(标准格式)遗传学实验指导(共33页).doc

精选优质文档-----倾情为你奉上《遗传学》实验指导书适用专业(农学、园艺、中草药等)前 言遗传学实验是为了配合遗传学的教学而开设的一门非独立性设课的实验课程要求学生根据所掌握的理论基础和实验技能，独立完成实验操作，并撰写实验报告本课程由验证性、操作性和综合性等多层次实验内容构成，主要从个体、细胞、分子三个水平揭示遗传学的基本现象与规律通过本课程的学习，使学生加深对遗传学基础理论和原理、遗传学试验技术和分析方法的理解和掌握、验证遗传学理论，并通过综合性、设计性实验研究，培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力和初步独立进行科学研究的能力　　　本实验指导包括各类实验9个，共28学时，必做14学时，选做14学时，可以根据学时数和具体情况，酌情选择此外还有附录四个，供教师准备实验时参考至于一些分子水平上的实验技术，限于时间而未收集，有待以后补充实验要求一、实验前预习实验指导书并复习有关内容；准备好实验报告纸、铅笔、橡皮、尺子、钢笔(或圆珠笔)等；二、按实验指导及教师的要求进行观察、记载，写好实验报告字迹要整洁、清楚绘图一律用铅笔，解答用兰色或黑色圆珠笔书写三、爱护实验仪器、设备，注意节约药品和各种实验材料；按操作规程使用仪器，严禁私自拆卸仪器及调整仪器附件，如有损坏，照价赔偿。

四、注意安全，严格遵守操作规程，如遇特殊情况应及时报告指导教师五、保持实验室安静，不得在实验室内喧哗实验完毕后，将实验用品放回原来位置,打扫卫生目 录实验一：植物细胞有丝分裂的制片与观察························································4实验二：植物细胞减数分裂的制片及观察························································6实验三：植物染色体组型分析··········································································8实验四：一对相对性状的遗传分析·········································· ·············11实验五：两对相对性状的遗传分析··································································14实验六：植物多倍体的诱发及细胞学鉴定·······················································15实验七：数量性状的遗传分析·········································································17实验八：蛋白质遗传标记分析·········································································21实验九：人类性状的遗传分析·········································································2310、实验报告基本内容要求············································································ 2511、实验报告格式···························································································26实验一：植物细胞有丝分裂的制片与观察实验学时：3学时实验类型：综合 实验要求：必做一、实验目的：掌握植物细胞有丝分裂的制片方法，并通过植物细胞有丝分裂制片的观察，熟悉有丝分裂的全过程，以及各个时期染色体的形态特征。

二、实验内容：植物细胞有丝分裂的制片和观察三、实验原理、方法和手段：有丝分裂是生物体细胞增殖的主要方式在有丝分裂过程中，细胞核内染色体能准确地复制，并能有规律地均匀分配到每个子细胞中去，使子细胞遗传组成与母细胞完全一样，从而可以准确地推断生物性状的遗传与染色体的准确复制和均等分配有关，支配生物性状的遗传物质主要存在于细胞核内的染色体上 细胞有丝分裂是一个连续过程，可分为前期、中期、后期和末期有丝分裂在整个细胞周期中约占10%的时间，而其余大部分时间是处于细胞连续两次分裂之间的间期有丝分裂各时期染色体变化的特征： 前期：核内染色质逐渐浓缩为细长而卷曲的染色体，每一染色体含有两个染色单体，它们具有一个共同的着丝点；核仁和核膜逐渐模糊不明显 中期：核仁、核膜逐渐消失，各染色体排列在赤道板上，纺锤丝与染色体的着丝点相连，形成纺锤体染色体分散，鉴定形态、数目 后期：各染色体着丝点分裂为二，其每条染色单体也相应地分开，并各自随着纺锤丝的收缩而移向两极，每极有一组染色体，数目和原来的相同 末期：分开在两极的染色体各自组成新的细胞核，在细胞质中央赤道板处形成新的细胞壁，使细胞分裂为二，形成二个子细胞。

这时细胞进入分裂间期间期：在光学显微镜下，只看到均匀一致的细胞核及许多的丝状染色质实质上间期的核是处于高度活跃的生理生化的代谢阶段，为细胞分裂准备条件 高等植物有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点、幼叶等部位的分生组织根尖取材容易，操作和鉴定方便，故一般采用根尖作为观察有丝分裂的材料四、实验组织运行要求：主要通过教师讲解或多媒体演示，学生自己实际操作进行五、实验条件1、实验材料：蚕豆（2n=12）、洋葱（2n=16）根尖细胞永久制片蚕豆（2n=12）、洋葱（2n=16）2、仪器用具：冰箱、生物显微镜、镊子、培养皿、酒精灯、解剖针、载玻片、盖玻片等3、试剂：卡诺氏液、酒精、盐酸、醋酸洋红六、实验步骤1、取材：蚕豆根尖先将种子浸泡1天，待吸水膨胀后移到铺有几层吸水纸的培养皿内，上面盖两层湿纱布加少许水，置于18-20℃（黑暗）培养40-50小时待根长至1-2cm时，于上午10时左右剪取2、预处理：目的，获得中期分裂相较多的细胞，使染色体缩短，分散，便于压片观察预处理机理：阻止或破坏纺纺锤体微管的形成，使有丝分裂过程被抑制在分裂中期阶段，以便累积较多的处于分裂中期的分裂相；导致染色体高度浓缩、变短，利于染色体的分散。

