菊花的组织培养-学案.doc

菊花的组织培养-学案专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养导学案课题重难点：重点：“愈伤组织”、“脱分化”等概念；植物组织培养的过程；影响植物组培的因索难点：组织培养的实验操作课题日标：知识目标:1、 能准确说出“愈伤组织”、“脱分化”、“再分化”、“外植体”等概念2、 能说出植物组织培养的过程3、 知道影响植物组织培养的因素及其影响原理4、 了解植物组织培养的实验操作过程能力目标:1、 理解呢制母液的必要性，能利用提供的母液进彳J：MS|古|体培养基的恻制2、 能规范、准确的进行外植体消毒、接种等操作3、 尝试对自己所得培养结果进行评价，分析成功或失败的原因情感、态度、价值观1=1标：1、 通过菊花组织培养的实验，培养严谨科学的实验作风2、 体会生命之美，进一步激发学习生物的兴趣学习过程：第一课时一、基础知识： 植物组织培养技术:指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞等，并使其生长、增殖、分化以 及再生长成植株的技术1、植物组织培养的基木过程：知识回顾:1） 细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在的过程；细胞分化的原因是2） 植物组织培养的原理是，即新知拓展：1） 离体的植物组织或细胞，在培养了一•段时间以后，通过形成，其特点有。

2） 由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，被称为细胞的3） 将愈伤组织继续进行•培养，又可以重新分化出叫4） 归纳植物组织培养的基木过程：21）外植体的选取：1不同的植物组织，培养的难易程度差别很人；对于同一种植物材料，材料的等也会影 响实验结果对于菊花的组织培养，一般选用2）培养基的营养条件：知识冋顾：培养微生物的培养基一般含有、、、等物质，有的还需加入新知拓展：进行植物组织培养常使用培养基，其主要成分包括：人量元索，如微量元索，如有机 物，如；往往还需要添加植物激索，如3）植物激素的浓度、使用先后顺序及用量比例等:知识冋顾:生长素的作用：；细胞分裂素的作川：新知拓展:使用顺序实验结果先用生长索，后用细胞分裂索先用细胞分裂素，后用生长索同时使用生长索/细胞分裂索植物细胞的发育方向比值高比值低比值适中4）其他环境条件：除了上述因素外，、、等坏境条件也很重要，进行菊花组织培养时，一•般将pll控制 在，温度控制在，并且每日用日光灯照射第二课时二、实验操作：说明：由于菊花要9月上市，本实验用胡萝卜的形成层代替菊花茎段进行实验，在激索 用量、接种操作、培养条件等方面与菊花的组织培养略有差异。

胡萝卜的组织培养操作流程：1、制备MS固体培养基：（参见课本84页MS培养基配方）1）配制各种母液：（教师L1配好）母液1：人量元索10倍浓缩液1000ml配制方法:分别称取16.5g硝酸讓、19g硝酸钾、1. 7g磷酸二氢钾、3・7g硫酸 镁、4.4g氯化钙,用无菌水定容至1000ml；母液2：螯合铁盐母液1000ml配制方法:分别称取5.57g硫酸亚铁、7. 45g乙二胺四乙酸二钠，用无菌水定容 至1000ml，配制1000mIMS培养基时,取5m 1螯合铁盐母液；母液：3：微量元素1000倍浓缩液1000ml配制方法：分别称取g碘化钾、glfl酸钠、g硫酸铜、g氯化钻，用无菌水定 容至 1000ml；2母液4：有机物100倍浓缩液1000ml配制方法：分别称取g甘氨酸、维生素B1、呂维生索B6、g烟酸、g肌醇， 用无菌水定容至1000ml；母液5：植物激素母液1000ml配制方法：分别称取0. 2g生长索类似物2, 4-D, 0. 15g细胞分裂索类似物KT, 用蒸他水定容至1000ml, K制IOOOiiiIMS培养基时，取10ml植物激素母液2） 利川母液配制固体培养基：（学生分组操作，每组配制500nilMS培养基，母液用量 参照上一步）用托盘天平称取呂蔗糖和g琼脂，放入500ml锥形瓶中，用量筒依次景取 母液1 ml.母液2 ml.母液4 ml、母液5 ml,再用微量移液器（枪）取母液3 ml均置 于L1放入蔗糖和琼脂的锥形瓶川，用无菌水定容至500m 1 o最后，利用pH试纸检测培养基 溶液的pH,用HC1或NaOH溶液将培养基pH调至5. &3） 灭菌：（教师完成）2、外植体消毒：（学生分组操作）用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做。

