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上海交通大学生物化学学习要点.pdf

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    • 专业课复习资料(最新版)专业课复习资料(最新版) 封封 面面 1 上海交通大学生物化学学习要点上海交通大学生物化学学习要点 第一章 绪论第一章 绪论 一、生物化学的的概念: 生物化学(biochemistry)是利用化学的原理与方法去探讨生命的一门科学,它是介于化 学、生物学及物理学之间的一门边缘学科 二、生物化学的发展: 1.叙述生物化学阶段:是生物化学发展的萌芽阶段,其主要的工作是分析和研究生物体 的组成成分以及生物体的分泌物和排泄物 2.动态生物化学阶段:是生物化学蓬勃发展的时期就在这一时期,人们基本上弄清了 生物体内各种主要化学物质的代谢途径 3.分子生物学阶段:这一阶段的主要研究工作就是探讨各种生物大分子的结构与其功能 之间的关系 三、生物化学研究的主要方面: 1.生物体的物质组成:高等生物体主要由蛋白质、核酸、糖类、脂类以及水、无机盐等 组成,此外还含有一些低分子物质 2.物质代谢:物质代谢的基本过程主要包括三大步骤:消化、吸收→中间代谢→排泄 其中,中间代谢过程是在细胞内进行的,最为复杂的化学变化过程,它包括合成代谢,分解 代谢,物质互变,代谢调控,能量代谢几方面的内容 3.细胞信号转导:细胞内存在多条信号转导途径,而这些途径之间通过一定的方式方式 相互交织在一起,从而构成了非常复杂的信号转导网络,调控细胞的代谢、生理活动及生长 分化。

      4.生物分子的结构与功能:通过对生物大分子结构的理解,揭示结构与功能之间的关系 5.遗传与繁殖:对生物体遗传与繁殖的分子机制的研究,也是现代生物化学与分子生物 学研究的一个重要内容 第二章 蛋白质的结构与功能第二章 蛋白质的结构与功能 一、 氨基酸: 1.结构特点:氨基酸(amino acid)是蛋白质分子的基本组成单位构成天然蛋白质分子的 氨基酸约有 20 种, 除脯氨酸为α-亚氨基酸、 甘氨酸不含手性碳原子外, 其余氨基酸均为 L-α- 氨基酸 2.分类:根据氨基酸的 R 基团的极性大小可将氨基酸分为四类:① 非极性中性氨基酸(8 种);② 极性中性氨基酸(7 种);③ 酸性氨基酸(Glu 和 Asp);④ 碱性氨基酸(Lys、Arg 和 His) 二、 肽键与肽链: 肽键(peptide bond)是指由一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸的α-氨基经脱水而 形成的共价键(-CO-NH-)氨基酸分子在参与形成肽键之后,由于脱水而结构不完整,称为 氨基酸残基每条多肽链都有两端:即自由氨基端(N 端)与自由羧基端(C 端),肽链的方向 是 N 端→C 端 三、肽键平面(肽单位): 肽键具有部分双键的性质, 不能自由旋转; 组成肽键的四个原子及其相邻的两个α碳原子 处在同一个平面上,为刚性平面结构,称为肽键平面。

      四、蛋白质的分子结构: 蛋白质的分子结构可人为分为一级、二级、三级和四级结构等层次一级结构为线状结 构,二、三、四级结构为空间结构 2 1.一级结构:指多肽链中氨基酸的排列顺序,其维系键是肽键蛋白质的一级结构决定 其空间结构 2.二级结构:指多肽链主链骨架盘绕折叠而形成的构象,借氢键维系主要有以下几种 类型: ⑴α-螺旋:其结构特征为:①主链骨架围绕中心轴盘绕形成右手螺旋;②螺旋每上升一圈 是 3.6 个氨基酸残基,螺距为 0.54nm;③ 相邻螺旋圈之间形成许多氢键;④ 侧链基团位于 螺旋的外侧 影响α-螺旋形成的因素主要是:① 存在侧链基团较大的氨基酸残基;② 连续存在带相 同电荷的氨基酸残基;③ 存在脯氨酸残基 ⑵β-折叠:其结构特征为:① 若干条肽链或肽段平行或反平行排列成片;② 所有肽键的 C=O 和 N—H 形成链间氢键;③侧链基团分别交替位于片层的上、下方 ⑶β-转角:多肽链 180°回折部分,通常由四个氨基酸残基构成,借 1、4 残基之间形成氢 键维系 ⑷无规卷曲:主链骨架无规律盘绕的部分 3.三级结构:指多肽链所有原子的空间排布其维系键主要是非共价键(次级键) :氢键、 疏水键、范德华力、离子键等,也可涉及二硫键。

