探究培养液中酵母菌种群数量的变化.ppt

培养液中酵母菌种群数量的变化培养液中酵母菌种群数量的变化基基 础础 回回 扣扣1、酵母菌、酵母菌酵母菌是单细胞真核生物生长周期短，增殖速度快，还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性）2、种群数量的变化、种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个型曲线有一个K值，即环境容纳量值，即环境容纳量 种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响探究过程•1 1．提出问题：．提出问题：•2 2．作出假设：．作出假设：•3 3．设计实验：．设计实验：•4 4．进行实验：．进行实验：•5 5．分析结果和．分析结果和 表达交流：表达交流：•6 6．得出结论：．得出结论：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈““J J””型增长，随着时间型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈的推移，由于资源和空间有限，呈““S S””型增长。

型增长 连续培养连续培养5 5天，每天用显微镜和血球计数天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前各小组汇报实验结果，结合前4 4天的结果，天的结果，画出酵母种群增长的画出酵母种群增长的曲线图曲线图并进行分析并进行分析 酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈““J J””型增长，但型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈呈““S S””型增长，并最终将全部死亡型增长，并最终将全部死亡 3 3．设计实验：．设计实验：•①①将将10mL10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；•②②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；•③③将试管在将试管在28℃28℃条件下连续培养条件下连续培养5d5d；；•④④每天取样计数酵母菌数量；每天取样计数酵母菌数量；•⑤⑤分析结果，得出结论分析结果，得出结论是否设置对照组和多组重复实验？是否设置对照组和多组重复实验？如何取样计数如何取样计数？？记录表怎样设计记录表怎样设计？？计数时有哪些注意事项计数时有哪些注意事项？？计数室计数室计计数数室室（（中中间间大大方方格格））的的长长和和宽宽各各为为1mm1mm，， 深深 度度 为为 0.1mm0.1mm，， 其其 体体 积积 为为______mm______mm3 3 ，合，合_________mL_________mL。

1mm0.11×10-4血球计数板血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器一种专门计数较大单细胞微生物的仪器计数室计数室计数室分为计数室分为25中格中格（（双线边双线边））每一中格又分为每一中格又分为16小格小格计数室是由计数室是由______________________个小格组成个小格组成25×16=400如何计数？如何计数？五点取样法五点取样法样方法样方法每每mL培养液中酵母菌数量培养液中酵母菌数量== =A ( (平均每个中格酵母细胞数平均每个中格酵母细胞数) )×25×104×稀释倍数稀释倍数A1A2A5A3A4第第 1 1 天天第第 4 4 天天第第 6 6 天天第第 7 7 天天死亡死亡酵母菌数量变化记录表酵母菌数量变化记录表计数时有哪些注意事项？计数时有哪些注意事项？①①从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次轻轻震荡几次；； 如果酵母菌浓度过大，应先如果酵母菌浓度过大，应先稀释稀释②②对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角相邻两边及夹角计数；计数；③③对于已经出芽的酵母菌，对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半芽体达到母细胞大小一半时，即可时，即可作为两个菌体计算；作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数已死亡的酵母菌不计数※※。

④④每个样品一般计数三次，取其每个样品一般计数三次，取其平均值平均值培养液中酵母菌种群数量的变化培养液中酵母菌种群数量的变化 死亡死亡在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？•培养液配制培养液配制•灭菌灭菌•接种接种•培养培养无菌操作无菌操作培养条件培养条件试管试管编号编号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（（℃℃））A A1010——0.10.12828B B1010——0.10.15 5C C——10100.10.12828 针对针对““培养液中酵母菌种群数量的动态变培养液中酵母菌种群数量的动态变化化””，有人提出了新的问题，某同学按下表完，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验成了有关实验 温度、营养物质对酵母菌生长的影响温度、营养物质对酵母菌生长的影响 试管试管编号编号培养液培养液/mL/mL无菌水无菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL温度温度（（℃℃））A A1010——0.10.12828B B1010——0.10.15 5C C——10100.10.12828以计数酵母菌为例以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小以每小方格内含有方格内含有4-5个酵母细胞为宜个酵母细胞为宜,一般稀释一般稀释10倍即可倍即可. (3)将血球计数板用擦镜纸擦净将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加在中央的计数室上加盖专用的厚玻片盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘片的边缘,使菌液缓缓渗入使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内使酵母菌全部沉降到血球计数室内.血球计数板的使用血球计数板的使用(5)计数时计数时,如果使用如果使用16格格×25格规格的计数室格规格的计数室,要按要按对角线位对角线位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4个中格个中格(即即100个个小格小格)的酵母菌数的酵母菌数.如果规格为如果规格为25格格×16格的计数板格的计数板,除了取其除了取其4个对角方位外个对角方位外,还需再数中央的一个中格还需再数中央的一个中格(即即80个小方格个小方格)的酵母菌数的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞格的上方和左方线上的酵母细胞 (7)对每个样品计数三次对每个样品计数三次,取其平均值取其平均值,按下列公式计按下列公式计算每算每1ml菌液中所含的酵母菌个数菌液中所含的酵母菌个数. 3.计算公式计算公式(1)16格格×25格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数稀释倍数(2)25格格x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式:酵母细胞数酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数稀释倍数1 1怎样进行酵母菌的计数？怎样进行酵母菌的计数？ 对一支试管中的培养液对一支试管中的培养液( (可定为可定为10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为总数，盖玻片下，培养液厚度为0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培培养液中酵母菌总数的公式：养液中酵母菌总数的公式：2.5×102.5×104 4x(xx(x为小方格内酵为小方格内酵母菌数母菌数) )2 2从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。

这是为什么？振荡几次这是为什么？3 3本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由设计和操作；如果不需要，请说明理由4 4需要做重复实验吗？需要做重复实验吗？ 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差证估算的准确性，减少误差 不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可 不用重复，只要分组实验获得平均值即可不用重复，只要分组实验获得平均值即可5 5、、怎样记录结果？记录表怎样设计？怎样记录结果？记录表怎样设计？6 6如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1组组第第2 2组组第第3 3组组------------第第n n组组平均值平均值 摇匀试管取摇匀试管取1mL1mL酵母菌培养液稀释酵母菌培养液稀释n n倍后，倍后，再用血球计数板计数，再用血球计数板计数，所得数值所得数值乘以乘以n×2.5×10n×2.5×104 4，，即为即为10mL10mL酵母菌液中酵母菌个数。

酵母菌液中酵母菌个数只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数7 7 对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？ 设计实验：设计实验：A组为实验组，装培养液组为实验组，装培养液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28℃B组装培养液组装培养液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度5℃，与，与A组形成温度条件对照组形成温度条件对照C组不装培养液，只装无菌水组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,环境温度环境温度28℃，与，与A组形成营养条件对照组形成营养条件对照 计数计数计数：首先取样，每计数：首先取样，每 天取样时间大体一致，并要遵守无天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范菌操作规范每次取样前要试管振荡摇匀每次取样前要试管振荡摇匀，正确地使用，正确地使用1mL刻度吸管将刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入酵母菌培养液移入1支干净的试管里，支干净的试管里，然后然后用滴管吸取用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。

在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中如如 记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释参考参考1：一次实验数据记录表：一次实验数据记录表        参考参考2：出：出A、、B、、C各个处理的曲线图各个处理的曲线图。