no.4如何测定原研品的多条特征溶出曲线.doc

附件一】 如何测得原研品多条特征溶出曲线指导原则—— 针对参与试验的药品检验所或生产企业一、 原研制剂的数量至少3~5批，其中1批至少200片，其他批可为100片每批含量均应在97.0%~103.0%二、 查询既有质量标准 检索该产品所有药典的质量标准、进口质量标准和相关文献（如美国FDA溶出曲线数据库：http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/dissolution/index.cfm和《日本橙皮书—— 多条溶出曲线数据库》：国家新药审评中心网站 → 主页右侧“日本药品体外溶出试验信息库”）三、 溶出介质的配制由于原研品在研发检测时，均是按照该国药典溶出介质配制法，故建议根据原研品国别，选用相应溶出介质，而不采用中国药典配制法如既有质量标准或文献有更为针对性的介质配制法，也可参照遵循各国药典缓冲液配制法具体如下：1. 欧洲药典配制法(1) pH1.0~2.2 盐酸溶液pH值1.0：精密量取盐酸溶液9.0ml，加水稀释至1000ml，摇匀，即得其他pH值溶液：量取一定体积的0.2mol/L盐酸液（量取盐酸18.0ml，加水稀释至1000ml，摇匀，即得），加水稀释至200ml，摇匀，即得。

pH1.21.31.41.51.61.71.81.92.02.12.20.2mol/L盐酸液(ml)85.067.253.241.432.426.020.416.213.010.27.8(2) pH3.8~5.8 醋酸盐缓冲液2mol/L醋酸溶液：取120.0g冰醋酸（经查，冰醋酸密度为1.049g/ml，故体积约为114ml），加水稀释至1000ml，摇匀，即得取下表中规定物质各量，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得pH3.84.14.34.54.74.95.15.25.35.45.55.8三水醋酸钠(g)0.671.51.992.993.594.345.085.235.615.765.986.232mol/L醋酸液(ml)22.619.517.714.011.89.16.35.84.43.83.02.1(3) pH4.5~8.0 磷酸盐缓冲液取6.80g磷酸二氢钾，加一定体积0.2mol/L氢氧化钠液（取8.0g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1000ml，即得）和适量水溶解后，再加水稀释至1000ml，摇匀，即得pH4.55.55.86.06.26.46.60.2mol/L氢氧化钠液（ml）09.018.028.040.558.082.0pH6.87.07.27.47.67.88.00.2mol/L氢氧化钠液（ml）112.0145.5173.5195.5212.0222.5230.52．美国药典配制法(1) pH1.0~2.2 盐酸/氯化钾溶液pH值1.0：精密量取盐酸溶液9.0ml，加水稀释至1000ml，摇匀，即得。

其他pH值溶液：量取0.2mol/L氯化钾溶液50ml，置200ml量瓶中，加入一定体积0.2mol/L盐酸液（量取盐酸18.0ml，加水稀释至1000ml，摇匀，即得），再加水稀释至刻度，摇匀，即得pH1.21.31.41.51.61.71.81.92.02.12.20.2mol/L盐酸液(ml)85.067.253.241.432.426.020.416.213.010.27.8(2) pH2.2~4.0 盐酸/苯二甲酸氢钾溶液称取2.04g苯二甲酸氢钾，加入一定体积0.2mol/L盐酸液和适量水溶解后，再加水稀释至200ml，摇匀，即得pH2.22.42.62.83.03.23.43.63.84.00.2mol/L盐酸液(ml)49.542.235.428.922.315.710.46.32.90.1(3) pH4.2~5.8 氢氧化钠/苯二甲酸氢钾溶液称取2.04g苯二甲酸氢钾，加入一定体积的0.2mol/L氢氧化钠溶液和适量水溶解后，再加水稀释至200ml，摇匀，即得pH4.24.44.64.85.05.25.45.65.80.2mol/L氢氧化钠液（ml）3.06.611.116.522.628.834.138.842.3(4) pH4.1~5.5 醋酸盐缓冲液<注> 通常采用该配制法。

2mol/L醋酸溶液：取120.0g冰醋酸（经查，冰醋酸密度为1.049g/ml，故体积约为114ml），加水稀释至1000ml，摇匀，即得取下表中规定物质各量，加水溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得pH4.14.34.54.74.95.15.25.35.45.5三水醋酸钠(g)1.51.992.993.594.345.085.235.615.765.982mol/L醋酸液(ml)19.517.714.011.89.16.35.84.43.83.0(5) pH5.8~8.0 氢氧化钠/磷酸二氢钾溶液取6.80g磷酸二氢钾，加一定体积0.2mol/L氢氧化钠液（取8.0g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1000ml，即得）和适量水溶解后，再加水稀释至1000ml，摇匀，即得pH5.86.06.26.46.60.2mol/L氢氧化钠液（ml）18.028.040.558.082.0pH6.87.07.27.47.67.88.00.2mol/L氢氧化钠液（ml）112.0145.5173.5195.5212.0222.5230.5(6) pH8.0~10.0 氢氧化钠/氯化钾/硼酸溶液称取0.75g氯化钾与0.62g硼酸，加入一定体积的0.2mol/L氢氧化钠溶液和适量水，溶解后再加水稀释至200ml，摇匀，即得。