      4.四级结构:指亚基之间的立体排布、接触部位的布局等,其维系键为非共价键亚基 是指参与构成蛋白质四级结构的而又具有独立三级结构的多肽链 五、 蛋白质的理化性质: 1.两性解离与等电点:蛋白质分子中仍然存在游离的氨基和游离的羧基,因此蛋白质与 氨基酸一样具有两性解离的性质蛋白质分子所带正、负电荷相等时溶液的 pH 值称为蛋白 质的等电点 2.蛋白质的胶体性质:蛋白质具有亲水溶胶的性质蛋白质分子表面的水化膜和表面电 荷是稳定蛋白质亲水溶胶的两个重要因素 3.蛋白质的紫外吸收:蛋白质分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸残基对紫外光有吸收, 以色氨酸吸收最强,最大吸收峰为 280nm 4.蛋白质的变性:蛋白质在某些理化因素的作用下,其特定的空间结构被破坏而导致其 理化性质改变及生物活性丧失,这种现象称为蛋白质的变性引起蛋白质变性的因素有: 高 温、高压、电离辐射、超声波、紫外线及有机溶剂、重金属盐、强酸强碱等绝大多数蛋白 质分子的变性是不可逆的 六、蛋白质的分离与纯化: 1.盐析与有机溶剂沉淀:在蛋白质溶液中加入大量中性盐,以破坏蛋白质的胶体性质, 使蛋白质从溶液中沉淀析出,称为盐析常用的中性盐有:硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。

      盐 析时,溶液的 pH 在蛋白质的等电点处效果最好凡能与水以任意比例混合的有机溶剂,如 乙醇、甲醇、丙酮等,均可引起蛋白质沉淀 2.电泳:蛋白质分子在高于或低于其 pI 的溶液中带净的负或正电荷,因此在电场中可以 移动电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷量以及分子大小 3.透析:利用透析袋膜的超滤性质,可将大分子物质与小分子物质分离开 4.层析:利用混合物中各组分理化性质的差异,在相互接触的两相(固定相与流动相) 之间的分布不同而进行分离主要有离子交换层析,凝胶层析,吸附层析及亲和层析等, 其 中凝胶层析可用于测定蛋白质的分子量 5.超速离心:利用物质密度的不同,经超速离心后,分布于不同的液层而分离超速离 心也可用来测定蛋白质的分子量,蛋白质的分子量与其沉降系数 S 成正比 七、氨基酸顺序分析: 3 蛋白质多肽链的氨基酸顺序分析,即蛋白质一级结构的测定,主要有以下几个步骤: 1. 分离纯化蛋白质,得到一定量的蛋白质纯品; 2. 取一定量的样品进行完全水解,再测定蛋白质的氨基酸组成; 3. 分析蛋白质的 N-端和 C-端氨基酸; 4. 采用特异性的酶(如胰凝乳蛋白酶)或化学试剂(如溴化氰)将蛋白质处理为若干条 肽段; 5. 分离纯化单一肽段; 6. 测定各条肽段的氨基酸顺序。

      一般采用 Edman 降解法,用异硫氰酸苯酯进行反应,将 氨基酸降解后,逐一进行测定; 7. 至少用两种不同的方法处理蛋白质,分别得到其肽段的氨基酸顺序; 8. 将两套不同肽段的氨基酸顺序进行比较,以获得完整的蛋白质分子的氨基酸顺序 第三章 核酸的结构与功能第三章 核酸的结构与功能 一、核酸的化学组成: 1.含氮碱:参与核酸和核苷酸构成的含氮碱主要分为嘌呤碱和嘧啶碱两大类组成核苷 酸的嘧啶碱主要有三种——尿嘧啶(U) 、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T) ,它们都是嘧啶的衍 生物组成核苷酸的嘌呤碱主要有两种——腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G) ,它们都是嘌呤的衍 生物 2.戊糖:核苷酸中的戊糖主要有两种,即β-D-核糖与β-D-2-脱氧核糖,由此构成的核苷 酸也分为核糖核苷酸与脱氧核糖核酸两大类 3.核苷:核苷是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物通常是由核糖或脱氧核 糖的 C1’β-羟基与嘧啶碱 N1 或嘌呤碱 N9 进行缩合,故生成的化学键称为β,N 糖苷键其 中由 D-核糖生成者称为核糖核苷, 而由脱氧核糖生成者则称为脱氧核糖核苷 由“稀有碱基” 所生成的核苷称为“稀有核苷”假尿苷(ψ)就是由 D-核糖的 C1’ 与尿嘧啶的 C5 相连而生 成的核苷。

