《鬼笔环肽》.docx

鬼笔环肽学术资料鬼笔环肽主要用丁的实验鬼笔环肽是F-actin微丝蛋白研究的首选，通过检测组织切片，培养细胞和无细胞体系中的actin的定位，研究人员可以研究细胞的内部工作机制，窥视细胞如何分裂通过这些观察，他们可以揭开癌症工作机制和组织生长之谜鬼笔环肽主要用丁F-actin微丝蛋白在细胞内的定位实验,显示细胞中微丝的分布，可用丁活细胞和固定细胞荧光标记（例如：AlexaFluor488,AlexaFluor555和FITC等）的鬼笔环肽在纳克水平就可与F-actin选择性的结合并且易溶丁水，荧光标记的鬼笔环肽可发出高亮度、稳定的荧光，通过荧光显微镜可以观察到荧光图，在图上可以看标记的荧光在细胞中位置观察actin的定位点，例如:AlexaFluor488标记的鬼笔环肽，看绿色荧光在细胞内哪个位置就可以知道F-actin微丝蛋白在细胞中的定位绿色丝状物即与标记AlexaFluor488的鬼笔环肽结合的F-actin微丝蛋白，看他在细胞的位置可知F-actin微丝蛋白在细胞内的定位，显示细胞中微丝的分布，可知细胞的分裂，运动，变形的情况二F-actin微丝蛋白简介肌动蛋白单体（乂被称为G-Actin，全称为球状肌动蛋白，GlobularActin，下文简称G肌动蛋白）为球形，其表面上有一ATP结合位点。

肌动蛋白单体一个接一个连成一申肌动蛋白链，两申这样的肌动蛋白链互相缠绕扭曲成一股微丝这种肌动蛋白多聚体乂被称为纤维形肌动蛋白（F-Actin,FibrousActin微丝（microfilaments）是由肌动蛋白分子螺旋状聚合成的纤丝，乂称肌动蛋白丝（actinfilament）,与微管和中间纤维共同组成细胞骨架，是一种所有真核细胞中均存在的分子量大约42kDa的蛋白质，也是一种高度保守的蛋白质，因物种差异（例如藻类与人类）的不同不会超过20%微丝对细胞贴附、铺展、运动、内吞、细胞分裂等许多细胞功能具有重要作用，做这些细胞功能实验时可以用到鬼笔环肽微丝的主要功能有：微丝聚集成束，沿平行丁胞质环流的方向排列，控制细胞的胞质环流三标记荧光的鬼笔环肽的卖点1）与actin业单位一比一结合，并且不与G-actin结合，具有比Actin抗体更好的染色效果，实验结果图鲜艳，美观；2）且本品的结合没有物种差异性，适用性广泛；3）鬼笔环肽标记的非特异性信号可忽略，因而图像的反差较好；4) 染色与用丁细胞分析的其他荧光染色完全兼容，包括荧光蛋白、Qdot?纳米晶体和其他AlexaFluor偶联物(包含AlexaFluor偶联5) 经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。

1. 五参考文献LinG,QiuX,FandelTM,AlbersenM,Wang乙LueTF,LinCS.(2011)Improvedpenilehistologybyphalloidinstain:circularandlongitudinalcavernoussmoothmuscles,dual-endotheliumarteries,anderectiledysfunction-associatedchanges.Urology,78,970e1.2. DiensthuberRP,MullerM,HeisslerSM,TaftMH,ChizhovI,MansteinDJ.(2011)Phalloidinperturbstheinteractionofhumannon-musclemyosinisoforms2Aand2C1withF-actin.FEBSLett,585,767.3. AnM,WijesingheD,AndreevOA,ReshetnyakYK,EngelmanDM.(2010)pH-(low)-insertion-peptide(pHLIP)translocationofmembraneimpermeablephalloidintoxininhibitscancercellproliferation.ProcNatlAcadSciUSA,107,20246.ChazotteB.(2010)LabelingcytoskeletalF-actinwithrhodaminephalloidinorfluoresceinphalloidinforimaging.ColdSpringHarbProtoc,2010,pdbprot4947.4. GenikhovichG,TechnauU.(2009)Anti-acetylatedtubulinantibodystainingandphalloidinstaininginthestarletseaanemoneNematostellavectensis.ColdSpringHarbProtoc,2009,pdbprot5283.5. HerraezE,MaciasRI,Vazquez-TatoJ,VicensM,MonteMJ,MarinJJ.(2009)InvitroinhibitionofOATP-mediateduptakeofphalloidinusingbileacidderivatives.ToxicolApplPharmacol,239,13.6. WollesenT,LoeselR,WanningerA.(2009)Pygmysquidsandgiantbrains:mappingthecomplexcephalopodCNSbyphalloidinstainingofvibratomesectionsandwhole-mountpreparations.JNeurosciMethods,179,63.7. HerraezE,MaciasRI,Vazquez-TatoJ,HierroC,MonteMJ,MarinJJ.(2009)Protectiveeffectofbileacidderivativesinphalloidin-inducedratlivertoxicity.ToxicolApplPharmacol,239,21.LuoH,Hallen-AdamsHE,WaltonJD.(2009)ProcessingofthephalloidinproproteinbyprolyloligopeptidasefromthemushroomConocybealbipes.JBiolChem,284,18070.8. VigA,DudasR,KupiT,OrbanJ,HildG,LorinczyD,NyitraiM.(2009)EffectofPhalloidinonFilamentsPolymerizedfromHeartMuscleAdp-ActinMonomers.JThermAnalCalorim,95,721.。