DNA重组技术课件.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,定向基因改造设想,设想一,能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？,能否让细菌“吐出”蚕丝？,设想二,能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？,设想三,基因工程,基因工程的别名,操作环境,操作对象,操作水平,基本过程,结果,基因拼接技术或DNA重组技术,生物体外,基因,DNA分子水平,人类需要的基因产物,剪切,拼接,导入,表达,什么叫基因工程？,基因工程需要哪些基本工具?,培育抗虫棉需要哪些工具？,分子手术刀限制性内切酶,分子缝合针DNA连接酶,分子运输车运载体,第1节DNA重组技术的基本工具,一、限制性核酸内切酶,思考,在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中我们有没有学过相关的实例？,细菌为什么不会因外源DNA的入侵而灭绝？,识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中,特定部位,的两个核苷酸之间的,磷酸二酯键,断开主要是从,原核生物,中分离纯化出来的一种酶4000种1、来源：,2、种类：,3、作用：,4、结果：,形成两种末端,一、“分子手术刀”限制性核酸内切酶,黏性末端,平末端,内切酶切割DNA后形成的末端黏性末端、平末端是如何形成的？,什,么,么,叫,叫,黏,黏,性,性,末,末,端,端,？,？,什,么,么,叫,叫,平,平,末,末,端,端,？,？,限,制,制,酶,酶,存,存,在,在,于,于,原,原,核,核,细,细,胞,胞,中,中,的,的,作,作,用,用,是,是,什,什,么,么,？,？,为,为,什,什,么,么,限,限,制,制,酶,酶,不,不,剪,剪,切,切,细,细,菌,菌,本,本,身,身,的,的DNA,？,？,二,、,、,连,连,接,接,酶,酶,“,“,分,分,子,子,缝,缝,合,合,针,针,”,”,.,作,作,用,用,：,：,连,连,接,接,磷,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,限,制,制,酶,酶,切,切,割,割,后,后,产,产,生,生,两,两,种,种,不,不,同,同,的,的,末,末,端,端,。

那,那,么,么,恢,恢,复,复,它,它,们,们,的,的,连,连,接,接,时,时,，,，,所,所,用,用DNA,连,连,接,接,酶,酶,是,是,否,否,可,可,以,以,不,不,加,加,选,选,择,择,？,？,E.coliDNA,连,连,接,接,酶,酶,：,：,连,连,接,接,黏,黏,性,性,末,末,端,端,T,4,DNA,连,连,接,接,酶,酶,：,：,连,连,接,接,黏,黏,性,性,末,末,端,端,和,和,平,平,末,末,端,端,.DNA,连,连,接,接,酶,酶,的,的,种,种,类,类,DNA,聚,聚,合,合,酶,酶,和,和DNA,连,连,接,接,酶,酶,有,有,何,何,相,相,同,同,点,点,和,和,不,不,同,同,点,点,？,？,DNA连接酶,DNA聚合酶,连接DNA链,连接部位,相同点,双,链,链,单,链,链,在,两,两DNA,片,片,段,段,之,之,间,间,形,形,成,磷,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,将,单,单,个,个,核,核,苷,苷,酸,酸,加,加,到,已,已,存,存,在,在,的,的,核,核,酸,酸,片,段,段,的,的3,末,末,端,端,的,的,羟,基,基,上,上,，,，,形,形,成,成,磷,磷,酸,二,二,酯,酯,键,键,都,能,能,形,形,成,成,磷,酸,酸,二,二,酯,酯,键,键,二,者,者,都,都,由,由,蛋,蛋,白,白,质,质,构,构,成,成,假,如,如,目,目,的,的,基,基,因,因,导,导,入,入,受,受,体,体,细,细,胞,胞,后,后,不,不,能,能,复,复,制,制,将,将,怎,怎,样,样,？,？,作,为,为,载,载,体,体,没,没,有,有,切,切,割,割,位,位,点,点,将,将,怎,怎,样,样,？,？,目,的,的,基,基,因,因,是,是,否,否,进,进,入,入,受,受,体,体,细,细,胞,胞,，,，,你,你,如,如,何,何,察,察,觉,觉,？,？,如,果,果,载,载,体,体,对,对,受,受,体,体,细,细,胞,胞,有,有,害,害,将,将,怎,怎,样,样,？,？,三,、,、,基,基,因,因,进,进,入,入,受,受,体,体,细,细,胞,胞,的,的,载,载,体,体,“,“,分,分,子,子,运,运,输,输,车,车,”,”,1.,载,载,体,体,的,的,必,必,要,要,条,条,件,件,能,自,自,我,我,复,复,制,制,，,，或,能,能,进,进,入,入,受,受,体,体,生,生,物,物,细,细,胞,胞,并,并,在,在,受,受,体,体,生,生,物,物,细,细,胞,胞,内,内,复,复,制,制,并,并,表,表,达,达,；,；,有,切,切,割,割,位,位,点,点,有,遗,遗,传,传,标,标,记,记,基,基,因,因,对,受,受,体,体,细,细,胞,胞,无,无,害,害,、,、,容,容,易,易,分,分,离,离,比较容易,得,得到,能复制并,带,带着插入,的,的目的基,因,因一起复,制,制,有切割位,点,点,有标记基,因,因的存在,，,，可用含,青,青霉素的,培,培养基鉴,别,别。

常用的分,子,子运输车,有,有哪些？,小结,基因工程,的工具,限制酶,主要存在于原核生物中,具有专一性(识别序列),切开DNA分子的磷酸二酯键,DNA连,接酶,连接磷酸二酯键,种类,E.coliDNA连接酶,T,4,DNA连接酶,运载,工具,具备的,条件,结构简单,大小适中,能在宿主细胞中自,我复制并稳定存在,具一个多个限制酶切位点,具标记基因,质粒、,噬菌体衍生物、动植物病毒,1.在基,因,因工程中,，,，切割运,载,载体和含,有,有目的基,因,因的DNA片段，,需,需使用（,）,）,同种限制,酶,酶B.,两,两种限制,酶,酶,同种连接,酶,酶D.两,种,种连接酶,A,练习,2.不属,于,于质粒被,选,选为基因,运,运载体的,理,理由是,A、能复,制,制,（,（,）,）,B、有多,个,个限制酶,切,切点,C、具有,标,标记基因,D、它是,环,环状DNA,D,3.基,因,因工程是,在,在DNA,分,分子水平,上,上进行设,计,计施工的,在基因,操,操作的基,本,本步骤中,，,，不进行,碱,碱基互补,配,配对的步,骤,骤是,（,（,）,）,A、人工,合,合成目的,基,基因,B、目的,基,基因与运,载,载体结合,C、将目,的,的基因导,入,入受体细,胞,胞,D、目的,基,基因的检,测,测和表达,C,练习,大肠杆菌,的,的一种限,制,制酶（EcoR)能识别GAATTC序列,，,，并在G,和,和A之间,切,切开形成,黏,黏性末端,。

Sma,能,能识别CCCGGG序列，,并,并在C和G之间切,割,割形成平,末,末端T,磷酸二酯,键,键,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,A,演讲完毕,，,，谢谢观,看,看！,。