear（线性回归） Origin：选择忽略原点，强制过原点，包含原点 Response：Area（面积） Weighting：Equal（权重） 点击“OK” ，进入“Level”界面，设置“Level”参数： 设置标准曲线的几个浓度点：在“Cal Level”中键入每个浓度点的标示（可用任意数字或字 母） ，在“Amount”中键入每个水平的浓度 如果有 QC 样品，在“QC Level”中键入 QC 样品的浓度水平，并在“Amount”中键入每个 水平的浓度， “%Test”键入占测试样品的比例 点击“OK” ， 组分 Fluometuron 的设置完成 回到“Identification”界面，若为多组分定量，在“Name”中下拉选择“New” （如下左图） ， 进入空白界面，按照以上设置 Fluometuron 的步骤设置另一个待测组分的定量方法待所有 组分均设置好后，右侧的 Component 栏中就会列出所有待测组分，如下右图： 7 点击，定义文件的存储路径及文件名，保存 process method。

回到 Xcalibur 工作站的主界面，点击，进入序列表的编辑界面： 可调用之前进样时的序列， 也可以手动将要处理的数据逐一添加至序列表 在 “Sample Type” 中下拉选择样品的类型（Std Bracket：标准品，Unkown：未知样，Blank：空白，QC：质控 样品） ，在“Proc Meth”中调入之前保存的 process method，在“Level”中下拉选择每个标 准品对应的 Level，在“File”菜单栏选择“Save as”存储此序列文件 点击，在跳出的对话框中勾选“Quan”中的几项，见下图： 点击 OK，开始进行数据批处理，此时会出现图标，待该图标消失，批处理完成 8 回到 Xcalibur 工作站的主界面，点击，进入定量浏览界面： 跳出一个对话框，调出以上存储的序列文件（如下图） ，点击“Open” 跳出如下对话框： 选择“Show All sample type” ，定量处理完成，见下图： 9 。