1） 流水冲洗：用流水冲洗老师提供的胡萝卜外植体，在冲洗过程中用牙刷轻轻刷洗，约2min；2） 酒精消毒：用吸水纸吸T外植体表面的水分，放入体积分数的酒楮中摇动次，持续s；酒粘消毒 后立即将外植体取出，在中清洗；3）氯化汞消毒:清洗后用吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为的氯化汞中1-加in；注意：氯化汞有毒，操作后应立即洗手，严防氯化汞入口！4）无菌水漂洗：取出后，在无菌水中至少清洗次，漂净消毒液将消毒后的外植体放入指定容器中备 用3、 接种：（学生分组操作）1） 教师在接种前lOmin打开超净工作台紫外灯，对其进行灭菌；2） 学生操作前丿应在老师指导下关闭紫外灯，打开普通光源，准备接种；接种前用体积 分数为70%的酒精将工作台和操作者的双于擦拭一遍，擦拭完后，点燃酒精灯；3） 在超净工作台上垫一张无菌滤纸，将刀片在酒精灯上灼烧进行灭菌，用火菌过后的 刀片在滤纸上将之前消毒过的胡萝卜外植体切成约1mm厚度的薄片；4） 将装有培养基的锥形瓶排列在酒蒂灯左侧，左手持锥形瓶，右手拉开捆扎锥形瓶的 绳子，并将封口膜攥于右于手心，以避免封口膜接触瓶口的一曲被污染左右持瓶，使瓶 口旋转通过火焰，右于用银子夹取切好的小圆片放入培养基小（银子使用前应进行灼烧火 菌），每瓶约接种5片小圆片；5） 接种后，将封口膜重新扎好，并在锥形瓶上做好标记。

4、 培养:接种后的锥形瓶放在无菌光照培养箱中进行培养，温度控制在25C,在黑暗中进行培 养；若是进行菊花的组织培养应将温度控制在C,并且每日用光照照射ho5、 移栽：在移栽Z前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养箱中生长儿日然后用流水清 洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛙石或者珍珠岩等环境下牛活一段时间，等幼苗 长壮后再移栽到土壤中6、 栽培：将幼苗移栽后，每天观察记录幼苗生长情况，适时浇水、施肥、直至花开习题巩固:1、 愈伤组织分化过程中，当培养基中细胞分裂索川量/生长索川量的值较高时，诱导分 化的器官是（）A.根B.芽C.叶D.胚性细胞团2、 下列植物细胞的全能性在提供了适宜条件的情况下，最易表达的是（）A.枝条上的一个芽B.柱头上的花粉C.胚珠中的珠被细胞D.根尖分生区细胞3、 将一粒花粉培育成幼苗，对它的茎尖用秋水仙素处理，长人后该植株正常开花结果. 该植株的下列哪种细胞与其它细胞染色体数1=1不相同（）A.根细胞B.叶细胞C.花粉细胞D.卵细胞4、 要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（）A.具有完整细胞核的细胞B.离体状态C.导入外源基因D.—•定的营养物质和激索5、 用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述鉛 误的是（）A.细胞经过脱分化和分裂形成的B.细胞没有全能性C.由排列疏松的薄壁细胞组成D.可以形成具令生根发芽能力的胚状结构6、 下血儿种说法中，正确的是（）A.叶肉细胞脱分化麻形成无圧形状态的薄壁细胞B.叶肉细胞经再分化过程形成愈伤组 织C.融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜D.叶肉细胞离体培养时，不可以表现出全 能性7、 以下不能说明细胞全能性的实验是（）A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植株B.紫色糯性王米种子培育出植株C.转入抗虫基因的棉花细胞培育岀植株D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株8、 下图是植物组织培养的简略表示。

请据此冋答：（1）①表示，它能被培养成为④的根木原因是（2） ②表示—,它的特点是（3） 若①是胡萝卜根尖细胞，贝I」培养成的④的叶片颜色是4） 若①是花粉则④是这说明了根尖细胞4。