实验六 植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定.docx

本文格式为Word版，下载可任意编辑实验六 植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定 测验六 植物多倍体的诱导及其细胞学鉴定 一、测验目的 通过测验掌管植物多倍体的方法和技术，查看多倍体的特点及染色体加倍后的细胞学表现利用染色体分析的方法对多倍体的细胞作出切实判断 二、测验原理 生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的根本特征之一多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体自然界中有大量植物是多倍体，也是变异发生的重要途径之一多倍体在形态较二倍体植物个体大，叶片上的气孔也很大，较易辩认多倍体研究在育种具有重要的意义利用一些诱发因素可以人工诱导植物产生多倍体这些因素包括物理的因素、化学因素等其中最为有效是化学药品是秋水仙素，秋水仙素colchicine（C22H25O6N）是1937年察觉的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱能够抑制细胞有丝分裂时形成的纺锤体，染色体虽然完成了复制，但是不能形成两个子细胞，因而使染色体的数目加倍含加倍的染色体的体细胞再分裂出来的子细胞，染色体数目都比原来的体细胞增加了一倍，就形成了一个多倍体植株。

三、测验试剂和用具 秋水仙素：0.02%、0.05%、0.1%浓度 卡诺固定液：3份95％酒精与1份冰醋酸配制而成 龙胆紫溶液：将0.5克龙胆紫溶解在100毫升，2％醋酸溶液中配制成0.5％龙胆紫溶液 醋酸洋红溶液：将1克洋红与100毫升冰醋酸混合后煮沸，煮时可加锈铁钉一枚，略具铁质的1％醋酸洋红染液能巩固染色效果 搪瓷盘、镊子、剪刀、烧杯、培养皿、恒温水浴锅、纱布、试管 四、测验材料 催芽的玉米种子、玉米幼苗 五、测验方法 （一）玉米种子的处理和检测 （1）玉米种子的处理：浸泡催芽的水稻种子的秋水仙素浓度为0.02%、0.05%、0.1%，浸泡时间为12h、24h、48h浸泡后用蒸馏水冲洗三次，持续用培养皿培养一周 （2）、多倍体检测：剪取根尖（或胚芽）2-3mm,投入盛有10%HCL的培养皿中解离10min，再清水漂系2次将漂洗后的根尖（或胚芽）放入0.5％龙胆紫溶液或1％醋酸洋红溶液中染色3-5min，制片，然后镜检查看染色体的倍性记录结果（表6-1） 表6-1 玉米种子检测结果统计 秋水仙素12h 24h 48h 浓度 处理粒数 多倍体粒数 处理粒数 多倍体粒数 处理粒数 多倍体粒数 0.02% 0.05% 0.1% （二）玉米幼苗和处理和检测 （1）玉米幼儿苗的处理 在玉米幼苗的幼芽长到3-5mm时，用解剖刀在芽上作一纵切，然后用一浸有秋水仙素(0.02%浓度)溶液的纱布条包在切口处,纱布条的另端浸在一个盛有秋水仙素水溶液的小烧杯内, 烧杯的口用封口膜封好以防处理液蒸发,处理12h.隔天后再处理1次,然后将幼苗洗明净,种到花盆内或地里。

同时种植没有处理过的幼苗作为对照 （2）形态查看和细胞学鉴定：对比处理与对照的外部形态有什么差异，将叶面的表皮撕下，在显微镜下查看，多倍体植物的气孔比二倍体大好多，叶片也对比肥厚 用根尖压片法制成染色体载玻片标本，在显微镜下专心查看和计数，与对照举行比较 六、留神事项 1、本测验所用的秋水仙素溶液具有强致癌性，请在使用过程中务必留神安好，尤其是不能乱倒废液 2、由于本测验涉及的时间较长，应专心记录各时期植物变化处境 七、作业及斟酌题 1、与对照植物相比，处理后的植物有哪些不同特征？ 2、使用秋水仙素诱导多倍体应留神哪些问题？ — 3 —。