食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌.ppt

食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验GB/T4789.40-2008曾 静北京出入境检验检疫局2009.3.20阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008一、一、采标情况采标情况采标情况采标情况二、适用范围二、适用范围二、适用范围二、适用范围三、操作过程三、操作过程三、操作过程三、操作过程1 1 1 1 第一法第一法第一法第一法 阪崎肠杆菌的检验阪崎肠杆菌的检验阪崎肠杆菌的检验阪崎肠杆菌的检验2 2 2 2 第二法第二法第二法第二法 阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008一、采标情况一、采标情况第一法 修改采用ISO /TS 22964. 2006《乳和乳制品中阪崎肠杆菌》第二法 修改采用FDA《婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分离和计数》阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008一、采标情况一、采标情况本标准与本标准与ISOISO方法的主要区别：方法的主要区别：—— 培养温度由培养温度由35 ℃35 ℃±±1 ℃1 ℃改为改为36℃36℃±±1 ℃ 1 ℃ ；；——阪崎肠杆菌选择性培养基由阪崎肠杆菌选择性培养基由ESIAESIA改为改为DFIDFI，，培养温度由培养温度由44 ℃44 ℃±±1 ℃1 ℃改为改为36℃36℃±±1 ℃1 ℃ ；；—— 增加了第二法，作为阪崎肠杆菌的增加了第二法，作为阪崎肠杆菌的MPNMPN定量定量检验方法检验方法阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008二、适用范围二、适用范围 适用于婴幼儿配方奶粉、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验阪崎肠杆菌介绍阪崎肠杆菌介绍阪崎肠杆菌阪崎肠杆菌（（EnterobaterEnterobater sakazakiisakazakii）属肠杆菌科肠杆）属肠杆菌科肠杆菌属，革兰染色阴性杆菌。

阪崎肠杆菌在自然界分布菌属，革兰染色阴性杆菌阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，繁殖迅速，但不耐热，可通过巴斯德消毒法杀广泛，繁殖迅速，但不耐热，可通过巴斯德消毒法杀灭阪崎肠杆菌属条件致病菌，在一般情况下，不对灭阪崎肠杆菌属条件致病菌，在一般情况下，不对人体健康产生危害，但对于免疫力低下者和婴幼儿、人体健康产生危害，但对于免疫力低下者和婴幼儿、新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病感染来新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病感染来源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉，人与人之间无传源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉，人与人之间无传染性染性 阪崎肠杆菌介绍阪崎肠杆菌介绍 临床表现临床表现临床表现临床表现n n　多数患儿临床症状轻微且不典型，易被忽略严重者可引起坏死性　多数患儿临床症状轻微且不典型，易被忽略严重者可引起坏死性小肠结肠炎、败血症、脑膜炎等小肠结肠炎、败血症、脑膜炎等 （一）全身症状：发热，新生儿可表现为体温不升、精神萎靡、拒乳、（一）全身症状：发热，新生儿可表现为体温不升、精神萎靡、拒乳、黄疸加重，面色发灰、皮肤发花甚至出现休克黄疸加重，面色发灰、皮肤发花甚至出现休克。

（二）消化系统症状：可有呕吐、腹胀、腹泻、粘液血便，肠鸣音减（二）消化系统症状：可有呕吐、腹胀、腹泻、粘液血便，肠鸣音减弱甚至消失，严重时可发生肠穿孔和腹膜炎弱甚至消失，严重时可发生肠穿孔和腹膜炎 （三）神经系统症状：烦躁、哭声尖直、嗜睡甚至昏迷，可出现凝视、（三）神经系统症状：烦躁、哭声尖直、嗜睡甚至昏迷，可出现凝视、惊厥，查体可有头围增大、颅缝裂开、前囟张力增高、脑膜刺激征阳惊厥，查体可有头围增大、颅缝裂开、前囟张力增高、脑膜刺激征阳性 阪崎肠杆菌介绍阪崎肠杆菌介绍易感人群易感人群: 免疫力低下者和婴幼儿、新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病感染来源主要是受阪崎肠杆菌污染的奶粉，人与人之间无传染性 阪崎肠杆菌介绍阪崎肠杆菌介绍1 1、阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，在水、土壤、食、阪崎肠杆菌在自然界分布广泛，在水、土壤、食物、排泄物等中都能够检出细菌不耐热，加热到物、排泄物等中都能够检出细菌不耐热，加热到72℃72℃持续持续1515秒就可以杀灭细菌不在人与人之间传播秒就可以杀灭细菌不在人与人之间传播2 2、阪崎肠杆菌在一般情况下不对人体健康产生危害，、阪崎肠杆菌在一般情况下不对人体健康产生危害，但对于新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病。

但对于新生儿，尤其是早产儿、低体重儿可以致病3 3、绝大多数患者为轻症病例，表现为轻微的消化道、绝大多数患者为轻症病例，表现为轻微的消化道症状，恢复良好；重症病例罕见但病死率高对于发症状，恢复良好；重症病例罕见但病死率高对于发现的病例应及时报告现的病例应及时报告 阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008三、操作流程三、操作流程第一法第一法 阪崎肠杆菌阪崎肠杆菌的检验的检验36℃±1 ℃ 18 h ± 2 h44℃±0.5 ℃ 24 h ± 2 h36℃±1 ℃ 24 h ± 2 h25℃±1 ℃ 48 h ± 4 h阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008阪崎肠杆菌在阪崎肠杆菌在三种选择性培养基上的特征ESIA CES DFI 5.2 分离：阪崎肠杆菌在选择培养基上的特征菌落阪崎肠杆菌在选择培养基上的特征菌落DFI 培养基阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008n n5.35.3鉴定鉴定 ：可用：可用API20EAPI20E或或VITEKVITEK进行鉴定进行鉴定n n5.4 5.4 报告：报告报告：报告100g100g（（mLmL）中检出或未检出阪）中检出或未检出阪崎肠杆菌崎肠杆菌阪崎肠杆菌检验阪崎肠杆菌检验GB/T 4789.40-2008三、操作三、操作第二法第二法第二法第二法 阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数阪崎肠杆菌的计数6.1 6.1 6.1 6.1 样品的稀释样品的稀释样品的稀释样品的稀释 ：固体或半固体样品，无菌称取样品：固体或半固体样品，无菌称取样品：固体或半固体样品，无菌称取样品：固体或半固体样品，无菌称取样品100g,100g,100g,100g,、、、、10g10g10g10g和和和和1g1g1g1g样品各样品各样品各样品各3 3 3 3份，加入到预热到份，加入到预热到份，加入到预热到份，加入到预热到44℃44℃44℃44℃的的的的900mL900mL900mL900mL、、、、90mL90mL90mL90mL和和和和9mL9mL9mL9mL的的的的BPWBPWBPWBPW培养液中，培养液中，培养液中，培养液中，36℃±1 ℃，培养培养培养培养 18 h ± 2 h6.3 报告：根据阳性管数查报告：根据阳性管数查报告：根据阳性管数查报告：根据阳性管数查MPNMPNMPNMPN表，报告每表，报告每表，报告每表，报告每100g(mL)100g(mL)100g(mL)100g(mL)样品样品样品样品MPNMPNMPNMPN数。