      二、核苷酸的结构与命名: 核苷酸是由核苷与磷酸经脱水缩合后生成的磷酸酯类化合物,包括核糖核苷酸和脱氧核 糖核酸两大类最常见的核苷酸为 5’-核苷酸(5’ 常被省略) 5’-核苷酸又可按其在 5’位缩 合的磷酸基的多少,分为一磷酸核苷(核苷酸) 、二磷酸核苷和三磷酸核苷 此外,生物体内还存在一些特殊的环核苷酸,常见的为环一磷酸腺苷(cAMP)和环一磷酸 鸟苷(cGMP) ,它们通常是作为激素作用的第二信使 核苷酸通常使用缩写符号进行命名第一位符号用小写字母 d 代表脱氧,第二位用大写 字母代表碱基,第三位用大写字母代表磷酸基的数目,第四位用大写字母 P 代表磷酸 三、核酸的一级结构: 核苷酸通过 3’,5’-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧链的多核苷酸长链化合物就称为核 酸核酸具有方向性,5’-位上 F 具有自由磷酸基的末端称为 5’-端,3’-位上具有自由羟基的 末端称为 3’-端 DNA 由 dAMP、dGMP、dCMP 和 dTMP 四种脱氧核糖核苷酸所组成DNA 的一级结构 就是指 DNA 分子中脱氧核糖核苷酸的种类、数目、排列顺序及连接方式RNA 由 AMP, GMP,CMP,UMP 四种核糖核苷酸组成。

      RNA 的一级结构就是指 RNA 分子中核糖核苷酸 的种类、数目、排列顺序及连接方式 四、DNA 的二级结构: DNA 双螺旋结构是 DNA 二级结构的一种重要形式, 它是 Watson 和 Crick 两位科学家于 1953 年提出来的一种结构模型, 其主要实验依据是 Chargaff 研究小组对 DNA 的化学组成进 行的分析研究,即 DNA 分子中四种碱基的摩尔百分比为 A=T、G=C、A+G=T+C(Chargaff 4 原则) ,以及由 Wilkins 研究小组完成的 DNA 晶体 X 线衍射图谱分析 天然 DNA 的二级结构以 B 型为主,其结构特征为:①为右手双螺旋,两条链以反平行 方式排列; ②主链位于螺旋外侧, 碱基位于内侧; ③两条链间存在碱基互补, 通过氢键连系, 且 A-T、G-C(碱基互补原则) ; ④螺旋的稳定因素为氢键和碱基堆砌力;⑤螺旋的螺距为 3.4nm,直径为 2nm 五、DNA 的超螺旋结构: 双螺旋的 DNA 分子进一步盘旋形成的超螺旋结构称为 DNA 的三级结构 绝大多数原 核生物的 DNA 都是共价封闭的环状双螺旋,其三级结构呈麻花状 在真核生物中,双螺 旋的 DNA 分子围绕一蛋白质八聚体进行盘绕,从而形成特殊的串珠状结构,称为核小体。

      核小体结构属于 DNA 的三级结构 六、DNA 的功能: DNA 的基本功能是作为遗传信息的载体, 为生物遗传信息复制以及基因信息的转录提供 模板 DNA 分子中具有特定生物学功能的片段称为基因 (gene) 一个生物体的全部 DNA 序列 称为基因组(genome) 基因组的大小与生物的复杂性有关 七、RNA 的空间结构与功能: RNA 分子的种类较多,分子大小变化较大,功能多样化RNA 通常以单链存在,但也 可形成局部的双螺旋结构 1. mRNA 的结构与功能: mRNA 是单链核酸, 其在真核生物中的初级产物称为 HnRNA 大多数真核成熟的 mRNA 分子具有典型的 5’-端的 7-甲基鸟苷三磷酸(m7GTP)帽子结构 和 3’-端的多聚腺苷酸(polyA)尾巴结构mRNA 的功能是为蛋白质的合成提供模板,分子中 带有遗传密码mRNA 分子中每三个相邻的核苷酸组成一组,在蛋白质翻译合成时代表一 个特定的氨基酸,这种核苷酸三联体称为遗传密码(coden) 2.tRNA 的结构与功能:tRNA 是分子最小,但含有稀有碱基最多的 RNAtRNA 的二 级结构由于局部双螺旋的形成而表现为“三叶草”形, 故称为“三叶草”结构, 可分为五个部分: ①氨基酸臂:由 tRNA 的 5’-端和 3’-端构成的局部双螺旋,3’-端都带有-CCA-O。

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