方法1: 冷冻处理根尖放入盛蒸馏水的指形管中，置于冰水共存的冰瓶中，然后把冰瓶放到0—3℃的冰箱中处理24小时染色体数较多的实验材料可适延长时间（20—40小时），但需注意勿使材料结冰方法2: 药剂处理a. 0.01-0.2%秋水仙素溶液处理2-4hb .对二氯苯饱和水溶液处理3-4hc. 100ml对二氯苯饱和水溶液加1-2滴α-溴萘处理3-4hd. 0.002M8-羟基喹啉处理3-4h药剂处理时温度不能过高,以10-15℃为宜3、固定冲洗干净处理的材料用卡诺氏液（冰乙酸：无水乙醇=1：3或冰乙酸：氯仿：无水乙醇=1；3：6）固定24h可立即使用不立即使用，置于95%酒精30min后置入80%酒精中30min后于70%酒精，4℃下保存，若保存时间较长需要重新固定后再用以上三步实验员已做，我们从第4步开始做4、解离1）从培养皿里取出4-5条根置于表面皿中，用蒸馏水冲洗3-4次（废水入塑料杯）2）根洗净后，加入数滴1N盐酸于表面皿中，以浸泡住根为准3）用镊子夹住表面皿边缘在酒精灯上间歇式加热2-4分钟（发现盐酸溶液有气泡冒出时，立即远离火焰），用镊子尖夹根是否已经变软，若变软，则说明已解离好，否则继续解离。

乳白色，经解离，变化为透明状）5、染色1）将解离好的根用蒸馏水冲洗干净后，加几滴醋酸洋红于表面皿内，在灯上加热，注意来回快速往返或加热的同时，不要加热到沸腾状态，若沸腾马上停止加热增加根染色程度） 2）取一根已染过色的根放在载玻片上，用镊子夹取根尖1.5mm长度处，加一滴醋酸洋红染料，在火焰上来回烤几下 3）再加一滴1%的醋酸洋红溶液，盖上盖玻片用解剖针的反头垂直轻敲盖玻片，使根尖压成一薄层多余的染料用纸吸干）压片时注意不要再移盖片，否则会造成更多细胞生重叠反复加醋酸洋红染料->加热-敲片，最后形成薄雾状6、镜检：先用低倍镜观察，找到明显的分裂相后，再用高倍镜观察，并绘图注意对各时期的染色体行为的观察） 七、实验报告1、制出几张好片子，当堂验收，观察到明显的中期等分裂相进行绘图，加以文字说明2、对实验过程中出现的各种问题进行分析和讨论3、绘制有丝分裂各时期染色体的分裂相，实验二：植物细胞减数分裂的制片及观察实验学时：3学时实验类型：综合 实验要求：必做一、实验目的：掌握植物花粉母细胞减数分裂的制片方法，并通过对植物花粉母细胞减数分裂制片的观察，了解小孢子形成过程及减数分裂中染色体的变化情况，能够区分减数分裂各时期，掌握各期特征。

二、实验内容：植物细胞减数分裂的制片和观察三、实验原理、方法和手段：减数分裂: 是生物在性细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂.它包括连续两次的细胞分裂阶段:第一次分裂为染色体数目的减数分裂;第二次分裂为染色体数目的等数分裂.两次分裂可根据染色体变化的特点分为:前、中、后、末期，由于第一次分裂的前期较长，染色体变化比较复杂，故其前期又可分为五个时期在减数分裂的整个过程中，同源染色体之间发生联会、交换、分离，非同源染色体之间进行自由组合最终分裂为染色体数目减半的的四个子细胞从而发育为雌性或雄性配子（n），雌雄配子通过受精又结合成为合子，发育为新的个体，这样又恢复了原有的染色体数目（2n）由于不同雌雄配子染色体的重新组合，产生了大量的遗传变异，有利于生物的适应和进化 减数分裂各时期染色体变化的特征简述如下：第一次分裂：前期Ⅰ：可分为以下五个时期：1）细线期：核内染色体呈细长线状，互相缠绕，难以辨别成双的染色体2）偶线期：同源染色体相互纵向靠拢配对，称为联会这样联会了的一对同源染色体，称为二价体偶线期所表现的这一特征的时间很短，一般难以观察到3）粗线期：配对后的染色体逐渐缩短变粗，含有两条姐妹染色单体，这样一个二价体包含了四条染色单体，故又称为四合体。

在此期间各同源染色体的非姐妹染色单体间可能发生片段交换4）双线期：各对同源染色体开始分开，由于在粗线期非姐妹染色单体之间发生了交换，因而同源染色体在一定区段间出现交叉，此期可清楚地观察到交叉现象5）终变期：染色体更为浓缩粗短，交叉结向二价体的两端移动，核仁和核膜开始消失此时各二价体分散在核内，适于计数染色体的数目中期Ⅰ：核仁和核膜消失，所有二价体排列在赤道板两侧，细胞质里出现纺锤体，每个二价体的两条染色单体的着丝点分别趋向纺锤体的两极，此时最适染色体计数、观察形态特征后期Ⅰ：二价体中的一对同源染色体开始分开在纺锤体的作用下分别向两极移动，完成染色体数目的减半过程此期，同源染色体的两个成员必然分离，非同源染色体间的各个成员以同等机会随机结合，分别。