pH8.08.28.48.68.89.09.29.49.69.810.00.2mol/L氢氧化钠液（ml）3.96.08.611.815.820.826.432.136.940.643.73．日本药典配制法(1) pH1.2溶液：取氯化钠2.0g，加水适量使溶解，加盐酸7ml，再加水稀释至1000ml，混匀，即得3) pH3.0～6.0介质：取十二水合磷酸氢二钠17.91g，加水溶解并稀释至1000mL，即得0.05mol/L的磷酸氢二钠溶液；另取一水合柠檬酸（亦称“枸橼酸”）5.25g，加水溶解并稀释至1000mL，即得0.025mol/L的柠檬酸溶液然后用柠檬酸溶液调节磷酸氢二钠溶液，使最终pH值至目标值即可<注> 测定溶解度时刻采用该配制法，其后测溶出曲线时则采用醋酸盐缓冲液(pH4.0)3) 0.05mol/L醋酸/醋酸钠缓冲液(pH4.0)：将0.05mol/L醋酸液-0.05mol/L醋酸钠溶液按(16.4:3.6)比例混合，即得即：取冰醋酸3.0g，加水稀释至1000ml，用0.68%醋酸钠溶液三水合物溶液调pH值至4.0，即得4) pH6.8磷酸盐缓冲液：取磷酸二氢钾1.7g和无水磷酸氢二钠1.775g，加水适量使溶解后，定容至1000ml，即得。

4．中国药典配制法略备注】(1) 配制时，建议采用加热煮沸方式，尤其当使用到十二烷基硫酸钠等固体试剂表面活性剂时，以保证溶解完全不推荐采用超声和磁力搅拌振摇等方式2) 配制后测定溶液pH值，应为理论值的±0.05以内，如未果，应调节3) 当需要进行模拟人体胃液与肠液进行体外溶出度试验时，“含有胃蛋白酶的模拟胃液”和“含有胰酶的模拟肠液”配制法如下：l 含有胃蛋白酶的模拟胃液，英文全称为Simulated Gastric Fluid，简写为SGF有时亦可附有下标“sp”，缩写为SGF[sp]配制法：取2.0氯化钠和3.2g胃蛋白酶（标识应为每mg中含800~2500个活度单位），加7.0ml盐酸和水使溶解至1000ml，即得该溶液pH值应为1.2l 含有胰酶的模拟肠液，英文全称为Simulated Intestinal Fluid，简写为SIF有时亦可附有下标“sp”，缩写为SIF[sp]配制法：取磷酸二氢钾6.8g，加水250ml使溶解，加0.2mol/L氢氧化钠溶液77ml和500ml水，再加胰酶10g使溶解后，用0.2mol/L氢氧化钠溶液或0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至6.8±0.1，再加水稀释至1000ml，即得。

四、 主成分在各溶出介质中的稳定性1. 测定法 建议采用既有质量标准中有关物质项下或含量测定项下液相色谱条件2. 取原料药试验当主药难溶于水，可采用先加少量甲醇溶解浓配后再用溶出介质稀释的办法；配制浓度均为溶出量的100%3. 分别测定pH1.0~1.2、4.0~4.5、6.8和水，4种介质中的溶液稳定性，建议于0、0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、4.0h、6.0h、8.0h测定（对于缓控释制剂，则应延长至24.0h）如不稳定，根据降解速度，可在其后的“pH值-溶解度曲线”和“各条溶出曲线”检测时采用下述方法克服： (1) 迅即测定 即先行完成对照品检测后，再开始溶出度试验 (2) 逐片测定 即1片1片测定，以不至于手忙脚乱 (3) 如主成分定向降解为某固定杂质 测得该杂质峰面积与主成分峰面积的相对校正因子，样品检测时进行换算 (4) 如主成分非定向降解、而是降解为多个杂质 采用倒测法：测定溶出杯中剩余固体颗粒中主成分残留量，随后采用已测得的（百分含量-残留量）/百分含量×100%求得溶出量如此，虽然一条溶出曲线由数片测得，亦无妨，因为原研品片间差异较小，该误差可忽略（此种情形时，建议原研企业与办公室专家共同商议）。

五、 pH值-溶解度曲线的测定1. 测定法 如主成分在介质中不稳定，则采用既有质量标准中有关物质项下或含量测定项下液相色谱条件如稳定，可采用替代的液相色谱法（详见下节）2. 取8支具塞试管，加入过量原料药，分别精密加入5ml 1.0、2.0、……、8.0溶出介质，摇匀，密塞，置37℃水浴中振荡，直至形成过饱和溶液（如稳定、可过夜），滤过，取续滤液经液相测得准确溶解度，绘制曲线 当出现主成分在某pH介质中极不稳定、溶解后即迅速分解，无法测定的情形，则该介质中溶解度可免做3. 对照品溶液根据样品溶液中峰面积的多寡、配制适当浓度可采用甲醇浓配后，用各溶出介质稀释的方法对于难溶性药物，对照品溶液可酌情采用纯甲醇或纯乙腈配制4. 进行多条溶出曲线测定时，溶出介质pH值的选择(1) 如各溶解度均较为一。